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公开(公告)号：CN106755112A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201611224097.X
申请日：2016-12-27
Applicant: 云南农业大学
IPC: C12N15/877 , A01K67/027
CPC classification number: C12N15/877 , A01K67/0273 , A01K2227/10 , A01K2227/102 , A01K2227/103 , C12N15/8772 , C12N15/8773
Abstract: 本发明涉及一种利用体细胞克隆技术培育地方优良家畜品种的方法。利用体细胞克隆技术培育家畜优良品种，通过从家畜群体中筛选出经济性状优良的个体，建立成纤维细胞系，利用体细胞核移植技术对上述筛选出的个体进行克隆，待克隆出生的个体达到适配年龄后，进行组合杂交，再对每一杂交组合的F1代个体的经济性状进行鉴定，对达不到选育标准的F1代个体父母，查明是父代还是母代遗传引起的性状，然后对相应的父母个体进行淘汰，对留下的后代个体中可以稳定遗传的父母再进行组群，选育出优良家畜品种。通过对本发明的实施，能批量地获得具有极其优良经济性状的家畜个体，实现家畜特有品种资源的可持续开发利用，提高家畜的育种效率和选育的成功率。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110295194A
公开(公告)日：2019-10-01
申请号：CN201910497796.9
申请日：2019-06-10
Applicant: 云南农业大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/90 , C12N5/10 , A01K67/027
Abstract: 本发明涉及一种猪内源性逆转录病毒失活克隆猪的构建方法，属动物生物技术领域。通过ddPCR和全基因组测序比对，确定猪内源性逆转录病毒在猪胎儿成纤维细胞基因组中的拷贝数和其占据染色体的位置，利用CRISPR/Cas9技术构建猪内源性逆转录病毒失活载体转染至猪胎儿成纤维细胞，筛选获得的阳性细胞进行体细胞核移植，待妊娠时取出胎儿鉴定其失活与否，利用ddPCR和全基因组测序比对后，再对该猪胎儿成纤维细胞进行基因打靶，依次循环，直至获得猪内源性逆转录病毒完全失活的细胞后进行体细胞核移植，最终获得猪内源性逆转录病毒完全失活的克隆猪。本发明克服了猪内源性逆转录病毒失活效率低、成功率低的问题，对解决异种器官移植的安全性问题具有重要的意义。
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公开(公告)号：CN103266122A
公开(公告)日：2013-08-28
申请号：CN201310209089.8
申请日：2013-05-31
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种利用TALEN技术的高效定点转基因方法，属于分子生物学领域；利用TALEN技术在生物体基因组中的特定位置设计出具有特异性序列TALEN靶点、构建TALEN质粒，同时，构建外源基因质粒；再将TALEN质粒和外源基因共同转染受体细胞，然后，在受体细胞基因组待整合的位置上切开一个口；外源基因就会在受体细胞基因组的切口处将外源基因序列自动插入。本发明实现了外源基因在基因组上定点整合，本方法操作简单，可控性高，实用性强。
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公开(公告)号：CN110373389A
公开(公告)日：2019-10-25
申请号：CN201910497785.0
申请日：2019-06-10
Applicant: 云南农业大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/877 , A01K67/027
Abstract: 本发明涉及一种适合胰岛细胞及皮肤等组织异种移植供体猪的构建方法，属动物生物技术领域。在猪胎儿成纤维细胞的基础上，利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除GGTA1、CMAH、B4GalNT2三个基因并定点插入hCD55、hCD59、hCD46三个人源化修饰基因，再结合体细胞核移植技术构建上述六基因修饰的异种移植供体的基础猪，在此基础猪上再敲除B2M基因，同时定点插入hCD47、A20、CTLA4-Ig三个基因，再利用体细胞核移植技术构建多基因修饰的胰岛细胞及皮肤异种移植供体猪，再对该供体猪进行功能验证，获得适合胰岛细胞及皮肤异种移植供体猪。本发明为异种胰岛细胞及皮肤等移植供体猪的开发提供了全新的研究思路和方法，促进了猪作为异种胰岛细胞及皮肤移植的临床转化和应用。
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公开(公告)号：CN106755112B
公开(公告)日：2019-07-12
申请号：CN201611224097.X
申请日：2016-12-27
Applicant: 云南农业大学
IPC: C12N15/877 , A01K67/027
Abstract: 本发明涉及一种利用体细胞克隆技术培育地方优良家畜品种的方法。利用体细胞克隆技术培育家畜优良品种，通过从家畜群体中筛选出经济性状优良的个体，建立成纤维细胞系，利用体细胞核移植技术对上述筛选出的个体进行克隆，待克隆出生的个体达到适配年龄后，进行组合杂交，再对每一杂交组合的F1代个体的经济性状进行鉴定，对达不到选育标准的F1代个体父母，查明是父代还是母代遗传引起的性状，然后对相应的父母个体进行淘汰，对留下的后代个体中可以稳定遗传的父母再进行组群，选育出优良家畜品种。通过对本发明的实施，能批量地获得具有极其优良经济性状的家畜个体，实现家畜特有品种资源的可持续开发利用，提高家畜的育种效率和选育的成功率。
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公开(公告)号：CN104894166A
公开(公告)日：2015-09-09
申请号：CN201410076057.X
申请日：2014-03-04
Applicant: 云南农业大学
IPC: C12N15/877 , A01K67/027
Abstract: 本发明涉及一种利用连续克隆技术生产孤雌生殖哺乳动物的方法，属于繁殖生物学领域。本发明包括哺乳动物的卵母细胞孤雌激活、孤雌胚胎移植、孤雌胎儿成纤维细胞的分离和连续的体细胞核移植；本发明将去脂后的成熟哺乳动物卵母细胞进行孤雌激活获得孤雌胚胎，移植到代孕妈妈体内，诊断为妊娠后根据不同的哺乳动物在不同的日龄取出成活孤雌胎儿，建立哺乳动物孤雌胎儿成纤维细胞系，并将其作为最初供体细胞，利用体细胞核移植技术进行连续克隆获得哺乳动物的孤雌生殖个体，此技术克服了哺乳动物孤雌生殖胚胎在体内早期停止发育的情况，成功延长哺乳动物的孤雌胚胎在体内的发育时间，并最终获得成活的孤雌生殖哺乳动物。
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