公开(公告)号：CN108823205A

公开(公告)日：2018-11-16

申请号：CN201810600701.7

申请日：2018-06-12

Applicant: 中南民族大学

Inventor： 薛璐 ,  秦绪慧 ,  刘庆华 ,  沈金花 ,  彭勇波 ,  赵平 ,  马立群 ,  于孟飞 ,  陈微微

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明提供了一种敲除PLAC8基因的HEK293T细胞系构建方法，步骤如下：(1)、sgRNA设计；(2)、重组质粒构建；(3)、细胞转染；(4)、流式细胞术分选阳性细胞；(5)、单细胞培养；(6)、测序检测。本发明利用改进型的CRISPR/Cas9系统从HEK293T细胞中敲除PLAC8基因，操作简便，效果完整而彻底，与HEK293T细胞特性一起构成了理想的细胞模型，用于研究细胞内表观遗传学的改变。本发明还突破了构建敲除细胞系过程中的转染效率低及慢病毒包装两个瓶颈，提供了一种简便高效的构建敲减细胞系的方法。