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公开(公告)号：CN116179610B
公开(公告)日：2025-01-28
申请号：CN202310055788.5
申请日：2023-01-18
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所
IPC: C12N15/87 , C12N15/113
Abstract: 本发明公开了一种通过针刺破蛹、壳内点滴的纳米点滴法对体型微小的内寄生蜂进行基因沉默的方法。本发明的方法巧妙地借助昆虫即将羽化前的保护罩—蛹壳，通过刺破蛹壳滴入dsRNA，再借助纳米材料渗透进入虫体，从而为一类体型微小、内部寄生、无法有效注射的昆虫提供了一种基因干扰方法，也供其他昆虫开展相关技术研究提供新的方式。
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公开(公告)号：CN116814815A
公开(公告)日：2023-09-29
申请号：CN202311098755.5
申请日：2023-08-29
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及基于P450基因表达量的二斑叶螨对阿维菌素抗性检测方法及其试剂盒。本发明发现细胞色素P450基因的表达量上升与二斑叶螨对阿维菌素抗性相关，进而针对其非保守片段区为靶目标序列，设计特异性引物，再配合内参基因的特异性引物，建立了一种用于二斑叶螨对阿维菌素抗性检测的实时荧光定量PCR检测方法。即将其作为分子标记辅助实现田间二斑叶螨种群对阿维菌素杀虫剂的早期检测和预警。较之现有生物测定技术而言，本发明具有特异性更强，灵敏度和准确度更高，可以准确、快速、特异、便捷地检出供试二斑叶螨是否对阿维菌素产生了抗性。
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公开(公告)号：CN109811060B
公开(公告)日：2022-06-28
申请号：CN201910121949.X
申请日：2019-02-19
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种基于ABCB1基因的小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的实时荧光定量PCR检测方法及其试剂盒，所述试剂盒包含以下靶标基因特异引物序列：正向引物序列如SEQ ID NO.2所示，反向引物序列如SEQ ID NO.3所示。本发明方法，特异性强、需人力及样品量少，检测时间短，检测数量大，而且灵敏度高和准确可靠，因而能有效的检测小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac的抗性，适合于小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的早期快速诊断，同时可用于田间小菜蛾Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的实时监控和预警预报，应用前景广泛。
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公开(公告)号：CN114480316B
公开(公告)日：2022-06-24
申请号：CN202210339970.9
申请日：2022-04-02
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所
IPC: C12N9/02 , C12N15/53 , C12Q1/6888 , B09C1/10 , C02F3/34 , A23B7/155 , C12N15/87 , A01K67/033 , C12N15/866 , C12N5/10 , C02F101/38
Abstract: 本发明公开了一种细胞色素P450，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示，P450基因在田间对有机磷产生低等到中等水平抗性的种群中均存在过量表达现象，该基因可作为分子标记辅助实现对田间二斑叶螨种群是否对有机磷杀虫剂产生抗药性的早期检测和预警，且检测过程简单快速。该基因能够体外代谢毒死蜱和甲基嘧啶磷，预计也可代谢其他有机磷杀虫剂，因此，该基因所表达的工程菌可实现对有机磷杀虫剂农药残留的果蔬等的降解、废水污水的前处理以及被农药污染的土壤处理等，具有产业化开发应用潜力。所克隆的参与抗药性的该P450基因也可作为靶标针对性设计特定解毒酶的抑制剂以及为未来新型药剂的研发提供思路。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114480316A
公开(公告)日：2022-05-13
申请号：CN202210339970.9
申请日：2022-04-02
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所
IPC: C12N9/02 , C12N15/53 , C12Q1/6888 , B09C1/10 , C02F3/34 , A23B7/155 , C12N15/87 , A01K67/033 , C12N15/866 , C12N5/10 , C02F101/38
Abstract: 本发明公开了一种细胞色素P450，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示，P450基因在田间对有机磷产生低等到中等水平抗性的种群中均存在过量表达现象，该基因可作为分子标记辅助实现对田间二斑叶螨种群是否对有机磷杀虫剂产生抗药性的早期检测和预警，且检测过程简单快速。该基因能够体外代谢毒死蜱和甲基嘧啶磷，预计也可代谢其他有机磷杀虫剂，因此，该基因所表达的工程菌可实现对有机磷杀虫剂农药残留的果蔬等的降解、废水污水的前处理以及被农药污染的土壤处理等，具有产业化开发应用潜力。所克隆的参与抗药性的该P450基因也可作为靶标针对性设计特定解毒酶的抑制剂以及为未来新型药剂的研发提供思路。
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公开(公告)号：CN112575091A
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN202010947100.0
申请日：2020-09-10
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种同时鉴别6种烟粉虱生物型的方法，包括如下步骤：1）烟粉虱总DNA的提取；2）扩增烟粉虱线粒体细胞色素氧化酶亚基I因子（COI）基因片段；3）分别采用限制性内切酶PshBI；NcoI；FokI；StuI进行酶切，将酶切产物进行凝胶电泳，通过凝胶电泳结果判断烟粉虱生物型种类。本发明方法利用COI序列在不同烟粉虱间存在序列差异，进而利用限制性内切酶识别特异性酶切位点可以将6种烟粉虱生物型的COI基因切割为不同片段的大小，经由凝胶电泳可以快速的对6种烟粉虱生物型进行鉴定。本发明方法在保证鉴定结果准确率的同时，更高效快捷，大幅节约了鉴定时间（4h可完成鉴定），具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN109679955B
公开(公告)日：2020-09-29
申请号：CN201811645606.5
申请日：2018-12-29
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所
IPC: C12N15/113 , C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种小菜蛾Bt Cry1Ac杀虫蛋白抗性基因MAP4K4表达调控的核心启动子序列和突变位点及其在小菜蛾Bt Cry1Ac杀虫蛋白抗性鉴定和田间监测中的应用。所述突变位点位于起始密码子ATG上游的491、474、469‑470位核苷酸，分别命名为M1、M2、M3。小菜蛾Bt Cry1Ac杀虫蛋白敏感种群启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，抗性近等基因系种群启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。实验证明，M2与M3同时突变时，MAP4K4基因启动子活性显著增强。本发明推动了启动子突变在昆虫Bt抗性领域的研究，尤其在昆虫Bt抗性田间检测和治理方面有重要的理论和实践意义。
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公开(公告)号：CN111704660A
公开(公告)日：2020-09-25
申请号：CN202010264744.X
申请日：2020-04-07
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所
IPC: C07K14/435 , C12N15/12 , C07K16/18 , G01N33/53
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体公开烟粉虱CREB转录因子，以及编码基因和重组载体、重组细胞系、重组菌株。进一步地，本发明公开了检测烟粉虱对吡虫啉抗性或敏感性的方法，其针对烟粉虱CREB基因编码的氨基酸序列第111位点的磷酸化水平进行检测，以及所用到的针对烟粉虱CREB的第111位点的特异性磷酸化抗体。通过本发明能够快速的检测烟粉虱对吡虫啉抗性或敏感性，或田间烟粉虱对吡虫啉的抗药性水平。
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公开(公告)号：CN110514782A
公开(公告)日：2019-11-29
申请号：CN201910420467.4
申请日：2019-05-20
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所
IPC: G01N33/00
Abstract: 本发明公开一种快速简便的粉虱类胃毒杀虫剂的生物测定方法：准备生物测定药剂和装置；配制饲喂液；称取杀虫剂，溶解于饲喂液中；制备饲喂小袋；取其上有粉虱成虫的叶片，将粉虱成虫赶入饲喂玻璃管中，放入黑色管套中；将整个生测装置放置在培养箱中，利用粉虱趋光性迅速取食；6-12小时后统计结果，计算杀虫剂的药效。本发明含有药剂的饲喂液配制方便，易于携带和运输，便于快速进行田间试验；检测时间缩短到12小时；无需采集“浸液法”所用叶片，排除了叶片差异导致的结果偏差；检测装置更加小巧和密闭。因此，本发明能够精确、快速、高效地检测粉虱对杀虫剂的抗药性，为田间用药提供了直接的指导，并且能够为合理用药提供理论支撑。
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