公开(公告)号：CN107260793A

公开(公告)日：2017-10-20

申请号：CN201710401178.0

申请日：2017-05-31

Applicant: 中南民族大学

Inventor： 刘庆华 ,  邱俊莹 ,  薛璐

IPC: A61K36/482 ,  A61P11/06 ,  A61P11/00

Abstract: 本发明提供了一种番泻叶乙醇提取物，所述的番泻叶乙醇提取物采用以下方法制得：称取番泻叶粉末，按照液料比为14:0.5～2的比例在番泻叶粉末中加入质量浓度为30～70％的乙醇溶液浸泡20～30h，然后在50～70℃的温度下水浴加热回流2～4次，收集提取液，将提取液过滤并合并后得到番泻叶乙醇提取液，然后将番泻叶乙醇提取液真空旋转蒸发，即制得番泻叶乙醇提取物。本发明所提供的番泻叶乙醇提取物能有效舒张小鼠的气管平滑肌，扩张气管，因此能够用于舒张气管肌肉的相关用途中，具体而言，能够用于制备治疗哮喘病以及支气管炎的药物中。

公开(公告)号：CN108823205A

公开(公告)日：2018-11-16

申请号：CN201810600701.7

申请日：2018-06-12

Applicant: 中南民族大学

Inventor： 薛璐 ,  秦绪慧 ,  刘庆华 ,  沈金花 ,  彭勇波 ,  赵平 ,  马立群 ,  于孟飞 ,  陈微微

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明提供了一种敲除PLAC8基因的HEK293T细胞系构建方法，步骤如下：(1)、sgRNA设计；(2)、重组质粒构建；(3)、细胞转染；(4)、流式细胞术分选阳性细胞；(5)、单细胞培养；(6)、测序检测。本发明利用改进型的CRISPR/Cas9系统从HEK293T细胞中敲除PLAC8基因，操作简便，效果完整而彻底，与HEK293T细胞特性一起构成了理想的细胞模型，用于研究细胞内表观遗传学的改变。本发明还突破了构建敲除细胞系过程中的转染效率低及慢病毒包装两个瓶颈，提供了一种简便高效的构建敲减细胞系的方法。

公开(公告)号：CN107236763A

公开(公告)日：2017-10-10

申请号：CN201710494777.1

申请日：2017-06-26

Applicant: 中南民族大学

Inventor： 薛璐 ,  欧阳聪 ,  周婉 ,  刘庆华 ,  沈金花 ,  彭勇波 ,  赵平 ,  马立群 ,  于孟飞 ,  陈微微

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/12

CPC classification number: C12N15/85 ,  C07K14/43595

Abstract: 本发明提供了一种基于流式细胞术的构建基因敲除细胞系的方法，包括以下步骤：(1)、细胞系的转染：构建带有GFP的序列的PX458‑sgRNA重组质粒，然后将PX458‑sgRNA重组质粒用lipo3000转染到细胞中，使细胞带上绿色荧光；(2)、流式细胞术分选阳性细胞：然后利用流式细胞仪将带绿色荧光的细胞分选为单细胞；(3)、单细胞培养：将分选后的带有绿色荧光的单细胞用细胞培养板进行培养；(4)、测序检测：将培养完毕后的细胞提取基因组并测序，筛选出基因敲除后的细胞系。本发明中解决了现有技术中构建敲除细胞系过程中的转染效率及慢病毒包装两个瓶颈，更为简便、省时。

公开(公告)号：CN107260793B

公开(公告)日：2020-06-16

申请号：CN201710401178.0

申请日：2017-05-31

Applicant: 中南民族大学

Inventor： 刘庆华 ,  邱俊莹 ,  薛璐

IPC: A61K36/482 ,  A61P11/06 ,  A61P11/00

Abstract: 本发明提供了一种番泻叶乙醇提取物，所述的番泻叶乙醇提取物采用以下方法制得：称取番泻叶粉末，按照液料比为14:0.5～2的比例在番泻叶粉末中加入质量浓度为30～70％的乙醇溶液浸泡20～30h，然后在50～70℃的温度下水浴加热回流2～4次，收集提取液，将提取液过滤并合并后得到番泻叶乙醇提取液，然后将番泻叶乙醇提取液真空旋转蒸发，即制得番泻叶乙醇提取物。本发明所提供的番泻叶乙醇提取物能有效舒张小鼠的气管平滑肌，扩张气管，因此能够用于舒张气管肌肉的相关用途中，具体而言，能够用于制备治疗哮喘病以及支气管炎的药物中。