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公开(公告)号：CN112159853A
公开(公告)日：2021-01-01
申请号：CN202010913804.6
申请日：2020-09-03
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6818 , C12Q1/06
Abstract: 本发明公开了一种基于aPCR和DNA walker的黄龙菌检测方法，涉及细菌检测领域，该方法包括：选择待检测靶标并将其与DNA walker探针作用，绘制标准曲线，DNA walker探针包括纳米颗粒，纳米颗粒上修饰有特异性酶链DNAzyme和若干带有FAM荧光基团的底物链，待检测靶标与特异性酶链DNAzyme作用，特异性酶链DNAzyme能够切割底物链上的FAM荧光基团，体系产生荧光；从待测样品中提取总DNA，并进行aPCR扩增，将扩增产物和DNA walker探针混合反应0.5～2h后；将检测结果与标准曲线进行比对。本发明在高通量检测中的成本较低，并且涉及到信号的二次转换，因此准确度较高。
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公开(公告)号：CN117867014A
公开(公告)日：2024-04-12
申请号：CN202311614850.6
申请日：2023-11-27
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明提供一种基于真空渗透法的辣椒转基因方法，包括以下步骤：S1、取辣椒种子进行培养，待其长到两片子叶时，即得待转化受体材料；S2、制备含有表达载体和目标基因的农杆菌侵染液，所述农杆菌侵染液OD600值为0.6～1.4；S3、将上述待转化受体材料去除茎顶端生长点及一片子叶，在压强‑0.1～‑0.06Mpa条件下，对伤口处进行侵染2～10min，得浸染植株；S4、将上述浸染植株进行培养，生长一至两周后，筛选出阳性植株即得。本发明通过严格控制真空侵染压强、菌液侵染浓度和侵染时间等参数，可快速、高效的实现辣椒的多种表达载体的转化，最高转化率达到73.81％；此外，本发明操作简单且周期短、无需无菌环境、成本低，更容易实现批量转化操作。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113151350B
公开(公告)日：2023-03-24
申请号：CN202110092522.9
申请日：2021-01-24
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/84 , C07K14/415 , A01H5/00 , A01H6/54
Abstract: 本发明提供了一种豇豆原位转化方法，包括以下步骤：对豇豆种子催芽至子叶节完全露出，获得转化受体；制备含有表达载体和目的基因的农杆菌的浸染液；在负压条件下，将所述转化受体浸泡在所述浸染液中进行浸染；将浸染后的转化受体移入土壤进行培育，两周后筛选幼苗中的阳性植株。相对于传统的组培方法，本方法可有效提高豇豆种子的转化率，且操作方便，培育效率高，成本低。
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公开(公告)号：CN117310181A
公开(公告)日：2023-12-29
申请号：CN202311205128.7
申请日：2023-09-17
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明涉及靶蛋白泛素化类型及修饰强弱的检测方法，具体涉及一种植物体内检测靶蛋白泛素化类型及修饰强弱的方法，包括以下步骤：(1)构建不同位点突变的泛素突变质粒并将其转化到农杆菌感受态中；(2)构建靶蛋白质粒并将其转化到农杆菌感受态中；(3)将步骤(2)中的农杆菌感受态培养后的菌液分别与步骤(1)中的农杆菌感受态培养后的菌液混合，注射烟草叶片，1～3天后提取总蛋白进行WB‑COIP相对定量分析。该方法可以快速的在植物体内进行，操作简单快速，实验周期短，且能同时实现泛素化类型及修饰强弱的确定。
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公开(公告)号：CN113151350A
公开(公告)日：2021-07-23
申请号：CN202110092522.9
申请日：2021-01-24
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/84 , C07K14/415 , A01H5/00 , A01H6/54
Abstract: 本发明提供了一种豇豆原位转化方法，包括以下步骤：对豇豆种子催芽至子叶节完全露出，获得转化受体；制备含有表达载体和目的基因的农杆菌的浸染液；在负压条件下，将所述转化受体浸泡在所述浸染液中进行浸染；将浸染后的转化受体移入土壤进行培育，两周后筛选幼苗中的阳性植株。相对于传统的组培方法，本方法可有效提高豇豆种子的转化率，且操作方便，培育效率高，成本低。
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公开(公告)号：CN112048520A
公开(公告)日：2020-12-08
申请号：CN202011112289.8
申请日：2020-10-16
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明涉及一种转基因抗虫豇豆的培育方法，其包括如下步骤：获取豇豆无菌子叶节；构建含pUBI、Cry1C*基因的质粒，其中，所述pUBI的序列如SEQ ID NO:1所示，所述Cry1C*基因的序列如SEQ ID NO:2所示；利用携带含pUBI、Cry1C*基因的质粒的农杆菌浸染豇豆无菌子叶节，诱导形成愈伤组织，分化出不定芽，生根，长成豇豆植株，从中筛选含Cry1C*基因的转基因豇豆植株；采用转基因豇豆植株自交，获得纯合的转基因豇豆品种。该培育方法能够培育出抗螟鳞翅目害虫的转基因抗虫豇豆品种。
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公开(公告)号：CN112048520B
公开(公告)日：2023-06-30
申请号：CN202011112289.8
申请日：2020-10-16
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明涉及一种转基因抗虫豇豆的培育方法，其包括如下步骤：获取豇豆无菌子叶节；构建含pUBI、Cry1C*基因的质粒，其中，所述pUBI的序列如SEQ ID NO:1所示，所述Cry1C*基因的序列如SEQ ID NO:2所示；利用携带含pUBI、Cry1C*基因的质粒的农杆菌浸染豇豆无菌子叶节，诱导形成愈伤组织，分化出不定芽，生根，长成豇豆植株，从中筛选含Cry1C*基因的转基因豇豆植株；采用转基因豇豆植株自交，获得纯合的转基因豇豆品种。该培育方法能够培育出抗螟鳞翅目害虫的转基因抗虫豇豆品种。
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