公开(公告)号：CN109169287A

公开(公告)日：2019-01-11

申请号：CN201811220216.3

申请日：2018-10-19

Applicant: 中国科学院新疆生态与地理研究所

Inventor： 张道远 ,  张燕 ,  刘晓洁 ,  李小双 ,  杨红兰

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明属于植物组织培养技术领域，涉及一种基于愈伤组织分化的新疆野苹果再生体系建立的方法，该方法是由愈伤组织及不定芽的诱导，不定芽增殖，生根培养以及炼苗和移栽步骤完成，通过本发明提供的方法，愈伤组织诱导率为100%，不定芽的最高诱导率为30%，生根和幼苗成活率分别可达85%和90%。本发明所述方法为新疆野苹果的种质保存和遗传转化研究提供基础。本发明所述方法适用于多种环境，尤其是新疆，甘肃等空气湿度低的地方，大大提高了组培植物的存活率，省时省力。

公开(公告)号：CN112852864B

公开(公告)日：2024-06-21

申请号：CN202110185973.7

申请日：2021-02-13

Applicant: 中国科学院新疆生态与地理研究所

Inventor： 张道远 ,  周平 ,  刘秀瑾 ,  张燕 ,  李小双 ,  杨红兰

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/84 ,  A01H11/00

Abstract: 本发明涉及一种农杆菌介导的苔藓的稳定遗传转化方法，该方法涉及苔藓为小立碗藓Physcomitrella patens和银叶真藓Bryum argenteum的原丝体或配子体，采用苔藓原丝体及配子体的培养，遗传转化及共培养，筛选培养及鉴定。以苔藓原丝体及配子体作为侵染材料，用携带目标基因的农杆菌工程菌液灌入培养皿中进行遗传转化。将苔藓用农杆菌直接侵染，转化周期短，能够在短时间里获得大量的转基因材料。相比较原生质体转化方法，本方法操作简单易控，周期短，转化效率高，表达强度好，成本低，为基因功能研究打下了基础。

公开(公告)号：CN112852864A

公开(公告)日：2021-05-28

申请号：CN202110185973.7

申请日：2021-02-13

Applicant: 中国科学院新疆生态与地理研究所

Inventor： 张道远 ,  周平 ,  刘秀瑾 ,  张燕 ,  李小双 ,  杨红兰

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/84 ,  A01H11/00

Abstract: 本发明涉及一种农杆菌介导的苔藓的稳定遗传转化方法，该方法涉及苔藓为小立碗藓Physcomitrella patens和银叶真藓Bryum argenteum的原丝体或配子体，采用苔藓原丝体及配子体的培养，遗传转化及共培养，筛选培养及鉴定。以苔藓原丝体及配子体作为侵染材料，用携带目标基因的农杆菌工程菌液灌入培养皿中进行遗传转化。将苔藓用农杆菌直接侵染，转化周期短，能够在短时间里获得大量的转基因材料。相比较原生质体转化方法，本方法操作简单易控，周期短，转化效率高，表达强度好，成本低，为基因功能研究打下了基础。

公开(公告)号：CN110408652A

公开(公告)日：2019-11-05

申请号：CN201910729291.0

申请日：2019-08-08

Applicant: 中国科学院新疆生态与地理研究所

Inventor： 张道远 ,  张燕 ,  周平 ,  杨红兰 ,  李小双

IPC: C12N15/82 ,  C12N9/22 ,  A01H5/00 ,  A01H6/74

Abstract: 本发明涉及一种基于CRISPR/Cas9系统对新疆野苹果基因多靶点定点突变的方法，该方法是由克隆MsPDS基因，对MsPDS基因的5个不同的外显子序列设计了sgRNA，并将含有编码所述sgRNA序列的DNA片段连接到pYLCRISPR/Cas9载体中去，转化新疆野苹果叶片外植体，获得定点编辑的愈伤组织及不定芽步骤完成，针对新疆野苹果MsPDS基因的不同外显子序列，选择了5个不同的靶向位点，设计了5个sgRNA，再将sgRNA构建到pYLCRISPR/Cas9载体中去；再通过农杆菌介导的遗传转化，获得了目标基因定点突变的愈伤组织和不定芽，产生了白化的性状。该方法操作简单，实验周期短，可利用CRISPR/Cas9系统对不同的单基因的多位点或多个基因的不同位点进行定点的改造，为新疆野苹果基因功能研究提供了新的方法和思路。