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公开(公告)号：CN117164709B
公开(公告)日：2024-08-06
申请号：CN202310881784.2
申请日：2023-07-18
Applicant: 中国农业大学
IPC: C07K16/18 , G01N33/577 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了抗猪GSDMD蛋白单克隆抗体及其应用。本发明提供了五株小鼠抗猪GSDMD蛋白的单抗，并建立了利用所述单抗对猪GSDMD蛋白进行免疫印迹和免疫荧光检测的方法。结果表明，五株单抗均能够特异性识别猪GSDMD全长蛋白(GSDMD‑FL)，其中15H6、19H3、23H10、27A10能进一步识别猪GSDMD蛋白被活化切割后所形成的具有膜成孔活性的GSDMD氨基端片段(GSDMD‑NT)，25E2识别猪GSDMD蛋白的羧基端片段(GSDMD‑CT)。本发明提供的单抗为开展猪GSDMD蛋白生物学功能研究、猪体内外细胞焦亡研究提供了必需试剂，具有广阔的商品化生产前景和良好的市场需求。
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公开(公告)号：CN115161287B
公开(公告)日：2024-03-01
申请号：CN202110369372.1
申请日：2021-04-06
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种重组猪繁殖与呼吸综合征病毒及其构建方法和应用。所述重组猪繁殖与呼吸综合征病毒为：基因序列中含有HiBiT序列的猪繁殖与呼吸综合征病毒。本发明通过将HiBiT序列插入猪繁殖与呼吸综合征病毒的序列中，构建得到了一种具有荧光酶特性，同时可以正常增殖的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒。该重组猪繁殖与呼吸综合征病毒具备较好的遗传稳定性，通过该重组病毒可以准确快速地实现病毒的定量检测和抗病毒药物的筛选。
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公开(公告)号：CN116694789A
公开(公告)日：2023-09-05
申请号：CN202310559526.2
申请日：2023-05-18
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/01
Abstract: 本发明提供一种检测猪格拉瑟氏菌的RAA引物对和探针组合及试剂盒，可以简单、快速、灵敏、特异性检测使猪格拉瑟氏菌。所提供的RAA引物对和探针，其中引物对中上游引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:1，下游引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:2，所述的探针的核苷酸序列为SEQ ID NO:3。本发明所提供的基于上述引物对和探针用于检测猪格拉瑟氏菌的RAA试剂盒，只需在42℃恒温条件下反应30min即可完成，整个反应过程对仪器设备要求低，耗时短，操作简单，结果可实现肉眼可视化，更适用于基层现场诊断和即时检测，真正意义上实现了便携式快速核酸检测，可为格拉瑟氏病的快速诊断、实时监测防控提供技术支持。
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公开(公告)号：CN116287460A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202310211472.0
申请日：2023-03-07
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12Q1/6804 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了PEAV的RAA‑CRISPR/Cas12a检测组合物、反应装置、试纸条及试剂盒，基于RAA和CRISPR/Cas12a技术相结合的PEAV核酸快速可视化检测方法的引物对、向导RNA(gRNA)、探针、反应装置、试纸条和试剂盒，以PEAV的N基因为诊断靶标，设计、筛选、优化并最终获得了能够特异性检测PEAV核酸的通用引物对、通用向导RNA以及两种不同探针。在实现对PEAV快速、特异、灵敏和便携检测的同时，本发明提供的反应装置有效避免了扩增子开盖转移极易造成气溶胶污染和检测时间延长的问题，适用于PEAV的现场、快速、可视化检测，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN115852042A
公开(公告)日：2023-03-28
申请号：CN202210831910.9
申请日：2022-07-15
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6841 , C12Q1/6851 , A61K39/225 , A61P31/14 , A01K67/02 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了基于反向遗传操作的PEDV嵌合病毒致弱的鉴定方法及筛选潜在弱毒疫苗的应用，通过构建并拯救PEDV嵌合病毒CHM2013‑SPBJ、CHM2013‑SBJ、CHM2013‑SPBJ‑ORF3CHM、CHM2013‑SPBJ‑ECHM、CHM2013‑SPBJ‑MCHM、CHM2013‑SPBJ‑NCHM和CHM2013‑(S+ORF3)BJ，进行功能丧失性试验和功能获得性试验，得到致弱嵌合病毒CHM2013‑SPBJ‑ORF3CHM和CHM2013‑SPBJ‑MCHM，揭示了PEDV变异株BJ2011C S基因协同ORF3、E和M基因促进病毒致病，其中ORF3基因最关键。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113969267A
公开(公告)日：2022-01-25
申请号：CN202111369459.5
申请日：2021-11-15
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/86 , C07K14/005 , A61K39/12 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及病毒基因工程技术领域，具体地，涉及一种猪繁殖与呼吸综合征突变病毒RvJXwn‑nsp1β‑VS19GG，并进一步公开其构建方法与应用。本发明所述猪繁殖与呼吸综合征突变病毒RvJXwn‑nsp1β‑VS19GG，利用反向遗传操作技术，通过将高致病性PRRSV毒株JXwn06在非结构蛋白nsp1β的第19位缬氨酸和20位丝氨酸均突变为甘氨酸，进而构建得到所需突变病毒。所述突变病毒不仅遗传性状稳定，并且由于关键氨基酸位点的突变明显改变了亲本毒株诱导炎症反应的能力，使得所述突变病毒感染宿主细胞诱导强烈炎症反应，可以作为疫苗研发的候选毒株，为设计增强细胞免疫疫苗提供新的思路。
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公开(公告)号：CN118638744A
公开(公告)日：2024-09-13
申请号：CN202410936888.3
申请日：2024-07-12
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明提供一种猪繁殖与呼吸综合征突变病毒及其构建方法与应用。所述突变病毒是在猪繁殖与呼吸综合征病毒JXwn06毒株的基础上进行突变得到的，包含非结构蛋白nsp9 K541R、K336R、K336A、A394G、L396S、R401A、K541A或K541H突变位点。所述突变病毒感染宿主细胞后含有nsp9 K541R的突变株具有高保真特性，其余突变病毒具有低保真特性。所有突变的猪繁殖与呼吸综合征病毒，在细胞中增殖滴度与亲本毒相似，可作为猪繁殖与呼吸综合征的疫苗侯选株，用于预防猪繁殖与呼吸综合征，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN114703179B
公开(公告)日：2024-08-13
申请号：CN202210482181.0
申请日：2022-05-05
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N15/11 , C12Q1/70 , C12Q1/6844 , G01N33/543
Abstract: 本发明涉及动物疫病检测技术领域，具体涉及检测PDCoV的RT‑RAA‑LFD引物对、探针、试纸条、试剂盒及其应用。本发明以PDCoV的ORF1b基因为诊断靶标，设计、筛选、优化并最终获得了能够特异性检测PDCoV核酸的引物对与探针。使用本发明的引物对、探针、试剂盒和试纸条可以实现对PDCoV的快速检测，等温扩增所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行结果判读。整个检测过程无需昂贵的仪器设备，仅通过肉眼判读即可获得检测结果。本发明在基层和现场快速检测与甄别PDCoV感染方面具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN116948022B
公开(公告)日：2024-08-02
申请号：CN202310881787.6
申请日：2023-07-18
Applicant: 中国农业大学
IPC: C07K16/18 , G01N33/577 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了抗猪Gasdermin D蛋白单克隆抗体及其应用。本发明提供五株小鼠抗猪GSDMD蛋白的单抗，并建立了利用所述单抗对猪GSDMD蛋白进行免疫印迹和免疫荧光检测的方法。结果表明，五株单抗均能够特异性识别猪GSDMD全长蛋白(GSDMD‑FL)，其中15H6、19H3、23H10、27A10能进一步识别猪GSDMD蛋白被活化切割后所形成的具有膜成孔活性的GSDMD氨基端片段(GSDMD‑NT)，25E2识别猪GSDMD蛋白的羧基端片段(GSDMD‑CT)。本发明提供的单抗为开展猪GSDMD蛋白生物学功能研究、猪体内外细胞焦亡研究提供了必需试剂，具有广阔的商品化生产前景和良好的市场需求。
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公开(公告)号：CN117987377A
公开(公告)日：2024-05-07
申请号：CN202410159233.X
申请日：2021-04-06
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种荧光素酶标记猪繁殖与呼吸综合征病毒及其构建方法和应用。所述猪繁殖与呼吸综合征病毒为：基因序列中含有HiBiT序列的猪繁殖与呼吸综合征病毒。本发明通过将HiBiT序列插入猪繁殖与呼吸综合征病毒的序列中，构建得到了一种具有荧光酶特性，同时可以正常增殖的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒。该重组猪繁殖与呼吸综合征病毒具备较好的遗传稳定性，通过该重组病毒可以准确快速地实现病毒的定量检测和抗病毒药物的筛选。
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