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公开(公告)号：CN119331846A
公开(公告)日：2025-01-21
申请号：CN202411503724.8
申请日：2024-10-25
Applicant: 中国中医科学院中药研究所 , 中国中医科学院医学实验中心
Abstract: 本发明公开了一种C‑糖基转移酶其氨基酸序列，为列：1)如序列表中SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列；或者2)如序列表中SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列进行常规修饰，或者在其上还连接有用于检测或纯化的标签；还公开了编码所述C‑糖基转移酶的核酸分子、含有所述核酸分子的载体、表达盒、宿主细胞或转化体；以及它们在催化底物C‑糖基化反应中的应用。本发明成功从山楂中克隆了1条新的糖基转移酶基因(CGT52202)，该酶可以于以根皮素为底物制备nothofagin，可以通过体外酶促反应从根皮素制备nothofagin，或作为糖基化原件在植物或微生物体系里合成nothofagin，具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN118773278A
公开(公告)日：2024-10-15
申请号：CN202411144718.8
申请日：2024-08-20
Applicant: 中国中医科学院中药研究所
Abstract: 本发明公开了催化根皮素生成三叶苷的蛋白质及其编码基因与应用。解决的技术问题是催化根皮素生成三叶苷。具体公开了蛋白质在下述任一种的应用：A1)催化根皮素生成三叶苷和/或制备催化根皮素生成三叶苷的产品；A2)生产三叶苷和/或制备生产三叶苷的产品；所述蛋白质为如下任一种：B1)氨基酸序列是序列2第425‑897位或序列2所述的蛋白质；B2)将B1)所述蛋白质的经过氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与B1)所示的蛋白质具有80％以上的同一性且相同功能的蛋白质；B3)将B1)或B2)的N末端或/和C末端连接蛋白质标签得到的融合蛋白质。将所述蛋白质在体外表达，再将其与根皮素反应，可生成三叶苷，可用于三叶苷的工业生产。
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公开(公告)号：CN118547022A
公开(公告)日：2024-08-27
申请号：CN202410698052.4
申请日：2024-05-31
Applicant: 中国中医科学院中药研究所
IPC: C12P17/12 , C12P17/18 , C12N9/02 , C12N15/53 , C12N15/81 , C12N1/19 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/00 , C12R1/865
Abstract: 本发明公开了一种阿朴菲生物碱化合物制备方法及其相关催化酶与应用。本发明首次表征了参与粉防己中阿朴菲生物碱亚甲基二氧桥结构形成的关键P450，为其他物种中阿朴菲生物碱生物合成途径的解析提供了重要参考，也为异源生产多种多样的阿朴菲生物碱奠定基础。本发明筛选获得粉防己中基因组中注释为“CYP719”的P450酶CYP719C4，以不同的阿朴菲类化合物为底物进行酶促反应，利用液质联用仪检测反应结果，发现CYP719C4能够催化阿朴菲生物碱D环上亚甲基二氧桥形成的酶，可应用于阿朴菲生物碱途径的进一步解析和异源生产。
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公开(公告)号：CN117945842A
公开(公告)日：2024-04-30
申请号：CN202410038627.X
申请日：2024-01-10
Applicant: 中国中医科学院中药研究所
IPC: C07C13/28 , C07C43/215 , C07C49/84 , C07D215/04 , C07D209/08 , C07D311/36 , C07D311/04 , A61P35/00
Abstract: 本发明涉及β‑榄香烯芳基衍生物技术领域，具体涉及一种β‑榄香烯芳基衍生物及其制备方法和应用，本发明提供的β‑榄香烯芳基衍生物，具有式I所示结构。本发明提供的β‑榄香烯芳基衍生物在针对膀胱癌细胞T24、结直肠癌细胞SW480、脑胶质瘤癌细胞U251和脑胶质瘤癌细胞U87具有较好的抑制活性，在生物医药领域具有较强的应用潜力和经济价值。
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公开(公告)号：CN116622659A
公开(公告)日：2023-08-22
申请号：CN202210124561.7
申请日：2022-02-10
Applicant: 中国中医科学院中药研究所
Abstract: 本发明公开了氧甲基转移酶Cy6OMT及其在催化苄基异喹啉生物碱化合物中的应用。本发明所保护的一个技术方案是蛋白质相关的生物材料及该蛋白质在作为氧甲基转移酶或制备苄基异喹啉生物碱中的应用。所述蛋白质的氨基酸序列可为序列表中序列1或序列1的第166‑513位。本发明筛选的Cy6OMT具有对1‑BIA底物(S)–去甲乌药碱的C6位羟基甲基化催化特异性强，并同时对(原)小檗碱型化合物的异喹啉结构的C6或C7位羟基具有甲基化催化功能。该Cy6OMT酶具有催化底物骨架广的特点，目前已报道的6OMT一般不具备对小檗碱型化合物的羟基甲基化催化功能或催化能力非常微弱。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113122512B
公开(公告)日：2022-05-17
申请号：CN202010041299.0
申请日：2020-01-15
Applicant: 中国中医科学院中药研究所
Abstract: 本发明公开了一种用于制备丹参酮类化合物的丹参P450突变体。本发明通过定向改造CYP76AH3，对其催化效率进行优化，使原本需要CYP76AH1与CYP76AH3两个蛋白协同作用完成的反应路径通过本发明中的CYP76AH3突变体可以直接催化完成，CYP76AH3突变体的构建可以缩短反应过程中底物运输路径，在一个蛋白口袋内高效完成多步反应，从而提高底物利用效率，提高目标化合物的产量。本发明中针对不同产物转化效率提高的CYP76AH3突变体为后续丹参酮生物合成途径解析提供底物及底盘菌，对丹参酮生物合成途径全解析及构建高产丹参酮类化合物酵母工程菌具有重要指导意义。
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公开(公告)号：CN108866016B
公开(公告)日：2021-11-02
申请号：CN201710342119.0
申请日：2017-05-16
Applicant: 中国中医科学院中药研究所
Abstract: 本发明公开了蛋白质及其在制备隐丹参酮中的应用。本发明公开的蛋白质其名称为CYP71D375a，是下述A1)、A2)或A3)：A1)氨基酸序列是SEQ ID No.2的蛋白质；A2)将序列表中SEQ ID No.2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质；A3)在A1)或A2)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。蛋白质CYP71D375a可以催化丹参新酮生成隐丹参酮，对于调节和生产丹参酮类化合物及培育高品质的丹参具有重要的理论及实际意义。
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公开(公告)号：CN113322243A
公开(公告)日：2021-08-31
申请号：CN202110691146.5
申请日：2021-06-22
Applicant: 中国中医科学院中药研究所
Abstract: 本发明公开了蛋白质UGT236及其编码基因与应用。蛋白质UGT236为氨基酸序列是SEQ ID NO:2所示的蛋白质。实验证明，蛋白质UGT236具有糖基转移酶的活性，可高效的将根皮素催化生成根皮苷，即蛋白质UGT236可用于以根皮素为底物制备根皮苷。本发明具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN111718911A
公开(公告)日：2020-09-29
申请号：CN201910212270.1
申请日：2019-03-20
Applicant: 中国中医科学院中药研究所
Abstract: 本发明公开了Diels-Alder型加合物合成代谢途径中的FAD依赖氧化酶Ma-2及应用。本发明提供了如下蛋白：SEQ ID No.4所示Ma-2蛋白或其经一个或几个氨基酸残基取代和/或缺失和/或添加，或序列具99％、95％、90％、85％或者80％以上同源性且具相同功能的蛋白，或N端和/或C端连接标签后得到的融合蛋白。本发明所提供的Ma-2因具有FAD依赖氧化酶的特征结构域，能催化二烯体与查尔酮类化合物双键间发生[4+2]环化反应形成D-A型加合物。本发明，对于生产D-A型加合物及研究酶促D-A型[4+2]环化反应机制具有重要的理论及实际意义。
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公开(公告)号：CN106148360B
公开(公告)日：2020-03-03
申请号：CN201510120807.3
申请日：2015-03-19
Applicant: 中国中医科学院中药研究所
Abstract: 本发明公开一个催化丹参酮类化合物生物合成途径C20位甲基羟基化的关键CYP450基因，属于药用植物基因工程领域。该基因为首次从丹参中克隆得到，其编码的蛋白可特异催化C20羟化，催化11‑羟基铁锈醇生成11，20‑二羟基铁锈醇，催化11‑羟基柳杉酚生成11，20‑二羟基柳杉酚，而11，20‑二羟基铁锈醇能够自氧化形成丹参酮邻苯二醌结构10‑羟甲基四氢丹参新酮。本发明所提供的CYP76AK1基因具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列或其同源序列或等位基因及其衍生的核苷酸序列。所述基因编码的蛋白质具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列或其同源序列。本发明提供的CYP76AK1基因与丹参酮类化合物合成代谢密切相关，对调节生产植物二萜类化合物和通过生物技术提高丹参中丹参酮类的含量具有重要意义。
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