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公开(公告)号：CN114990109B
公开(公告)日：2025-03-25
申请号：CN202210704287.0
申请日：2022-06-21
Applicant: 中国科学院过程工程研究所
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明涉及一种核糖核酸纯化伴侣及其应用，所述核糖核酸纯化伴侣为由阳离子和阴离子组成的离子液体，所述纯化的方法为层析法，所述纯化伴侣用于同时提高核糖核酸在层析介质上的洗脱效率和提高核糖核酸的稳定性。所述层析例如离子交换层析、亲和层析等。所述提高核糖核酸的稳定性是指同时稳定核糖核酸的二级结构和抑制核糖核酸酶对核糖核酸的酶解作用。本发明所述核糖核酸纯化伴侣也可单独用作核糖核酸的稳定剂。
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公开(公告)号：CN115948382A
公开(公告)日：2023-04-11
申请号：CN202211659059.2
申请日：2022-12-22
Applicant: 中国科学院过程工程研究所
Abstract: 本发明公开了一种mRNA加帽的方法。所述方法包括：将mRNA连接在固定相后进行加帽反应，得到加帽的mRNA。本发明创造性地建立了一种基于固定化mRNA的加帽反应‑分离耦合策略，提供一种高效，简便，低成本的加帽方法，加帽操作既可以间歇操作，也可以在柱子上连续操作，为mRNA新型生产工艺的开发及应用提供了研究基础。
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公开(公告)号：CN112521485A
公开(公告)日：2021-03-19
申请号：CN202011495794.5
申请日：2020-12-17
Applicant: 中国科学院过程工程研究所 , 北京世纪元亨动物防疫技术有限公司 , 中科森辉微球技术(苏州)有限公司
Abstract: 本发明提供一种犬血白蛋白的制备方法、利用其得到的犬血白蛋白和应用。所述制备方法包括：将犬血浆离心后取上清液，再依次使用阳离子交换层析和阴离子交换层析纯化所述上清液，而后，经过超滤浓缩和缓冲液置换，得到犬血白蛋白溶液。本发明所述制备方法以犬血浆离心分离后的上清液为原料，通过阳离子交换层析和阴离子交换层析去除上清液中的多种大分子及小分子杂质蛋白，提高了所得犬血白蛋白的纯度，且该方法中不经过沉淀、深层过滤和溶解等工艺过程，减少了制备过程中白蛋白的损耗，提高了产品的收率。
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公开(公告)号：CN112480246A
公开(公告)日：2021-03-12
申请号：CN202011529682.7
申请日：2020-12-22
Applicant: 中国科学院过程工程研究所 , 北京世纪元亨动物防疫技术有限公司 , 中科森辉微球技术(苏州)有限公司
Abstract: 本发明涉及一种犬免疫球蛋白的分离纯化方法及其应用，所述分离纯化方法包括：将犬血浆的离心上清液依次进行阳离子交换层析和疏水层析，得到犬免疫球蛋白。本发明所涉及的犬免疫球蛋白的分离纯化方法创造性地将预处理后的健康犬血浆仅通过特定的两步层析组合方式即阳离子交换层析和疏水层析即可提高犬免疫球蛋白的纯度，制品的纯度更高，杂蛋白含量更低，极大地提高了应用的安全性。与传统的低温乙醇沉淀工艺比较，减少了沉淀、深层过滤和溶解工艺过程引起的犬免疫球蛋白收率损失，且100L介质的层析规模即可处理相当于100‑1000L的血浆原料，完全可放大于实际生产。
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公开(公告)号：CN114907430B
公开(公告)日：2023-12-01
申请号：CN202210722756.1
申请日：2022-06-21
Applicant: 中国科学院过程工程研究所
Abstract: 本发明提供了一种mRNA的分离纯化方法，所述mRNA的分离纯化方法包括将待分离纯化的mRNA原料经过两次疏水层析进行分离纯化。利用本发明方法得到的mRNA回收率高，纯度高；避免使用价格昂贵的层析介质，成本相对较低；操作简单并且能在室温下进行操作，并且无需有毒试剂，易于放大到工业化规模生产。总之，本发明提供了一种简便、成本低、易于放大的分离纯化获得高收率、高纯度的mRNA的方法，具有很好的实际应用价值。(56)对比文件王孝恩.RNA和DNA之间的结构变化显示的疏水性差异.潍坊教育学院学报.2006,(第04期),10-13.郭新红，等.旱生植物梭梭幼苗信使核糖核酸(mRNA)的分离与纯化.湖南师范大学自然科学学报.2001,(第02期),70-72.Hao Li，等.A hydrophobic interactionchromatography strategy for purificationof inactivated foot-and-mouth diseasevirus.Protein Expression andPurification.2015,第113卷23-29.Xue Feng，等.Messenger RNAchromatographic purification: advancesand challenges.Journal of ChromatographyA.2023,第1707卷第464321篇第1-14页.吴银飞，等.疏水作用层析法纯化抗乙肝病毒核心抗原单克隆抗体.细胞与分子免疫学杂志.2010,第26卷(第06期),560-562.杨利，等.疏水膜色谱法对生物大分子的快速纯化.色谱.1999,(第04期),335-338.殷玉和，等.中空纤维超滤和疏水层析大规模纯化质粒DNA.中国生物制品学杂志.2007,(第02期),133-135.
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116536306A
公开(公告)日：2023-08-04
申请号：CN202310528321.8
申请日：2023-05-11
Applicant: 中国科学院过程工程研究所
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明提供了可减少或抑制dsRNA形成的用于体外转录合成mRNA的试剂盒，包括有固相介质、介质平衡液、转录反应液、阳性对照DNA、NTP、T7聚合酶、RNase A抑制剂、无菌无酶水和焦磷酸酶；并提供了其使用方法。与现有试剂盒相比，本发明具有以下优点：本发明所提供的用于体外转录合成mRNA的试剂盒及其使用方法，在现有产品的基础上，添加了带负电荷的固相介质，通过界面调控，减少了dsRNA的产生，同时提升了mRNA的产量和稳定性；此试剂盒采用的固相介质不溶于水，不会污染转录体系；在转录完成之后固相介质易分离，操作简单；固相介质经适当处理后可以重复使用，成本低廉，易于放大到工业化规模生产中。
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公开(公告)号：CN114990109A
公开(公告)日：2022-09-02
申请号：CN202210704287.0
申请日：2022-06-21
Applicant: 中国科学院过程工程研究所
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明涉及一种核糖核酸纯化伴侣及其应用，所述核糖核酸纯化伴侣为由阳离子和阴离子组成的离子液体，所述纯化的方法为层析法，所述纯化伴侣用于同时提高核糖核酸在层析介质上的洗脱效率和提高核糖核酸的稳定性。所述层析例如离子交换层析、亲和层析等。所述提高核糖核酸的稳定性是指同时稳定核糖核酸的二级结构和抑制核糖核酸酶对核糖核酸的酶解作用。本发明所述核糖核酸纯化伴侣也可单独用作核糖核酸的稳定剂。
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公开(公告)号：CN114907430A
公开(公告)日：2022-08-16
申请号：CN202210722756.1
申请日：2022-06-21
Applicant: 中国科学院过程工程研究所
Abstract: 本发明提供了一种mRNA的分离纯化方法，所述mRNA的分离纯化方法包括将待分离纯化的mRNA原料经过两次疏水层析进行分离纯化。利用本发明方法得到的mRNA回收率高，纯度高；避免使用价格昂贵的层析介质，成本相对较低；操作简单并且能在室温下进行操作，并且无需有毒试剂，易于放大到工业化规模生产。总之，本发明提供了一种简便、成本低、易于放大的分离纯化获得高收率、高纯度的mRNA的方法，具有很好的实际应用价值。
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公开(公告)号：CN116536307A
公开(公告)日：2023-08-04
申请号：CN202310531556.2
申请日：2023-05-11
Applicant: 中国科学院过程工程研究所
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明提供了一种在体外转录过程中减少或抑制双链核糖核酸形成的mRNA高产制备方法，所述制备方法是在转录过程中加入固相介质。与现有技术相对比，本发明具有以下优点：本发明所提供的在体外转录过程中减少或抑制双链核糖核酸形成的mRNA高产制备方法，在体外转录中加入不同种类带负电荷的固相介质，通过界面调控，减少了dsRNA的产生，同时提升了mRNA的产量和稳定性。此方法采用的固相介质不溶于水，不会污染转录体系；在转录完成之后固相介质易分离，操作简单；固相介质经适当处理后可以重复使用，成本低廉，易于放大到工业化规模生产中。
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