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公开(公告)号：CN116814799A
公开(公告)日：2023-09-29
申请号：CN202310182733.0
申请日：2023-02-23
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种用于检测小菜蛾Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的特异性PCR引物对及其检测方法。所述正向引物序列为：5′‑AATTCAACGCGTTCGCAAGT‑3′，反向引物序列为：5′‑GGAGTACCTACTGCATAGCT‑3′。利用本发明所提供的特异性引物可以通过PCR方法直接检测小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac的抗性，该检测方法快速简便，准确性高，可用于监测小菜蛾种群对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的发展动态，为田间小菜蛾的科学治理提供重要依据，对延缓Bt抗性发展具有重要意义。
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公开(公告)号：CN117305474A
公开(公告)日：2023-12-29
申请号：CN202311359292.3
申请日：2023-10-19
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种基于PxGLD基因的小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的实时荧光定量PCR检测方法及其试剂盒，该试剂盒包含以下靶标基因特异引物：如SEQ ID NO.2所示的正向引物序列和如SEQ ID NO.3所示的反向引物序列。本发明方法，操作简便、特异性强、需人力及样品量少，检测时间短，检测数量大，而且灵敏度高和准确可靠，因而能有效的检测小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac的抗性，适合于小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的早期快速诊断，同时可用于田间小菜蛾Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的实时监控和预警预报，应用前景广泛。
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公开(公告)号：CN117305475A
公开(公告)日：2023-12-29
申请号：CN202311359294.2
申请日：2023-10-19
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种基于miR‑8545的小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的实时荧光定量PCR检测方法及其试剂盒，该试剂盒包含以下靶标基因特异引物对：如SEQ ID NO.2所示的正向引物序列和如SEQ ID NO.3所示的反向引物序列。本发明方法操作简便、特异性强、需人力及样品量少，检测时间短，检测数量大，而且灵敏度高和准确可靠，是一种有效的小菜蛾Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性检测表观生物标志物，因而能有效的检测小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac的抗性，适合于小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的早期快速诊断，同时可用于田间小菜蛾Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的实时监控和预警预报，应用前景广泛。
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公开(公告)号：CN117286261A
公开(公告)日：2023-12-26
申请号：CN202311359293.8
申请日：2023-10-19
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种基于转录因子PxDfd基因的小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的实时荧光定量PCR检测方法及其试剂盒，该试剂盒包含以下靶标基因特异引物对：如SEQ ID NO.2所示的正向引物序列和如SEQ ID NO.3所示的反向引物序列。本发明方法操作简便、特异性强、需人力及样品量少，检测时间短，检测数量大，而且灵敏度高和准确可靠，因而能有效的检测小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac的抗性，适合于小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的早期快速诊断，同时可用于田间小菜蛾Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的实时监控和预警预报，应用前景广泛。
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公开(公告)号：CN117551778A
公开(公告)日：2024-02-13
申请号：CN202311531237.8
申请日：2023-11-16
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种基于PxJHE基因的小菜蛾对Bt杀虫蛋白抗性的检测方法及其试剂盒。究结果表明：在Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性小菜蛾的中肠组织中，PxJHE基因的m6A修饰水平升高而导致PxJHE基因的表达水平降低是促使小菜蛾形成稳定抗性机制的重要因素。因此，对两种分子标志物的共同检测，可以十分准确有效的检测出小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac的抗性，同时可用于田间小菜蛾Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的实时监控和预警预报，应用前景广泛。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116590266A
公开(公告)日：2023-08-15
申请号：CN202210995419.X
申请日：2022-08-18
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体公开一种烟粉虱的尿素羧化酶的氨基酸和烟粉虱脲基甲酸水解酶及其编码基因及其应用。利用dsRNA可以特异性抑制该二者基因的表达水平，抑制烟粉虱的氮终产物合成和氮素循环。利用转基因植物联合表达dsRNA能够特异性沉默烟粉虱粉虱尿素羧化酶基因和烟粉虱脲基甲酸水解酶基因，抑制烟粉虱在不同氮含量寄主上的转换、延长烟粉虱若虫的发育时间、增加烟粉虱若虫的死亡率和降低烟粉虱的繁殖能力。本发明为基于RNA干扰的烟粉虱防治技术提供了新的靶标，为解决氮肥施加和田间烟粉虱爆发之间的矛盾提供了新的解决方案。
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公开(公告)号：CN110616267B
公开(公告)日：2022-08-19
申请号：CN201910684686.3
申请日：2019-07-26
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11 , C12Q1/6851
Abstract: 本发明公开了一种基于四个APN基因的小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的实时荧光定量PCR检测方法及其试剂盒，该试剂盒包含特异引物序列：正、反向引物如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3所示；或如SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6所示；或如SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.9所示；或如SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.12所示。本发明方法检测周期短，检测数量大，需人力及样品量少，且灵敏度高、特异性强、准确可靠，能有效的检测小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac的抗性，适合于小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的早期快速诊断，可用于田间小菜蛾Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的实时监控和预警预报，应用前景广泛。
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公开(公告)号：CN109680009A
公开(公告)日：2019-04-26
申请号：CN201811502420.4
申请日：2018-12-10
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所
CPC classification number: C12N15/902 , C07K14/43563
Abstract: 本发明公开了一种非模式昆虫小菜蛾中用于敲除ABCC2基因的CRISPR/Cas9基因编辑系统的建立及其在Bt Cry1Ac杀虫蛋白抗性机制分子研究中的应用。所述CRISPR/Cas9基因编辑系统主要包括：小菜蛾ABCC2基因特异性sgRNA靶标序列、小菜蛾卵的显微注射方法和突变个体及其基因型的无损检测方法。将构建的可稳定遗传的小菜蛾ABCC2基因纯合突变种群用于Bt Cry1Ac杀虫蛋白毒力生物测定，结果证实小菜蛾ABCC2基因突变可以导致其对Bt Cry1Ac杀虫蛋白产生高抗性。本发明对于小菜蛾Bt Cry1Ac抗性的功能基因筛选、田间抗性水平检测以及田间防治均具有重要的理论和实践意义，应用前景广泛。
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公开(公告)号：CN104610440B
公开(公告)日：2017-11-28
申请号：CN201510082575.7
申请日：2015-02-15
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所
IPC: C07K14/435 , C12N15/12 , C12N15/113 , A01N57/16 , A01P7/04
Abstract: ABC转运蛋白基因ABCH1及其特异性dsRNA在小菜蛾防治和Bt抗性治理中的应用。本发明公开了一种昆虫ABC转运蛋白和其编码基因ABCH1及其双链RNA(dsRNA)的应用，它可以特异性沉默ABCH1基因使Bt Cry1Ac杀虫蛋白敏感和抗性小菜蛾死亡。所述基因全长核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其编码如SEQ ID NO.2所示的蛋白；本发明还公开了的ABCH1基因特异片段，用于dsRNA的合成，该dsRNA注入Bt Cry1Ac杀虫蛋白敏感和抗性小菜蛾3龄初幼虫体腔后，小菜蛾在生长过程中发育迟缓，并最终导致小菜蛾在幼虫期和蛹期的死亡。本发明为基于RNA干扰的田间害虫防治和Bt抗性治理提供了新的靶标，因此具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN118755844A
公开(公告)日：2024-10-11
申请号：CN202410961432.2
申请日：2024-07-17
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6869 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种田间害螨对阿维菌素抗性的基因突变位点及其应用，属于田间抗性检测技术领域。本发明以细胞色素P450解毒酶CYP392A11基因作为田间害螨对于阿维菌素的抗性检测标志物，并提供了扩增所述CYP392A11基因以验证是否存在点突变的引物对，从而完成田间害螨对阿维菌素抗性的快速鉴定。本发明通过田间害螨CYP392A11的启动子区域中的单碱基位点突变来检测田间害螨对阿维菌素的抗性水平，可以快速检测田间二斑叶螨对阿维菌素的抗药性水平，从而为合理使用杀虫剂提供了技术支撑。
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