加帽mRNA的体外合成方法
    1.
    发明公开

    公开(公告)号:CN118792372A

    公开(公告)日:2024-10-18

    申请号:CN202410920023.8

    申请日:2024-07-10

    Abstract: 本申请提供了加帽mRNA的体外合成方法,先通过添加转录底物于含辅因子缓冲液中进行mRNA转录合成反应;将获得的转录混合物进行高温退火;之后直接补充加帽底物及含辅因子缓冲液进行加帽反应,连续操作即可实现加帽mRNA的合成。相比于现有方法,本申请具有如下优势:通过程序化调控多酶级联反应温度和反应体系组成的策略实现了mRNA体外转录和酶法加帽集成,缩短了加帽mRNA的生产流程及时间;无需使用合成成本高、价格昂贵、需要特定启动子的帽类似物,降低了生产成本;无需使用经特定序列设计、重组表达且导致活性双重降低的融合酶,提高了mRNA产量收率;启动加帽反应的方式简单,更适用于大规模的生产。

    一种mRNA的分离纯化方法
    3.
    发明授权

    公开(公告)号:CN114907430B

    公开(公告)日:2023-12-01

    申请号:CN202210722756.1

    申请日:2022-06-21

    Abstract: 本发明提供了一种mRNA的分离纯化方法,所述mRNA的分离纯化方法包括将待分离纯化的mRNA原料经过两次疏水层析进行分离纯化。利用本发明方法得到的mRNA回收率高,纯度高;避免使用价格昂贵的层析介质,成本相对较低;操作简单并且能在室温下进行操作,并且无需有毒试剂,易于放大到工业化规模生产。总之,本发明提供了一种简便、成本低、易于放大的分离纯化获得高收率、高纯度的mRNA的方法,具有很好的实际应用价值。(56)对比文件王孝恩.RNA和DNA之间的结构变化显示的疏水性差异.潍坊教育学院学报.2006,(第04期),10-13.郭新红,等.旱生植物梭梭幼苗信使核糖核酸(mRNA)的分离与纯化.湖南师范大学自然科学学报.2001,(第02期),70-72.Hao Li,等.A hydrophobic interactionchromatography strategy for purificationof inactivated foot-and-mouth diseasevirus.Protein Expression andPurification.2015,第113卷23-29.Xue Feng,等.Messenger RNAchromatographic purification: advancesand challenges.Journal of ChromatographyA.2023,第1707卷第464321篇第1-14页.吴银飞,等.疏水作用层析法纯化抗乙肝病毒核心抗原单克隆抗体.细胞与分子免疫学杂志.2010,第26卷(第06期),560-562.杨利,等.疏水膜色谱法对生物大分子的快速纯化.色谱.1999,(第04期),335-338.殷玉和,等.中空纤维超滤和疏水层析大规模纯化质粒DNA.中国生物制品学杂志.2007,(第02期),133-135.

    一种细菌多糖结合疫苗及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN108743936B

    公开(公告)日:2022-03-15

    申请号:CN201810612581.2

    申请日:2018-06-14

    Abstract: 本发明提供了一种细菌多糖结合疫苗及其制备方法与应用,所述细菌多糖结合疫苗包括以共价键结合的乙肝核心抗原与细菌多糖;本发明提供的细菌多糖结合疫苗可将细菌多糖非T细胞依赖性抗原转换为T细胞依赖性抗原,产生Th1型细胞免疫,相比于普通现有的多糖疫苗,显著增强特异性抗体滴度、亲和力(硫氰酸盐测定出的亲和力指数可达到2mol/L左右,最高可达到2.17mol/L)以及持效性,且具有突出的稳定性,在37℃下储存21天,游离多糖含量未见显著增加,易于放大生产,具有较高的实际应用价值。

    一种多抗原仿生流感疫苗及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN109821014B

    公开(公告)日:2021-04-13

    申请号:CN201910276649.9

    申请日:2019-04-08

    Abstract: 本发明提供了一种多抗原仿生流感疫苗及其制备方法和应用,所述多抗原仿生流感疫苗包括病毒样颗粒载体蛋白、表面抗原和内腔抗原,所述表面抗原分布于病毒样颗粒载体蛋白的表面,内腔抗原分布于病毒样颗粒的内部空腔。本发明所述多抗原仿生流感疫苗结构模拟了流感病毒的天然空间构象,呈现了多种流感病毒抗原,能同时发挥多种流感病毒抗原的免疫原性,激发更全面的免疫效应,提供更广谱的抗流感病毒的免疫保护效果。

    一种以HBc-VLP为载体的装载系统的制备方法

    公开(公告)号:CN109675055A

    公开(公告)日:2019-04-26

    申请号:CN201811648900.1

    申请日:2018-12-30

    Abstract: 本发明提供了一种以HBc-VLP为载体的装载系统的制备方法,所述制备方法包括:将HBc-VLP和负荷物加入到缓冲溶液中,经过热处理后得到所述装载系统;本发明提供的制备方法利用HBc-VLP热稳定性以及可逆膨胀的特点,采用热处理的方式,对HBc-VLP进行热敏膨胀,使得亚基与亚基之间的纳米孔道打开,为溶液中的药物提供进入颗粒内部的通道,从而实现对药物的装载,该方法既能保持载体HBc-VLP接近100%的收率,保持其结构与生物活性,还能提高药物的装载比例,操作简单,可重复性高,生产成本低,适用于大规模工业生产,具有较大的实际应用价值和工业推广前景。

    一种核糖核酸纯化伴侣及其应用

    公开(公告)号:CN114990109B

    公开(公告)日:2025-03-25

    申请号:CN202210704287.0

    申请日:2022-06-21

    Abstract: 本发明涉及一种核糖核酸纯化伴侣及其应用,所述核糖核酸纯化伴侣为由阳离子和阴离子组成的离子液体,所述纯化的方法为层析法,所述纯化伴侣用于同时提高核糖核酸在层析介质上的洗脱效率和提高核糖核酸的稳定性。所述层析例如离子交换层析、亲和层析等。所述提高核糖核酸的稳定性是指同时稳定核糖核酸的二级结构和抑制核糖核酸酶对核糖核酸的酶解作用。本发明所述核糖核酸纯化伴侣也可单独用作核糖核酸的稳定剂。

    一种mRNA的加帽方法
    10.
    发明公开

    公开(公告)号:CN115948382A

    公开(公告)日:2023-04-11

    申请号:CN202211659059.2

    申请日:2022-12-22

    Abstract: 本发明公开了一种mRNA加帽的方法。所述方法包括:将mRNA连接在固定相后进行加帽反应,得到加帽的mRNA。本发明创造性地建立了一种基于固定化mRNA的加帽反应‑分离耦合策略,提供一种高效,简便,低成本的加帽方法,加帽操作既可以间歇操作,也可以在柱子上连续操作,为mRNA新型生产工艺的开发及应用提供了研究基础。

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