水稻中阻断二化螟蜕皮激素合成途径的截短miRNA及其应用

    公开(公告)号:CN111690651A

    公开(公告)日:2020-09-22

    申请号:CN202010633287.7

    申请日:2020-07-02

    Abstract: 本发明提供了水稻中阻断二化螟蜕皮激素合成途径的截短miRNA及其应用,属于基因工程技术领域。水稻中阻断二化螟蜕皮激素合成途径的截短miRNA是在csu-novel-miR260的基础上删除3'端6~7nt核苷酸序列后形成的。所述截短miRNA在水稻抗二化螟或构建转基因水稻中的应用。根据截短miRNA的核苷酸序列,本发明还提供了水稻中阻断二化螟蜕皮激素合成途径的miRNA激动剂。实验证明,截短miRNA通过转基因水稻细胞表达或直接体外饲喂,均能抑制二化螟体内蜕皮激素合成途径中Dib基因的表达,从而抑制蜕皮激素的合成实现二化螟杀灭目的。可见截短miRNA保留抗虫活性,为二化螟杀灭提供新手段。

    利用植物介导的RNAi创造棉花抗绿盲蝽种质的方法

    公开(公告)号:CN111286515A

    公开(公告)日:2020-06-16

    申请号:CN201910011587.9

    申请日:2019-01-05

    Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域,具体涉及利用植物介导的RNAi创造棉花抗绿盲蝽种质的方法。本发明以绿盲蝽LIM基因的保守序列作为靶序列构建了RNAi载体,利用农杆菌介导的遗传转化方法将所述的绿盲蝽LIM基因成功导入棉花宿主,得到了表达绿盲蝽LIM基因双链RNA的转基因棉花。将该转基因棉花种植于室外网室中,接虫实验表明该转基因棉花可以导致绿盲蝽LIM基因的表达量下调,进而导致其无法完成正常羽化而死亡,最终导致绿盲蝽种群数量减少,从而达到抗虫的效果。本发明的转基因棉花对绿盲蝽具有抵抗能力。且转基因棉花可以与BT棉杂交生产多抗虫棉花的新种质。

    一种检测褐飞虱对药剂敏感性的方法

    公开(公告)号:CN103181369A

    公开(公告)日:2013-07-03

    申请号:CN201310016932.0

    申请日:2013-01-17

    Abstract: 本发明公开了一种检测褐飞虱对药剂敏感性的方法,其步骤:A、药剂配制:烯啶虫胺原药用丙酮溶解,配成农药母液,再将母液用丙酮稀释至配制药液;B、吸收一定量的药液放入到玻璃瓶中,滚匀,待丙酮完全蒸发后进行敏感测定,对照用丙酮处理,重复3-4次;C、在制备的含药膜玻璃瓶中放入褐飞虱3龄若虫,90min后检查死亡率,以褐飞虱不能活动为死亡;D、对照组的死亡率应小于5%,表明实验有效。E、根据含药玻璃瓶中褐飞虱90min后的校正死亡率判断褐飞虱对药剂的敏感性,即药剂的校正死亡率大于90%表明所测褐飞虱对药剂是敏感的。本方法简单易行,操作方便,它解决了稻茎浸渍法和点滴法操作繁琐、工作量大的问题,可以在田间情况下快速完成检测。

    利用CRISPR/Cas9系统特异性剪切水稻xal3基因启动子的sgRNA及应用

    公开(公告)号:CN110093349A

    公开(公告)日:2019-08-06

    申请号:CN201910375501.0

    申请日:2019-05-07

    Abstract: 本发明提供了一组利用CRISPR/Cas9系统特异性剪切水稻xal3基因启动子的sgRNA及其应用,属于植物基因工程技术领域。本发明所述sgRNA包括g1RNA和g2RNA;所述g1RNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;所述g2RNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。利用本发明提供的sgRNA组合构建得到的重组表达载体转染水稻植株,能特异性地将xal3基因的启动子区域149nt进行缺失,从而使水稻体内xal3基因失去被白叶枯病菌诱导表达的能力,使缺失该启动子片段的转基因水稻对白叶枯病菌表现出抗性。另外,本发明提供的方法不影响转基因水稻的其他性状,转基因水稻育性良好。

    一种复配杀菌剂及制备方法

    公开(公告)号:CN106472503B

    公开(公告)日:2018-11-20

    申请号:CN201610807377.7

    申请日:2016-09-07

    Abstract: 本发明公开了一种复配杀菌剂及制备方法,一种复配杀菌剂由一定比例的菌核净原药、水杨羟肟酸、十二烷基苯磺酸钠、木质素磺酸钠、硅藻土或膨润土组成,其步骤:1)按所制备的剂型需求,计算用量,称取原药、水杨羟肟酸、十二烷基苯磺酸钠、水质素磺酸钠和硅藻土于容器中,混匀,于粉碎机中粉碎;2)将粉碎的样品混均,经气流粉机粉碎至一定细度(95%通过320目筛),混匀得到菌核净可湿性粉剂。配方合理,使用方便,在防治油菜菌核病上对菌核净具有明显的增效作用,可显著提高菌核净的防治效果,对作物安全、无药害,可减少菌核净的用量,降低了防治成本,并有望延缓对菌核净抗药性的产生。

    一种控制水稻耐冷性的基因及其应用

    公开(公告)号:CN108277209A

    公开(公告)日:2018-07-13

    申请号:CN201710008580.2

    申请日:2017-01-05

    Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域,具体涉及一种控制水稻耐冷性的基因及其应用。从水稻中分离了一种受冷胁迫诱导的基因OsCPK24,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,该基因编码的蛋白质序列如SEQ ID NO:2所示。将OsCPK24的CDS克隆到pC1300s上,得到超表达载体;将含有SEQ ID NO:3的序列克隆到pDS1301上,得到RNAi抑制表达载体,分别转入水稻品种日本晴中,获得OsCPK24超表达转基因系和抑制表达系。冷胁迫下,获得的超表达转基因系存活率比野生型要高,抑制转基因系存活率比野生型要低,表明OsCPK24基因具有调节水稻耐冷性的功能。本发明为植物和水稻抗寒育种提供了新的资源。

    一种二化螟Bt蛋白受体V-ATPaseA亚基基因及其应用

    公开(公告)号:CN104611350A

    公开(公告)日:2015-05-13

    申请号:CN201510013819.6

    申请日:2015-01-12

    Inventor: 马伟华 李博 邱林

    Abstract: 本发明公开了二化螟Bt蛋白受体V-ATPase A亚基基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明还公开了所述基因在二化螟对Bt杀虫蛋白抗性检测中的应用以及一种检测二化螟对Bt杀虫蛋白抗性的方法。与传统的二化螟对Bt杀虫蛋白抗性监测方法相比,本发明所提供的方法无需将田间试虫饲养至适宜虫龄后再进行生物测定以确定抗性水平,而是直接从田间采样测试,不需饲养试虫,从而减少了中间过程,节省了劳动力和资源,同时具有检测速度快,检测结果准确可靠,检测灵敏度和精度高等特点。

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