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公开(公告)号:CN109797159A
公开(公告)日:2019-05-24
申请号:CN201910159178.3
申请日:2019-03-04
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C12N15/47 , C12N15/70 , C07K14/145 , C07K16/10 , C07K16/06 , C07K1/22 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了小麦黄条纹病毒N基因重组表达蛋白、多克隆抗体制备方法及其应用。多克隆抗体的制备包括以下步骤:根据WYSV的N基因的序列,首次优化密码子合成了该基因并亚克隆到用于大肠杆菌表达的靶载体pET-30a中;重组蛋白经原核表达,免疫新西兰大白兔制备得到了WYSV-N蛋白的多克隆抗体。Western blot检测表明制备的抗体能与有毒虫样品特异性结合,说明获得的抗体特异性高。本发明所述免疫荧光检测方法可以在实验室条件下快速检测介体昆虫是否携带WYSV,为WYSV的预测预报以及介体异沙叶蝉与WYSV互作机制的研究奠定了基础。
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公开(公告)号:CN105385664A
公开(公告)日:2016-03-09
申请号:CN201510951985.0
申请日:2015-12-17
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C12N7/00
CPC classification number: C12N7/00 , C12N2750/12021
Abstract: 本发明涉及一种复活小麦矮缩病毒冰冻毒源的方法,选用健康饱满的小麦种子播种到装满土的花盆中,表面覆盖一层细土后放置到盛有清水的塑料盒中吸足水分;将毒源从冰箱取出,插到吸足水分的花盆中;吸取一定量的无毒条沙叶蝉,放置到一端带有纱网的玻璃罩中;将玻璃罩罩到插好毒源的花盆上;条沙叶蝉因没有食物会取食冰冻毒源,待3-4天后小麦芽萌动露出土表,叶蝉会自动取食新苗,从而将病毒传播到小麦上。本发明将新苗的萌发过程与叶蝉取食带毒的过程同时进行,且在同一个花盆中完成,待叶蝉带毒后不需要二次转移,直接取食新苗,使新苗带毒。本发明方法统筹安排了时间和空间,节约了时间,节省了空间,操作简单,易于掌握。
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公开(公告)号:CN101974550A
公开(公告)日:2011-02-16
申请号:CN201010276101.3
申请日:2010-11-01
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C12N15/63 , C12N15/113 , C12N15/66 , A01H5/00
Abstract: 本发明涉及“RSV和RBSDV的RNA干涉载体、构建方法及应用”,属于生物技术领域。本发明将如SEQ ID NO1所示的序列作为正、反义链建立了水稻条纹病毒RNA干涉载体pMCG161+/-D和pCMBIA1301+/-D。本发明为植物抗病基因工程提供了一种干扰病毒基因表达载体及其构建方法与应用,为转基因技术及RNA干扰在生物抗性育种中的应用提供了新的思路。将该载体转入水稻中,成功获得了抗病毒植株,实现了利用RNA干扰原理获得兼抗RSV和RBSDV水稻新材料的预期目标,为RNA干扰介导的植物抗性育种及基因工程提供了成功的实例,弥补了RNA干扰介导的RSV和RBSDV抗性在本领域研究中的空缺。
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公开(公告)号:CN101240277A
公开(公告)日:2008-08-13
申请号:CN200710063777.2
申请日:2007-02-09
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
Abstract: 本发明涉及“一种转基因水稻品系Bt汕优63的外源插入片段的旁侧序列”,其5’端旁侧序列,其特征在于:5’端旁侧序列如SEQ ID NO1所示,其3’端旁侧序列,其特征在于:3’端旁侧序列如SEQ ID NO2所示。利用该旁侧序列作为目的DNA扩增片段建立灵敏、特异性的转基因水稻品系Bt汕优63的品系特异性定性、定量PCR检测。
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公开(公告)号:CN101215572A
公开(公告)日:2008-07-09
申请号:CN200810056509.2
申请日:2008-01-21
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
Abstract: 本发明涉及“大麦黄矮病毒干扰病毒基因表达载体及其构建方法与应用”,属于基因工程技术领域。本发明提供了一种大麦黄矮病毒干扰病毒基因表达载体,其特征是:采用的骨架载体是pMCG161,在其上游的两个酶切位点AscI、AvrII间插入大麦黄矮病毒外壳蛋白基因的正义链,在下游的两个酶切位点SpeI、SgfI间插入其大麦黄矮病毒外壳蛋白基因的反义链。本发明构建的大麦黄矮病毒GAV干扰病毒基因表达载体,通过基因枪法将其转入小麦中,获得对大麦黄矮病毒GAV具有抗性的转基因小麦品种。本发明为植物抗病育种提供了一种高效的育种途径和新的策略。
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公开(公告)号:CN100360561C
公开(公告)日:2008-01-09
申请号:CN200510066115.1
申请日:2005-04-21
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C07K14/435 , C12N15/12 , C12N15/63 , C12N7/01 , A01H1/00
Abstract: 本发明为大麦黄矮病毒介体蚜虫体内传毒相关蛋白基因及其应用。本发明涉及蚜虫体内传毒有关蛋白基因P50氨基酸序列SEQ ID NO1、SEQ ID NO3或SEQ ID NO5,及其编码基因的核苷酸序列SEQ ID NO2、SEQ ID NO4、重组表达载体及转基因微生物、植物的制备方法。通过使用上述基因或其组合,并通过应用于转化微生物和植物,使它们表现出抗病毒特性,应用于生产实践。
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公开(公告)号:CN117586893A
公开(公告)日:2024-02-23
申请号:CN202311578078.7
申请日:2023-11-24
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
Abstract: 本发明涉及一株携带MfPV1病毒的金龟子绿僵菌菌株IPPMa818V及其应用。本发明通过PEG介导转化,将MfPV1转化到金龟子绿僵菌菌株中得到了一株携带MfPV1病毒的金龟子绿僵菌菌株IPPMa818V。通过致病力测定实验,评价含MfPV1的金龟子绿僵菌菌株IPPMa818V菌株的杀虫效果,发现转化MfPV的金龟子绿僵菌菌株,其孢子产量及对草地贪夜蛾和小菜蛾等昆虫宿主的毒力显著提高,在草地贪夜蛾和小菜蛾的生防菌剂开发中具有良好的潜力。
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公开(公告)号:CN108315337B
公开(公告)日:2021-06-25
申请号:CN201810135714.1
申请日:2018-02-09
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C12N15/40 , C12Q1/70 , C12Q1/6811 , C12Q1/6834 , C12Q1/6804 , C12N15/11 , C12R1/94
Abstract: 本发明涉及一种小麦黄条纹病毒及其NASH检测方法、检测试剂盒。本发明发现了一种新病毒即小麦黄条纹病毒WYSV,其全长序列如SEQ ID NO.3所示,且设计了一对特异性扩增WYSV的引物对SEQ ID NO.1/2所示,以地高辛为标记物制备DNA探针,检测WYSV病毒。本发明还提供一种NASH检测的WYSV病毒试剂盒,该试剂盒包括:探针PCR反应液、NASH反应试剂、硝酸纤维素膜、杂交袋、WYSV阳性对照样品和阴性对照样品。该检测方法及检测试剂盒可一次批量检测样品,能在短时间内低成本高效率地检测WYSV病毒,检测结果可靠、易于操作、特异性强、灵敏度高,耗时短,应用前景良好。
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公开(公告)号:CN108315337A
公开(公告)日:2018-07-24
申请号:CN201810135714.1
申请日:2018-02-09
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C12N15/40 , C12Q1/70 , C12Q1/6811 , C12Q1/6834 , C12Q1/6804 , C12N15/11 , C12R1/94
Abstract: 本发明涉及一种小麦黄条纹病毒及其NASH检测方法、检测试剂盒。本发明发现了一种新病毒即小麦黄条纹病毒WYSV,其全长序列如SEQ ID NO.3所示,且设计了一对特异性扩增WYSV的引物对SEQ ID NO.1/2所示,以地高辛为标记物制备DNA探针,检测WYSV病毒。本发明还提供一种NASH检测的WYSV病毒试剂盒,该试剂盒包括:探针PCR反应液、NASH反应试剂、硝酸纤维素膜、杂交袋、WYSV阳性对照样品和阴性对照样品。该检测方法及检测试剂盒可一次批量检测样品,能在短时间内低成本高效率地检测WYSV病毒,检测结果可靠、易于操作、特异性强、灵敏度高,耗时短,应用前景良好。
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公开(公告)号:CN106171591A
公开(公告)日:2016-12-07
申请号:CN201610828325.8
申请日:2016-09-18
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: A01G7/06
CPC classification number: A01G7/06
Abstract: 本发明涉及一种麦类作物室内抗小麦矮缩病毒的表型鉴定方法及应用,属于农业生物学品种资源抗性鉴定领域。本发明鉴定的方法为利用传毒介体条沙叶蝉(Psammotettix striatus L.)将病毒从活体毒源植株中传出,将获得的携带WDV病毒的介体用于群体接种待鉴定的材料然后分苗移栽,用于WDV的室内抗病性鉴定;依据抗性鉴定的植株表型,将病情分级标准定为0,1,2,3,4,5级,其中0级为免疫即无病,1级为高抗,2级为抗病,3级为中感,4级感病,5级为高感。鉴定得到的抗性资源可进一步用于品种杂交选育,经田间示范推广可以用于防治小麦矮缩病,感病植株亦可用于致病性以及介体与寄主互作等机制研究。
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