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公开(公告)号：CN117305474A
公开(公告)日：2023-12-29
申请号：CN202311359292.3
申请日：2023-10-19
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种基于PxGLD基因的小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的实时荧光定量PCR检测方法及其试剂盒，该试剂盒包含以下靶标基因特异引物：如SEQ ID NO.2所示的正向引物序列和如SEQ ID NO.3所示的反向引物序列。本发明方法，操作简便、特异性强、需人力及样品量少，检测时间短，检测数量大，而且灵敏度高和准确可靠，因而能有效的检测小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac的抗性，适合于小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的早期快速诊断，同时可用于田间小菜蛾Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的实时监控和预警预报，应用前景广泛。
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公开(公告)号：CN117305475A
公开(公告)日：2023-12-29
申请号：CN202311359294.2
申请日：2023-10-19
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种基于miR‑8545的小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的实时荧光定量PCR检测方法及其试剂盒，该试剂盒包含以下靶标基因特异引物对：如SEQ ID NO.2所示的正向引物序列和如SEQ ID NO.3所示的反向引物序列。本发明方法操作简便、特异性强、需人力及样品量少，检测时间短，检测数量大，而且灵敏度高和准确可靠，是一种有效的小菜蛾Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性检测表观生物标志物，因而能有效的检测小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac的抗性，适合于小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的早期快速诊断，同时可用于田间小菜蛾Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的实时监控和预警预报，应用前景广泛。
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公开(公告)号：CN117286261A
公开(公告)日：2023-12-26
申请号：CN202311359293.8
申请日：2023-10-19
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种基于转录因子PxDfd基因的小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的实时荧光定量PCR检测方法及其试剂盒，该试剂盒包含以下靶标基因特异引物对：如SEQ ID NO.2所示的正向引物序列和如SEQ ID NO.3所示的反向引物序列。本发明方法操作简便、特异性强、需人力及样品量少，检测时间短，检测数量大，而且灵敏度高和准确可靠，因而能有效的检测小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac的抗性，适合于小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的早期快速诊断，同时可用于田间小菜蛾Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的实时监控和预警预报，应用前景广泛。
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公开(公告)号：CN116814799A
公开(公告)日：2023-09-29
申请号：CN202310182733.0
申请日：2023-02-23
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种用于检测小菜蛾Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的特异性PCR引物对及其检测方法。所述正向引物序列为：5′‑AATTCAACGCGTTCGCAAGT‑3′，反向引物序列为：5′‑GGAGTACCTACTGCATAGCT‑3′。利用本发明所提供的特异性引物可以通过PCR方法直接检测小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac的抗性，该检测方法快速简便，准确性高，可用于监测小菜蛾种群对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的发展动态，为田间小菜蛾的科学治理提供重要依据，对延缓Bt抗性发展具有重要意义。
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公开(公告)号：CN117701567A
公开(公告)日：2024-03-15
申请号：CN202311665588.8
申请日：2023-12-06
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所
IPC: C12N15/113 , A01N57/16 , A01P7/04
Abstract: 本发明公开了一种miR‑8545抑制剂在制备小菜蛾Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性治理药剂中的应用，miR‑8545抑制剂为减少miR‑8545在小菜蛾幼虫体内的表达水平，该抑制剂为miR‑8545的反义互补非编码RNA序列，其核酸序列如SEQ ID NO.5所示。本发明将miR‑8545作为治理小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac产生抗性的新靶点，研发一种可以降低小菜蛾Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的miR‑8545抑制剂，直接靶向抑制miRNA小分子，从而抑制导致小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac产生抗性的蛋白质合成，从安全性、特异性和有效性都是一种全新的治理方案，因此具有广泛的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN117568344A
公开(公告)日：2024-02-20
申请号：CN202311531229.3
申请日：2023-11-16
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所
IPC: C12N15/113 , A01N61/00 , A01P15/00 , C12N15/54
Abstract: 本发明公开了针对PxMettl3和PxMettl14基因的抑制剂组合在农业害虫小菜蛾防治中的应用。本发明是利用siRNA作为PxMettl3和PxMettl14基因的抑制剂，具体是所述siRNA抑制剂siRNA的组合。研究结果表明：PxMettl3和PxMettl14基因在Bt抗性小菜蛾中肠中共同高表达是促使小菜蛾形成稳定抗性机制的重要因素，因此，同时靶向抑制PxMettl3和PxMettl14基因的表达水平可以有效破坏Bt抗性小菜蛾的生殖发育。本发明为田间小菜蛾Bt抗性的防治提供了新的研究方向。
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公开(公告)号：CN110592044B
公开(公告)日：2021-06-22
申请号：CN201910683005.1
申请日：2019-07-26
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所
IPC: C12N9/12 , C12N15/54 , C12N15/113 , A01N57/16 , A01P7/04
Abstract: 本发明公开了一种昆虫蛋白激酶，其编码基因Fused，所述基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其编码的蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；本发明还公开了Fused基因特异片段，用于dsRNA的合成，该dsRNA注入Bt Cry1Ac杀虫蛋白敏感和抗性小菜蛾3龄初幼虫体腔后，小菜蛾生长发育迟缓，并最终导致小菜蛾在幼虫期和蛹期的死亡。本发明为小菜蛾Bt抗性治理提供了新的靶标，因此具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN109680010A
公开(公告)日：2019-04-26
申请号：CN201811502875.6
申请日：2018-12-10
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所
IPC: C12N15/90 , C12N9/22 , A01K67/033
CPC classification number: C12N15/902 , A01K67/0339 , A01K2217/075 , A01K2227/706 , C12N9/22
Abstract: 本发明公开了一种利用CRISPR/Cas9实现非模式生物小菜蛾ABCC3基因的敲除及其在Bt Cry1Ac杀虫蛋白抗性机制分子研究中的应用。本发明方法设计并合成小菜蛾ABCC3基因特异性sgRNA靶标序列，将sgRNA与Cas9蛋白混合后显微注射到小菜蛾前胚盘期卵后极部位，利用CRISPR/Cas9基因编辑系统筛选出可稳定遗传的小菜蛾ABCC3基因纯合突变种群并用于Bt Cry1Ac杀虫蛋白毒力生物测定，证实小菜蛾ABCC3基因突变可以导致其对Bt Cry1Ac杀虫蛋白产生高抗性。本发明方法简单高效，省时省力，不仅为非模式生物体内功能基因的深入研究提供技术支撑，也为探索新的害虫防治策略奠定了基础。
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公开(公告)号：CN109593762A
公开(公告)日：2019-04-09
申请号：CN201811642687.3
申请日：2018-12-29
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/90
CPC classification number: C12N15/113 , C12N9/485 , C12N15/902 , C12N2310/10 , C12N2310/20 , C12Y304/11
Abstract: 本发明公开了一种利用CRISPR/Cas9实现非模式生物小菜蛾APN1基因的敲除及其在Bt Cry1Ac杀虫蛋白抗性机制分子研究中的应用。本发明方法设计并合成小菜蛾APN1基因特异性sgRNA靶标序列，将sgRNA与Cas9蛋白混合后显微注射到小菜蛾前胚盘期卵后极部位，利用CRISPR/Cas9基因编辑系统筛选出可稳定遗传的小菜蛾APN1基因纯合突变种群并用于Bt Cry1Ac杀虫蛋白毒力生物测定，证实小菜蛾APN1基因突变可以导致其对Bt Cry1Ac杀虫蛋白产生高抗性。本发明方法简单高效，省时省力，不仅为非模式生物体内功能基因的深入研究提供技术支撑，也为探索新的害虫防治策略奠定了基础。
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公开(公告)号：CN109811060B
公开(公告)日：2022-06-28
申请号：CN201910121949.X
申请日：2019-02-19
Applicant: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种基于ABCB1基因的小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的实时荧光定量PCR检测方法及其试剂盒，所述试剂盒包含以下靶标基因特异引物序列：正向引物序列如SEQ ID NO.2所示，反向引物序列如SEQ ID NO.3所示。本发明方法，特异性强、需人力及样品量少，检测时间短，检测数量大，而且灵敏度高和准确可靠，因而能有效的检测小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac的抗性，适合于小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的早期快速诊断，同时可用于田间小菜蛾Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的实时监控和预警预报，应用前景广泛。
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