一种农杆菌介导的苔藓的稳定遗传转化方法

    公开(公告)号:CN112852864A

    公开(公告)日:2021-05-28

    申请号:CN202110185973.7

    申请日:2021-02-13

    Abstract: 本发明涉及一种农杆菌介导的苔藓的稳定遗传转化方法,该方法涉及苔藓为小立碗藓Physcomitrella patens和银叶真藓Bryum argenteum的原丝体或配子体,采用苔藓原丝体及配子体的培养,遗传转化及共培养,筛选培养及鉴定。以苔藓原丝体及配子体作为侵染材料,用携带目标基因的农杆菌工程菌液灌入培养皿中进行遗传转化。将苔藓用农杆菌直接侵染,转化周期短,能够在短时间里获得大量的转基因材料。相比较原生质体转化方法,本方法操作简单易控,周期短,转化效率高,表达强度好,成本低,为基因功能研究打下了基础。

    一种基于CRISPR/Cas9系统对新疆野苹果基因多靶点定点突变的方法

    公开(公告)号:CN110408652A

    公开(公告)日:2019-11-05

    申请号:CN201910729291.0

    申请日:2019-08-08

    Abstract: 本发明涉及一种基于CRISPR/Cas9系统对新疆野苹果基因多靶点定点突变的方法,该方法是由克隆MsPDS基因,对MsPDS基因的5个不同的外显子序列设计了sgRNA,并将含有编码所述sgRNA序列的DNA片段连接到pYLCRISPR/Cas9载体中去,转化新疆野苹果叶片外植体,获得定点编辑的愈伤组织及不定芽步骤完成,针对新疆野苹果MsPDS基因的不同外显子序列,选择了5个不同的靶向位点,设计了5个sgRNA,再将sgRNA构建到pYLCRISPR/Cas9载体中去;再通过农杆菌介导的遗传转化,获得了目标基因定点突变的愈伤组织和不定芽,产生了白化的性状。该方法操作简单,实验周期短,可利用CRISPR/Cas9系统对不同的单基因的多位点或多个基因的不同位点进行定点的改造,为新疆野苹果基因功能研究提供了新的方法和思路。

    一种农杆菌介导的苔藓的稳定遗传转化方法

    公开(公告)号:CN112852864B

    公开(公告)日:2024-06-21

    申请号:CN202110185973.7

    申请日:2021-02-13

    Abstract: 本发明涉及一种农杆菌介导的苔藓的稳定遗传转化方法,该方法涉及苔藓为小立碗藓Physcomitrella patens和银叶真藓Bryum argenteum的原丝体或配子体,采用苔藓原丝体及配子体的培养,遗传转化及共培养,筛选培养及鉴定。以苔藓原丝体及配子体作为侵染材料,用携带目标基因的农杆菌工程菌液灌入培养皿中进行遗传转化。将苔藓用农杆菌直接侵染,转化周期短,能够在短时间里获得大量的转基因材料。相比较原生质体转化方法,本方法操作简单易控,周期短,转化效率高,表达强度好,成本低,为基因功能研究打下了基础。

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