一种基于双酶切的简化基因组测序文库的构建方法

    公开(公告)号:CN110343741A

    公开(公告)日:2019-10-18

    申请号:CN201910665025.6

    申请日:2019-07-23

    Abstract: 本发明提供了一种基于双酶切的简化基因组测序文库的构建方法,属于全基因组重测序技术领域,包括利用限制性内切酶MspI和MseI对基因组DNA进行酶切,将接头序列分别连接到酶切产物上,得到连接产物;将连接产物进行等质量混合,将得到的混合物进行双轮磁珠分选,得到350bp的片段;以得到的片段为模板,用引物对进行PCR扩增,将得到的扩增产物纯化后,构建得到基于双酶切的简化基因组测序文库;所述引物对的上游引物的序列如SEQ ID No.1所示,下游引物的序列如SEQ ID No.2所示。采用本发明提供的构建方法最终开发的SNP位点有225,744个,提高了SNP位点的开发。

    用于鉴定桉树无性系的SNP位点多色荧光检测引物、试剂盒、检测方法及其应用

    公开(公告)号:CN110093436B

    公开(公告)日:2023-05-02

    申请号:CN201910239989.4

    申请日:2019-03-27

    Abstract: 本发明公开了用于鉴定桉树无性系的SNP位点多色荧光检测引物、试剂盒、检测方法及其应用。本发明在桉树基因组中筛选多态性高的SNP标记,优化并建立了21个位点的多色荧光多重检测体系,分型结果具有带型易判读、位点多态性高、荧光易区分的特点。本发明方法具有实验效率高、检测准确、操作方便等优势。可为今后桉树快速进行种质资源遗传评价、分子标记辅助育种、无性系分子指纹构建和鉴定提供重要的技术支撑。同时构建了58个国内常用桉树无性系的分子指纹,并成功的对上述无性系进行了鉴定,大大减少了对桉树无性系鉴定的工作量。该方法可有效甄别假冒和错乱的无性系,切实保障良种培育人和营林种植者的权益。

    用于鉴定桉树无性系的SNP位点多色荧光检测引物、试剂盒、检测方法及其应用

    公开(公告)号:CN110093436A

    公开(公告)日:2019-08-06

    申请号:CN201910239989.4

    申请日:2019-03-27

    Abstract: 本发明公开了用于鉴定桉树无性系的SNP位点多色荧光检测引物、试剂盒、检测方法及其应用。本发明在桉树基因组中筛选多态性高的SNP标记,优化并建立了21个位点的多色荧光多重检测体系,分型结果具有带型易判读、位点多态性高、荧光易区分的特点。本发明方法具有实验效率高、检测准确、操作方便等优势。可为今后桉树快速进行种质资源遗传评价、分子标记辅助育种、无性系分子指纹构建和鉴定提供重要的技术支撑。同时构建了58个国内常用桉树无性系的分子指纹,并成功的对上述无性系进行了鉴定,大大减少了对桉树无性系鉴定的工作量。该方法可有效甄别假冒和错乱的无性系,切实保障良种培育人和营林种植者的权益。

    一种快速预测尾细桉木材基本密度的方法

    公开(公告)号:CN106442382A

    公开(公告)日:2017-02-22

    申请号:CN201610567107.3

    申请日:2016-07-15

    CPC classification number: G01N21/3563 G01N1/08 G01N21/359

    Abstract: 一种快速预测尾细桉木材基本密度的方法,该方法通过利用近红外光谱与尾细桉木材基本密度的标准测量值之间的关系建立数学预测模型,利用模型来实现对尾细桉木材基本密度的快速测定,包括以下步骤:(1)木芯样品取样:(2)木屑样品采集:(3)木材基本密度标准测量:(4)木屑样品的近红外光谱采集:(5)光谱预处理和交叉校正模型的建立与优化:(6)模型的外部检验和检验参数;(7)模型应用,将建好的模型通过上述步骤和方法用于预测尾细桉木材基本密度。本发明的方法操作简便快捷、准确性和可靠性高、测试成本低,对树木的损伤少以及绿色环保,并且无须专业技术人员操作。

    用于鉴定桉树无性系的STR引物及其应用

    公开(公告)号:CN107385052B

    公开(公告)日:2020-10-30

    申请号:CN201710671363.1

    申请日:2017-08-08

    Abstract: 本发明公开了用于鉴定桉树无性系的STR引物及其应用。本发明通过大量的STR标记分型检测,筛选出了8对多态性高、扩增条带清晰的桉树STR引物用于鉴定桉树无性系,并建立了多重荧光检测体系。将该STR引物组用于鉴定桉树无性系,具有效率高、检测准确、操作方便等优势。本发明可有效甄别假冒和错乱的无性系,切实保障良种培育人和营林种植者的权益;并可为今后快速进行桉树种质资源遗传评价、遗传图谱构建、分子标记辅助育种、无性系指纹图谱构建和鉴定提供重要的技术支撑。

    用于鉴定桉树无性系的STR引物、PCR试剂盒及方法

    公开(公告)号:CN107354222A

    公开(公告)日:2017-11-17

    申请号:CN201710761216.3

    申请日:2017-08-30

    Abstract: 本发明公开了用于鉴定桉树无性系的STR引物、PCR试剂盒及方法。本发明通过大量的STR标记分型检测,筛选出了8对多态性高、扩增条带清晰的桉树STR引物用于鉴定桉树无性系,并建立了多重荧光检测体系。将该STR引物组用于鉴定桉树无性系,具有效率高、检测准确、操作方便等优势。本发明可有效甄别假冒和错乱的无性系,切实保障良种培育人和营林种植者的权益;并可为今后快速进行桉树种质资源遗传评价、遗传图谱构建、分子标记辅助育种、无性系指纹图谱构建和鉴定提供重要的技术支撑。

    一种基于荧光dUTP的自动检测SSR分子标记的方法

    公开(公告)号:CN101899520A

    公开(公告)日:2010-12-01

    申请号:CN201010239919.8

    申请日:2010-07-28

    Abstract: 本发明提供了一种基于荧光dUTP的自动检测SSR分子标记的方法,包括以下步骤:(1)配制PCR反应体系:取1.0μL 10×buffer、dNTP 25~50μM、MgCl22.0mM、前向引物0.5μM、后向引物0.5μM、Taq酶1个单位、荧光dUTP10pmol和基因组DNA 5ng混合,加超纯水补至10μL;(2)进行降落PCR:94℃4min;20个循环:94℃30s、70~60℃或者66~56℃30s且每个循环降低0.5℃、72℃1min;再26个循环:94℃30s、60或者56℃30s、72℃1min;最后72℃10min,得PCR产物;(3)取PCR产物1.0μL加入9.34μL超纯甲酰胺、0.16μL分子量内标,95℃5min后放置冰上快速冷却,在测序仪上进行标记检测。

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