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公开(公告)号：CN116606829A
公开(公告)日：2023-08-18
申请号：CN202210120943.2
申请日：2022-02-09
Applicant: 中国中医科学院中药研究所
Abstract: 本发明公开了来源于延胡索的氧甲基转移酶CyS2OMT及其功能。本发明所要保护的一个技术方案是蛋白质相关的生物材料，所述蛋白质的氨基酸序列可序列表中序列1或序列1的第166‑517位；以及该蛋白质在作为氧甲基转移酶在制备苄基异喹啉生物碱中的应用。本发明筛选构建得到的氧甲基转移酶CyS2OMT对原小檗碱型生物碱(S)‑Scoulerine的C2位羟基表现出较强偏好性；对1‑BIA、原小檗碱型生物碱和小檗碱型生物碱三种不同母核结构BIA的特定位置(异喹啉结构的C6位和C7位羟基)都具有较好的甲基化活性，具有开发成普遍适应性的工具酶的潜力。
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公开(公告)号：CN113122513A
公开(公告)日：2021-07-16
申请号：CN202010041939.8
申请日：2020-01-15
Applicant: 中国中医科学院中药研究所
Abstract: 本发明公开了一种丹参P450突变体及其应用。本发明通过定向改造CYP76AH1，对其催化效率进行优化，获得功能整合P450突变体，使原本需要CYP76AH1与CYP76AH3两个蛋白协同作用完成的反应路径通过本发明中的CYP76AH1突变体可以直接催化完成，CYP76AH1突变体的构建可以缩短反应过程中底物运输路径，在一个蛋白口袋内高效完成多步反应，从而提高底物利用效率，提高目标化合物的产量。本发明中针对不同产物转化效率提高的CYP76AH1突变体为后续丹参酮生物合成途径解析提供底物及底盘菌，对丹参酮生物合成途径全解析及构建高产丹参酮类化合物酵母工程菌具有重要指导意义。
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公开(公告)号：CN103695441A
公开(公告)日：2014-04-02
申请号：CN201310504475.X
申请日：2013-10-24
Applicant: 中国中医科学院中药研究所
Abstract: 本发明公开一个参与丹参酮类化合物合成代谢的细胞色素P450基因及其编码产物与应用，属于药用植物基因工程领域。该基因为首次从丹参中克隆得到，为丹参酮类化合物合成代谢途径的关键酶基因，催化铁锈醇至11-羟基铁锈醇。本发明所提供的CYP76AH3基因具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。所述基因编码的蛋白质具有序列表中SEQ ID No.2的氨基酸残基序列以及具有SEQ ID No.2的氨基酸残基序列相同活性的由SEQ ID No.2衍生的蛋白质。本发明提供的CYP76AH3基因与丹参酮类化合物合成代谢密切相关，对于调节生产植物二萜类化合物和通过生物技术提高丹参中二萜类活性成分丹参酮类的含量具有重要的理论和实际意义。
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公开(公告)号：CN119662575A
公开(公告)日：2025-03-21
申请号：CN202411879213.6
申请日：2024-12-19
Applicant: 中国中医科学院中药研究所
Abstract: 本发明公开了一种羟化酶及其在合成14‑去氧穿心莲内酯中的应用。羟化酶为蛋白质CYP72A399，蛋白质CYP72A399的氨基酸序列如SEQ ID No：2所示。实验证明，蛋白质CYP72A399可以作为羟化酶催化新穿心莲内酯苷元生成14‑去氧穿心莲内酯。由此可见，蛋白质CYP72A399对于合成14‑去氧穿心莲内酯及培育高品质的穿心莲具有重要的理论及实际意义。本发明具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN113122512A
公开(公告)日：2021-07-16
申请号：CN202010041299.0
申请日：2020-01-15
Applicant: 中国中医科学院中药研究所
Abstract: 本发明公开了一种用于制备丹参酮类化合物的丹参P450突变体。本发明通过定向改造CYP76AH3，对其催化效率进行优化，使原本需要CYP76AH1与CYP76AH3两个蛋白协同作用完成的反应路径通过本发明中的CYP76AH3突变体可以直接催化完成，CYP76AH3突变体的构建可以缩短反应过程中底物运输路径，在一个蛋白口袋内高效完成多步反应，从而提高底物利用效率，提高目标化合物的产量。本发明中针对不同产物转化效率提高的CYP76AH3突变体为后续丹参酮生物合成途径解析提供底物及底盘菌，对丹参酮生物合成途径全解析及构建高产丹参酮类化合物酵母工程菌具有重要指导意义。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119662574A
公开(公告)日：2025-03-21
申请号：CN202411879208.5
申请日：2024-12-19
Applicant: 中国中医科学院中药研究所
Abstract: 本发明公开了一种蛋白质及其在合成穿心莲内酯中的应用。蛋白质为蛋白质CYP72F1。蛋白质CYP72F1的氨基酸序列如SEQ ID No：2所示。实验证明，蛋白质CYP72F1可以作为羟化酶对14‑去氧穿心莲内酯的C14位羟基化并双键重排生成穿心莲内酯，其中双键重排使C13，14双键重排生成C12，13的双键。由此可见，蛋白质CYP72F1对于合成穿心莲内酯及培育高品质的穿心莲具有重要的理论及实际意义。本发明具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN118703454A
公开(公告)日：2024-09-27
申请号：CN202410697788.X
申请日：2024-05-31
Applicant: 中国中医科学院中药研究所
IPC: C12N9/02 , C12N15/53 , C12N15/81 , C12N1/19 , C12P17/12 , C12P17/18 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/00 , C12R1/865
Abstract: 本发明公开了来源于粉防己的细胞色素P450酶及其在阿朴菲生物碱化合物生物合成中的应用。本发明首次表征了参与粉防己中阿朴菲生物碱亚甲基二氧桥结构形成的关键P450，为其他物种中阿朴菲生物碱生物合成途径的解析提供了重要参考，也为异源生产多种多样的阿朴菲生物碱奠定基础。本发明筛选获得粉防己中基因组中注释为“CYP719”的P450酶CYP719C3，以不同的阿朴菲类化合物为底物进行酶促反应，利用液质联用仪检测反应结果，发现CYP719C3能够催化阿朴菲生物碱A环上亚甲基二氧桥形成的酶，可应用于阿朴菲生物碱途径的进一步解析和异源生产。
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公开(公告)号：CN118048328A
公开(公告)日：2024-05-17
申请号：CN202211423901.2
申请日：2022-11-15
Applicant: 中国中医科学院中药研究所
Abstract: 本发明公开了双酶系统联合催化产生R型原小檗碱型化合物的方法。本发明的发明人通过基因筛选、异源表达、酶促反应技术手段筛选得到一个高度立体选择性的可逆酶系统，该系统包括CySDR1和CySDR2两个短链脱氢酶，可逆介导小檗碱型化合物与R型原小檗碱型化合物的相互转化，即催化产生R型原小檗碱型化合物。本发明具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN113122513B
公开(公告)日：2022-05-17
申请号：CN202010041939.8
申请日：2020-01-15
Applicant: 中国中医科学院中药研究所
Abstract: 本发明公开了一种丹参P450突变体及其应用。本发明通过定向改造CYP76AH1，对其催化效率进行优化，获得功能整合P450突变体，使原本需要CYP76AH1与CYP76AH3两个蛋白协同作用完成的反应路径通过本发明中的CYP76AH1突变体可以直接催化完成，CYP76AH1突变体的构建可以缩短反应过程中底物运输路径，在一个蛋白口袋内高效完成多步反应，从而提高底物利用效率，提高目标化合物的产量。本发明中针对不同产物转化效率提高的CYP76AH1突变体为后续丹参酮生物合成途径解析提供底物及底盘菌，对丹参酮生物合成途径全解析及构建高产丹参酮类化合物酵母工程菌具有重要指导意义。
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公开(公告)号：CN118547022A
公开(公告)日：2024-08-27
申请号：CN202410698052.4
申请日：2024-05-31
Applicant: 中国中医科学院中药研究所
IPC: C12P17/12 , C12P17/18 , C12N9/02 , C12N15/53 , C12N15/81 , C12N1/19 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/00 , C12R1/865
Abstract: 本发明公开了一种阿朴菲生物碱化合物制备方法及其相关催化酶与应用。本发明首次表征了参与粉防己中阿朴菲生物碱亚甲基二氧桥结构形成的关键P450，为其他物种中阿朴菲生物碱生物合成途径的解析提供了重要参考，也为异源生产多种多样的阿朴菲生物碱奠定基础。本发明筛选获得粉防己中基因组中注释为“CYP719”的P450酶CYP719C4，以不同的阿朴菲类化合物为底物进行酶促反应，利用液质联用仪检测反应结果，发现CYP719C4能够催化阿朴菲生物碱D环上亚甲基二氧桥形成的酶，可应用于阿朴菲生物碱途径的进一步解析和异源生产。
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