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公开(公告)号：CN106084019B
公开(公告)日：2020-04-03
申请号：CN201610277276.3
申请日：2016-05-01
Applicant: 上海大学
IPC: C07K14/415 , C07K1/14
Abstract: 本发明涉及一种玉米胚乳蛋白体的分离方法。步骤如下：将授粉20‑25天的新鲜玉米籽粒液氮研磨至粉末，重悬于溶液A(10 mM Tris‑HCl pH 8.5,10 mM KCl,5 mM MgCl2,7.2%sucrose,add 1 mM DTT,1mM PMSF and罗氏混合蛋白酶抑制剂)，300 g离心30分钟去除细胞碎片，上清经2轮粗级不连续蔗糖密度梯度(1.0 M/L→1.5 M/L→2.0 M/L)离心，取1.5 M→2.0 M蔗糖界面的组分2倍溶液B(10 mM Tris‑HCl pH 8.5,10 mM KCl)稀释后，经2轮细级不连续蔗糖密度梯度(40%w/w→45%→50%→55%→60%)离心，取50%‑55%之间的组分2倍溶液B稀释后，经30‑60%连续密度梯度离心，收集第14层组分10倍溶液B稀释，13000 rpm离心15 min去除蔗糖后，得到高纯活性蛋白体。本方法提取纯度极高且保持生物活性，为利用蛋白体生物反应器生产活性物质提供了重要技术手段。
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公开(公告)号：CN105624323B
公开(公告)日：2019-04-16
申请号：CN201610189558.8
申请日：2016-03-30
Applicant: 上海大学
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及一种用于检测玉米shrunken4基因的特异性引物组及其应用。该特异性引物组中扩增该shrunken4基因左侧DNA片段的一对特异性引物Indel592的碱基序列为：正向引物从5′端至3′端为：GGAAAGCGAAGCAGGTAA；反向引物从5′端至3′端为：GTGGCTCAATCTGGAAACAT；扩增该shrunken4基因右侧DNA片段的一对特异性引物Indel575的碱基序列为：正向引物从5′端至3′端为：CTGGGACTTCCTATGCCT；反向引物从5′端至3′端为：ACGGGAGATTTTGATTGAG。利用这两个分子标记能对玉米任何时期和任何组织的DNA进行基因型鉴定，检测杂交育种子代各单株中shrunken4基因的存在与否以及杂合或纯合状态。这种检测方法的准确性高，操作简单，为利用shrunken4基因的DNA分子标记辅助育种提供重要的技术手段。
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公开(公告)号：CN105907876A
公开(公告)日：2016-08-31
申请号：CN201610412552.2
申请日：2016-06-13
Applicant: 上海大学
Abstract: 本发明涉及一种用于检测玉米opaque10基因的特异性引物组及其应用。该特异性引物组中扩增该opaque10基因左侧DNA片段的一对特异性引物SSR401的碱基序列为：正向引物从5′端至3′端为：TCACGCCACTTCCCTCATC；反向引物从5′端至3′端为：GCACCACCAGCGGTCAAT；扩增该opaque10基因右侧DNA片段的一对特异性引物SSR456的碱基序列为：正向引物从5′端至3′端为：TAGACGTAAGTTGTTTAAGG；反向引物从5′端至3′端为：GTCGCTTGACCTGATTAC。利用这两对特异性引物组能对玉米任何时期和任何组织的DNA进行基因型鉴定，检测杂交育种子代各单株中opaque10基因的存在与否以及杂合或纯合状态。这种检测方法的准确性高，操作简单，为利用opaque10基因的DNA分子标记辅助育种提供重要的技术手段。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105624323A
公开(公告)日：2016-06-01
申请号：CN201610189558.8
申请日：2016-03-30
Applicant: 上海大学
CPC classification number: C12Q1/6895
Abstract: 本发明涉及一种用于检测玉米shrunken4基因的特异性引物组及其应用。该特异性引物组中扩增该shrunken4基因左侧DNA片段的一对特异性引物Indel592 的碱基序列为：正向引物从5′端至3′端为：GGAAAGCGAAGCAGGTAA；反向引物从5′端至3′端为：GTGGCTCAATCTGGAAACAT； 扩增该shrunken4基因右侧DNA片段的一对特异性引物Indel575 的碱基序列为：正向引物从5′端至3′端为：CTGGGACTTCCTATGCCT；反向引物从5′端至3′端为：ACGGGAGATTTTGATTGAG。利用这两个分子标记能对玉米任何时期和任何组织的DNA进行基因型鉴定，检测杂交育种子代各单株中shrunken4基因的存在与否以及杂合或纯合状态。这种检测方法的准确性高，操作简单，为利用shrunken4基因的DNA分子标记辅助育种提供重要的技术手段。
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公开(公告)号：CN102250925A
公开(公告)日：2011-11-23
申请号：CN201110148438.0
申请日：2011-06-03
Applicant: 上海大学
Abstract: 本发明涉及一种谷氨酰胺合成酶基因、其编码蛋白及其克隆方法。本发明的基因来源于盐藻，为SEQIDNO1所示的碱基序列，该基因具有合成谷氨酰胺合成酶的功能，并且证明了该基因能够显著提高模式生物大肠杆菌合成谷氨酰胺的能力。这也预示了所公开的全长基因及氨基酸序列，其在提高生物体的氮利用效率、增加生物体氮元素含量的植物基因工程方面具有应用价值。
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公开(公告)号：CN106084019A
公开(公告)日：2016-11-09
申请号：CN201610277276.3
申请日：2016-05-01
Applicant: 上海大学
IPC: C07K14/415 , C07K1/14
Abstract: 本发明涉及一种玉米胚乳蛋白体的分离方法。步骤如下：将授粉20‑25天的新鲜玉米籽粒液氮研磨至粉末，重悬于溶液A(10 mM Tris‑HCl pH 8.5,10 mM KCl,5 mM MgCl2,7.2% sucrose,add 1 mM DTT,1mM PMSF and 罗氏混合蛋白酶抑制剂)，300 g离心30分钟去除细胞碎片，上清经2轮粗级不连续蔗糖密度梯度(1.0 M/L→1.5 M/L→2.0 M/L)离心，取1.5 M→2.0 M蔗糖界面的组分2倍溶液B(10 mM Tris‑HCl pH 8.5,10 mM KCl)稀释后，经2轮细级不连续蔗糖密度梯度(40% w/w → 45% → 50% → 55% → 60%)离心，取50%‑55%之间的组分2倍溶液B稀释后，经30‑60%连续密度梯度离心，收集第14层组分10倍溶液B稀释，13 000 rpm 离心15 min去除蔗糖后，得到高纯活性蛋白体。本方法提取纯度极高且保持生物活性，为利用蛋白体生物反应器生产活性物质提供了重要技术手段。
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公开(公告)号：CN105907876B
公开(公告)日：2019-08-20
申请号：CN201610412552.2
申请日：2016-06-13
Applicant: 上海大学
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及一种用于检测玉米opaque10基因的特异性引物组及其应用。该特异性引物组中扩增该opaque10基因左侧DNA片段的一对特异性引物SSR401的碱基序列为：正向引物从5′端至3′端为：TCACGCCACTTCCCTCATC；反向引物从5′端至3′端为：GCACCACCAGCGGTCAAT；扩增该opaque10基因右侧DNA片段的一对特异性引物SSR456的碱基序列为：正向引物从5′端至3′端为：TAGACGTAAGTTGTTTAAGG；反向引物从5′端至3′端为：GTCGCTTGACCTGATTAC。利用这两对特异性引物组能对玉米任何时期和任何组织的DNA进行基因型鉴定，检测杂交育种子代各单株中opaque10基因的存在与否以及杂合或纯合状态。这种检测方法的准确性高，操作简单，为利用opaque10基因的DNA分子标记辅助育种提供重要的技术手段。
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