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公开(公告)号:CN109207618B
公开(公告)日:2020-05-29
申请号:CN201710522272.1
申请日:2017-06-30
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6851
Abstract: 本发明“用于测定待测生物材料中目标序列甲基化率的方法”,属于生物技术领域。所述方法包括:(1)用内切酶酶切处理所述待测生物材料的基因组DNA;(2)用目标序列的特异性引物对步骤(1)所得到的酶切产物进行荧光定量PCR扩增,获得酶切后的待测生物材料目标序列的Ct值:Ctm;(3)用所述目标序列的特异性引物对未经所述内切酶酶切的待测转基因植物的基因组DNA进行荧光定量PCR扩增,获得对照处理的所述待测生物材料目标序列的Ct值:Ctk;(4)计算待测生物材料的目标序列甲基化率:M;M=2‑ΔCtm;其中,ΔCtm=Ctm‑Ctk本发明为测定转基因棉花中CaMV35S启动子的甲基化率提供了便利,具有快速简便、灵敏度高、所需实验条件不高,有非常高的实用价值。
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公开(公告)号:CN101792812B
公开(公告)日:2013-02-27
申请号:CN201010143850.9
申请日:2010-04-07
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明“一种鉴定转植酸酶基因玉米BVLA430101的转化体特异性PCR检测方法”,属于转基因植物检测领域。鉴定转植酸酶基因玉米BVLA430101的转化体特异性PCR检测方法,其特征在于:PCR反应中的正向引物依据SEQ ID NO1中1-509位序列设计,反向引物依据SEQID NO1的510-1345位序列设计。本发明的PCR方法可作为一种鉴定转植酸酶基因玉米BVLA430101的有效手段,为区分和鉴别转基因玉米品系提供了便利,该方法的优点在于快速、灵敏度高、特异性好、所需实验条件不高,因此有非常高的实用价值。
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公开(公告)号:CN101792814B
公开(公告)日:2012-08-15
申请号:CN201010143932.3
申请日:2010-04-07
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及“转基因抗虫棉GK12的转化体特异性PCR检测方法”,属于生物技术领域。转基因抗虫棉GK12的转化体特异性PCR检测方法,其特征在于:PCR反应中的正向引物依据SEQ ID NO1中1-546位序列设计,反向引物依据SEQ ID NO1的547-1625位序列设计。本发明方法可作为一种鉴定转基因抗虫棉品系GK12,以及以这个品种为亲本的转基因棉品系的有效手段。本发明方法的优点在于快速、灵敏度高、特异性好、所需实验条件不高,因此有非常高的实用价值。
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公开(公告)号:CN101792813A
公开(公告)日:2010-08-04
申请号:CN201010143913.0
申请日:2010-04-07
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明“鉴别转抗除草剂棉花LLCOTTON25转化体的PCR方法”,属于转基因植物检测领域。本发明通过Genome walking方法获得转基因抗除草剂棉花LLCOTTON25的转化体特异性序列,一条为外源重组载体5’端插入区域的特异性旁侧序列,另一条外源重组载体的3’端插入区域的特异性旁侧序列,根据这两条旁侧序列任意一条设计引物对,能够专门用PCR检测转基因棉花品种LLCOTTON25及以其为亲本的棉花品种。
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公开(公告)号:CN119799949A
公开(公告)日:2025-04-11
申请号:CN202510026653.5
申请日:2025-01-08
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及用于检测棉花MON531转基因序列结构变异的引物和方法。提供用于筛查棉花MON531转基因序列结构变异的引物组合,包括引物对P0/P1、P0/P2、P0/P3、P0/P4、P0/P5、P0/P6、P0/P7、P0/P8和P0/P9,其核苷酸序列如SEQ ID NO:7~SEQ ID NO:16所示。还提供使用上述引物对筛查棉花MON531转基因序列结构变异的方法。本发明的引物组合和方法可以实现对棉花MON531种植过程中的转基因序列结构变异的持续监测,为评估其长期应用的安全性奠定了基础。
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公开(公告)号:CN101792810B
公开(公告)日:2012-06-06
申请号:CN201010143752.5
申请日:2010-04-07
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及“鉴定转基因抗虫棉中crylAa基因表达框的PCR方法”,属于生物技术领域。鉴定转基因抗虫棉中crylAa基因表达框的PCR方法,所述PCR体系中包括一条正向引物,一条反向引物,其特征在于正向引物设计在Seq.ID No.1的1669-2125bp位置,反向引物设计在Seq ID.No.1的2126-2382bp位置。本发明的PCR方法可作为一种鉴定转基因棉品种中是否具有crylAa基因表达框的有效手段,为区分和鉴别转基因棉花品系提供了便利,该方法的优点在于快速、灵敏度高、特异性好、所需实验条件不高,因此有非常高的实用价值。
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公开(公告)号:CN101880725A
公开(公告)日:2010-11-10
申请号:CN201010233830.0
申请日:2010-07-19
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明“转cry2A基因水稻品系T2A-1的PCR检测方法及其应用”,涉及生物技术领域。本发明转cry2A基因水稻品系T2A-1的PCR检测方法,其特征在于:PCR反应中的正向引物依据SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的1-473位碱基序列设计,反向引物依据SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的474-708位碱基序列设计。能利用普通的PCR仪器、试剂快速准确鉴别出转cry2A基因水稻品系T2A-1,以及以转cry2A基因水稻品系T2A-1为亲本的水稻品系。
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公开(公告)号:CN101792814A
公开(公告)日:2010-08-04
申请号:CN201010143932.3
申请日:2010-04-07
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及“转基因抗虫棉GK12的转化体特异性PCR检测方法”,属于生物技术领域。转基因抗虫棉GK12的转化体特异性PCR检测方法,其特征在于:PCR反应中的正向引物依据SEQ ID NO1中1-546位序列设计,反向引物依据SEQ ID NO1的547-1625位序列设计。本发明方法可作为一种鉴定转基因抗虫棉品系GK12,以及以这个品种为亲本的转基因棉品系的有效手段。本发明方法的优点在于快速、灵敏度高、特异性好、所需实验条件不高,因此有非常高的实用价值。
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公开(公告)号:CN101413005A
公开(公告)日:2009-04-22
申请号:CN200810225724.0
申请日:2008-11-10
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
Abstract: 本发明涉及“一种转sck/crylAc双价抗虫基因水稻品系科丰8号外源插入片段旁侧序列及应用”,属生物技术领域。5’端旁侧序列如SEQ ID NO1所示,3’端旁侧序列如SEQ ID NO2所示。利用该旁侧序列设计特异性引物用于目的DNA扩增,能建立灵敏、特异性的水稻品系科丰8号的品系特异性定性、定量PCR检测。
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公开(公告)号:CN105755111B
公开(公告)日:2019-03-22
申请号:CN201510983301.5
申请日:2015-12-24
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C12Q1/6851 , C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明“一种定量检测棉花材料群体中MON757转化体含量的方法”,属于生物技术领域,包括如下步骤:(1)获取MON757转化体特异性片段序列的曲线方程,(2)获取棉花内标准基因ACP1基因的标准曲线方程,(3)随机选取待测棉花材料群体中的多个材料,研磨后混合提取待测DNA,(4)以待测DNA为模板进行MON757转化体荧光定量PCR反应测得待测DNA中MON757转化体的拷贝数;进行所述ACP1基因荧光定量PCR反应测得待测DNA中ACP1基因的拷贝数;(5)MON757转化体含量=(MON757转化体拷贝数/ACP1基因拷贝数)×2,本发明为特异性鉴定群体中转基因抗虫棉MON757转化体的有无和含量提供了便利,具有高效快速、灵敏度高、特异性好、所需实验条件不高,有非常高的实用价值。
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