一种烟草花叶病毒属病毒通用检测引物及其方法

    公开(公告)号:CN107058611B

    公开(公告)日:2020-02-04

    申请号:CN201611174200.4

    申请日:2016-12-19

    Abstract: 本发明属于分子生物学和病毒学技术领域,具体涉及一种烟草花叶病毒属病毒通用检测引物及其方法;所述的烟草花叶病毒属病毒通用检测引物对序列为:正向引物TobamodF:5’‑TKGAYGGNGTBCCNGGNTGYGG‑3’,反向引物TobamodR:5’‑ACNGAVTBNABCTGTAATTGCTAT‑3’;本发明中的检测引物是基于烟草花叶病毒属中的32种病毒基因组保守区序列进行设计,用该属中的7种病毒对该对引物进行扩增效果验证,扩增效果均较好;从而建立了一种能够检测至少7种烟草花叶病毒属病毒的通用检测引物及方法,且具有检测效率高、灵敏度高、成本低的特点。

    注射接种获得感染云南烟草丛顶病4种病原物病株的方法

    公开(公告)号:CN108990586A

    公开(公告)日:2018-12-14

    申请号:CN201810620243.3

    申请日:2018-06-15

    Abstract: 本发明涉及一种注射接种获得感染云南烟草丛顶病4种病原物病株的方法,属于植物病害技术领域,具体步骤为:取0.5 g携带云南烟草丛顶病4种病原物的植物组织用液氮研磨成粉末,再加入PBS缓冲液研磨,所得匀浆离心待注射;在植株叶片上扎孔注射;注射接种半个月后,进行症状观察以及RT-PCR检测,即可获得感染4种云南烟草丛顶病病原物的活体样本。本发明能高效的将云南烟草丛顶病4种病原物同时接种在健康植株上,突破通过摩擦接种不能把云南烟草丛顶病4种病原物均接种在健康植株上的技术屏障,避免了利用蚜虫传毒必须从活体植株获毒的限制以及因蚜虫传毒效率差异而引起试验误差的缺陷,丰富了接种所需带毒植物组织的保存方式。

    一种烟草花叶病毒属病毒通用检测引物及其方法

    公开(公告)号:CN107058611A

    公开(公告)日:2017-08-18

    申请号:CN201611174200.4

    申请日:2016-12-19

    Abstract: 本发明属于分子生物学和病毒学技术领域,具体涉及一种烟草花叶病毒属病毒通用检测引物及其方法;所述的烟草花叶病毒属病毒通用检测引物对序列为:正向引物TobamodF:5’‑TKGAYGGNGTBCCNGGNTGYGG‑3’,反向引物TobamodR:5’‑ACNGAVTBNABCTGTAATTGCTAT‑3’;本发明中的检测引物是基于烟草花叶病毒属中的32种病毒基因组保守区序列进行设计,用该属中的7种病毒对该对引物进行扩增效果验证,扩增效果均较好;从而建立了一种能够检测至少7种烟草花叶病毒属病毒的通用检测引物及方法,且具有检测效率高、灵敏度高、成本低的特点。

    一种同步检测SPVG、SPLV和SPMMV的方法

    公开(公告)号:CN106755602B

    公开(公告)日:2020-02-04

    申请号:CN201710182795.6

    申请日:2017-03-24

    Abstract: 本发明涉及一种同步检测SPVG、SPLV和SPMMV的方法,属于植物保护领域;通过分别设计合成SPVG、SPLV和SPMMV的正向引物、反向引物和探针,建立同时检测三种病毒的实时荧光多重RT‑PCR方法,检测植物细胞色素氧化酶基因(COX)的引物和探针被作为内参纳入实时荧光多重RT‑PCR的体系构建,避免因模板核酸质量差导致的假阴性结果。本发明对SPVG的检测灵敏度达到10‑6核酸模板稀释倍数,对SPLV、SPMMV和COX的检测灵敏度分别达到10‑7核酸模板稀释倍数,具有直观、快速、高效、特异性强、灵敏度高等优点,可确保SPVG、SPLV和SPMMV在植物检疫和甘薯无毒种苗筛选等大量样品检测时的质量和效率,具有广阔的应用前景。

    利用dot-ELISA检测单头灰飞虱体内水稻条纹病毒的方法

    公开(公告)号:CN104267186A

    公开(公告)日:2015-01-07

    申请号:CN201410544959.1

    申请日:2014-10-16

    CPC classification number: G01N33/577

    Abstract: 本发明提供一种利用dot-ELISA检测单头灰飞虱体内水稻条纹病毒的方法,属于植物保护领域。该发明通过对灰飞虱的采集和研磨后,利用水稻条纹病毒单克隆抗体,建立检测单头介体灰飞虱携带水稻条纹病毒的dot-ELISA体系。该检测方法灵敏度高、特异性强,适用于大批量的单头灰飞虱样品检测,且不需要特殊仪器设备,具有结果判定简单易行、检测结果便于长期保存等特点,可对田间灰飞虱携带水稻条纹病毒的带毒率进行大规模调查和检测,为田间水稻条纹叶枯病的爆发流行进行预测预报并采取相应的防控措施提供技术支撑。

    一种同步检测SPVG、SPLV和SPMMV的方法

    公开(公告)号:CN106755602A

    公开(公告)日:2017-05-31

    申请号:CN201710182795.6

    申请日:2017-03-24

    Abstract: 本发明涉及一种同步检测SPVG、SPLV和SPMMV的方法,属于植物保护领域;通过分别设计合成SPVG、SPLV和SPMMV的正向引物、反向引物和探针,建立同时检测三种病毒的实时荧光多重RT‑PCR方法,检测植物细胞色素氧化酶基因(COX)的引物和探针被作为内参纳入实时荧光多重RT‑PCR的体系构建,避免因模板核酸质量差导致的假阴性结果。本发明对SPVG的检测灵敏度达到10‑6核酸模板稀释倍数,对SPLV、SPMMV和COX的检测灵敏度分别达到10‑7核酸模板稀释倍数,具有直观、快速、高效、特异性强、灵敏度高等优点,可确保SPVG、SPLV和SPMMV在植物检疫和甘薯无毒种苗筛选等大量样品检测时的质量和效率,具有广阔的应用前景。

    利用dot-ELISA检测单头灰飞虱体内水稻条纹病毒的方法

    公开(公告)号:CN104267186B

    公开(公告)日:2016-06-08

    申请号:CN201410544959.1

    申请日:2014-10-16

    Abstract: 本发明提供一种利用dot-ELISA检测单头灰飞虱体内水稻条纹病毒的方法,属于植物保护领域。该发明通过对灰飞虱的采集和研磨后,利用水稻条纹病毒单克隆抗体,建立检测单头介体灰飞虱携带水稻条纹病毒的dot-ELISA体系。该检测方法灵敏度高、特异性强,适用于大批量的单头灰飞虱样品检测,且不需要特殊仪器设备,具有结果判定简单易行、检测结果便于长期保存等特点,可对田间灰飞虱携带水稻条纹病毒的带毒率进行大规模调查和检测,为田间水稻条纹叶枯病的爆发流行进行预测预报并采取相应的防控措施提供技术支撑。

    一种饲喂刺吸式口器昆虫研究植物虫传病毒的轻便装置

    公开(公告)号:CN208030023U

    公开(公告)日:2018-11-02

    申请号:CN201820470684.5

    申请日:2018-04-04

    Abstract: 本实用新型涉及一种饲喂刺吸式口器昆虫研究植物虫传病毒的轻便装置,属于植物保护专业技术领域,所述饲喂刺吸式口器昆虫研究植物虫传病毒的轻便装置包括环形发泡聚乙烯骨架、防虫网布、U型卡扣,骨架的两圆形侧面缝有防虫网布,骨架取侧立面以半圆的范围进行开口均分为两个开口半圆,两个开口半圆内分别穿入弹簧钢丝作为结构支撑,U型卡扣分为a边和b边,a边固定连接至骨架其中一个开口半圆,b边扣在骨架另一个开口半圆上。本实用新型轻便易用,可以在研究刺吸式口器昆虫传播植物虫传病毒的过程中既提供一个密闭小型网箱来饥饿昆虫,又能直接夹在植物叶片上面限位进行昆虫的获毒和传毒。

Patent Agency Ranking