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公开(公告)号:CN116626293A
公开(公告)日:2023-08-22
申请号:CN202310676887.5
申请日:2023-06-08
Applicant: 复旦大学 , 上海市重大传染病和生物安全研究院
IPC: G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/543 , G01N33/553 , B01L3/00
Abstract: 本发明涉及一种微流控芯片的制备方法,所述微流控芯片用于检测溶组织内阿米巴感染,所述制备方法的步骤包括:S1、提供一微流控芯片,所述微流控芯片包括:通道;S2、对所述通道进行修饰,使所述通道的表面能够结合溶组织内阿米巴重组抗原;S3、对所述通道的表面进行所述溶组织内阿米巴重组抗原的结合,使所述通道的表面结合的各所述溶组织内阿米巴重组抗原能够结合至多一个溶组织内阿米巴特异性抗体,且个所述溶组织内阿米巴特异性抗体能够被至多一个结合有抗人IgG抗体的纳米金微球结合;S4、对所述通道的表面未结合所述溶组织内阿米巴重组抗原的位点进行封闭。本发明的检测溶组织内阿米巴感染的方法灵敏度相对较高,大幅提高检测效率。
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公开(公告)号:CN118240954A
公开(公告)日:2024-06-25
申请号:CN202410486016.1
申请日:2024-04-22
Applicant: 上海市重大传染病和生物安全研究院
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , B01L3/00 , C12R1/35
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR/Cas12b‑LAMP的离心式微流控一体化的肺炎支原体检测试剂盒及其应用,试剂盒包括检测用组合物和预包埋试剂的离心式微流控芯片;检测用组合物包括针对肺炎支原体MP5设计的LAMP扩增引物、靶向肺炎支原体MP5基因的sgRNA、AapCas12b蛋白、荧光探针、Bst 2.0聚合酶、dNTP试剂和混合缓冲液;LAMP扩增引物F3、B3、FIP、BIP、FLP、BLP的核苷酸序列如SEQ ID NO.1‑6所示;sgRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示。本发明的试剂盒,基于CRISPR/Cas12b系统结合LAMP等温扩增,通过实时荧光检测与离心式微流控芯片技术相结合的方法,实现肺炎支原体的一步法自动化检测,检测时间短、具有良好的灵敏度和特异性,并通过大量临床样本验证了方法在临床应用中的可行性,为临床肺炎支原体感染的高效检测奠定了基础。
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