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公开(公告)号:CN106755602A
公开(公告)日:2017-05-31
申请号:CN201710182795.6
申请日:2017-03-24
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种同步检测SPVG、SPLV和SPMMV的方法,属于植物保护领域;通过分别设计合成SPVG、SPLV和SPMMV的正向引物、反向引物和探针,建立同时检测三种病毒的实时荧光多重RT‑PCR方法,检测植物细胞色素氧化酶基因(COX)的引物和探针被作为内参纳入实时荧光多重RT‑PCR的体系构建,避免因模板核酸质量差导致的假阴性结果。本发明对SPVG的检测灵敏度达到10‑6核酸模板稀释倍数,对SPLV、SPMMV和COX的检测灵敏度分别达到10‑7核酸模板稀释倍数,具有直观、快速、高效、特异性强、灵敏度高等优点,可确保SPVG、SPLV和SPMMV在植物检疫和甘薯无毒种苗筛选等大量样品检测时的质量和效率,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN106755602B
公开(公告)日:2020-02-04
申请号:CN201710182795.6
申请日:2017-03-24
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种同步检测SPVG、SPLV和SPMMV的方法,属于植物保护领域;通过分别设计合成SPVG、SPLV和SPMMV的正向引物、反向引物和探针,建立同时检测三种病毒的实时荧光多重RT‑PCR方法,检测植物细胞色素氧化酶基因(COX)的引物和探针被作为内参纳入实时荧光多重RT‑PCR的体系构建,避免因模板核酸质量差导致的假阴性结果。本发明对SPVG的检测灵敏度达到10‑6核酸模板稀释倍数,对SPLV、SPMMV和COX的检测灵敏度分别达到10‑7核酸模板稀释倍数,具有直观、快速、高效、特异性强、灵敏度高等优点,可确保SPVG、SPLV和SPMMV在植物检疫和甘薯无毒种苗筛选等大量样品检测时的质量和效率,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN107058611B
公开(公告)日:2020-02-04
申请号:CN201611174200.4
申请日:2016-12-19
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明属于分子生物学和病毒学技术领域,具体涉及一种烟草花叶病毒属病毒通用检测引物及其方法;所述的烟草花叶病毒属病毒通用检测引物对序列为:正向引物TobamodF:5’‑TKGAYGGNGTBCCNGGNTGYGG‑3’,反向引物TobamodR:5’‑ACNGAVTBNABCTGTAATTGCTAT‑3’;本发明中的检测引物是基于烟草花叶病毒属中的32种病毒基因组保守区序列进行设计,用该属中的7种病毒对该对引物进行扩增效果验证,扩增效果均较好;从而建立了一种能够检测至少7种烟草花叶病毒属病毒的通用检测引物及方法,且具有检测效率高、灵敏度高、成本低的特点。
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公开(公告)号:CN107058611A
公开(公告)日:2017-08-18
申请号:CN201611174200.4
申请日:2016-12-19
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明属于分子生物学和病毒学技术领域,具体涉及一种烟草花叶病毒属病毒通用检测引物及其方法;所述的烟草花叶病毒属病毒通用检测引物对序列为:正向引物TobamodF:5’‑TKGAYGGNGTBCCNGGNTGYGG‑3’,反向引物TobamodR:5’‑ACNGAVTBNABCTGTAATTGCTAT‑3’;本发明中的检测引物是基于烟草花叶病毒属中的32种病毒基因组保守区序列进行设计,用该属中的7种病毒对该对引物进行扩增效果验证,扩增效果均较好;从而建立了一种能够检测至少7种烟草花叶病毒属病毒的通用检测引物及方法,且具有检测效率高、灵敏度高、成本低的特点。
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