公开(公告)号：CN105062949B

公开(公告)日：2019-01-11

申请号：CN201510363007.4

申请日：2015-06-26

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 曾丽 ,  刘国锋 ,  王鹏 ,  刘晓丛 ,  彭勇政 ,  赵子刚 ,  林登贵 ,  王梦茹 ,  秦泽冠 ,  周嘉桢

IPC: C12N5/04

Abstract: 本发明公开了一种小花矮牵牛原生质体的制备方法；该方法包括以下步骤：在黑暗条件下，将幼嫩叶片置于3～5℃清水中预处理20～25h；用酶解液酶解预处理后的叶片；加入和酶解液等体积的CPW洗液，摇匀，300目细胞筛过滤，转速1100r/min离心2min，吸去上清液；向沉淀中加入CPW洗液洗涤原生质体，转速1100r/min离心2min，收集沉淀加入悬浮液悬浮，即得到产量为(5.0±0.3)×106个/g，活性达到85％的原生质体，9h后80％的原生质体可维持活性。用本发明的分离方法获得了高活性、高产量及状态良好的原生质体，可满足原生质体的培养及植株再生的条件，为植物原生质体融合培育新品种提供实验材料。

公开(公告)号：CN103141384A

公开(公告)日：2013-06-12

申请号：CN201310062339.X

申请日：2013-02-27

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 曾丽 ,  汪晓沙 ,  林登贵 ,  彭勇政 ,  赵子刚

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种盆栽菊花的组织培养快速繁殖方法；所述方法包括如下步骤：步骤一，将灭菌处理后的外植体进行诱导培养，获得不定芽；步骤二，将诱导培养出的不定芽进行增殖培养；步骤三，将增殖培养后的不定芽进行生根培养，得到生根苗；步骤四，将生根苗炼苗，移栽到基质中培养，获得再生植株，即可。本发明取材方便，材料来源充足，不定芽的诱导率最高可达91.7％，增殖速度快，增殖系数可达12.1，生根率可达100％，移栽成活率可达98％以上。本发明大大提高了育苗生产能力，缩短了成苗周期，降低了生产成本，可为盆栽菊花品种‘Breeze Ivory’大面积园林应用和工厂化育苗提供有效的方法。

公开(公告)号：CN101543185B

公开(公告)日：2012-03-21

申请号：CN200910050455.3

申请日：2009-04-30

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 曾丽 ,  唐克轩 ,  赵子刚 ,  孙佳 ,  杨帆 ,  张永强

IPC: A01H4/00

Abstract: 一种生物技术领域的色素万寿菊的组织培养方法，包括如下步骤：取万寿菊叶片，灭菌后诱导；诱导使用的分化培养基具体为MS基本培养基，添加剂为：3mg/L的6-BA，3mg/L的IAA，30g/L的蔗糖，6g/L的植物凝胶；培养条件为：温度23～27℃，光照时间10h～20h/d，光照强度2000～3000lux，不定芽的诱导时间为9～14d；将分化出的不定芽继代培养，诱导芽生长培养基与步骤一中的分化培养基相同，培养条件为：温度23～27℃，光照时间10h～20h/d，光照强度2000～3000lux，培养时间为30～50d；将分化伸长的芽进行生根培养，生根培养时间为30d，得到万寿菊再生植株。本发明的方法取材方便、可高频率地诱导出大量的万寿菊再生芽，再生植株成活率高，再生植株变异小和遗传稳定性较高。

公开(公告)号：CN105062949A

公开(公告)日：2015-11-18

申请号：CN201510363007.4

申请日：2015-06-26

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 曾丽 ,  刘国锋 ,  王鹏 ,  刘晓丛 ,  彭勇政 ,  赵子刚 ,  林登贵 ,  王梦茹 ,  秦泽冠 ,  周嘉桢

IPC: C12N5/04

Abstract: 本发明公开了一种小花矮牵牛原生质体的制备方法；该方法包括以下步骤：在黑暗条件下，将幼嫩叶片置于3～5℃清水中预处理20～25h；用酶解液酶解预处理后的叶片；加入和酶解液等体积的CPW洗液，摇匀，300目细胞筛过滤，转速1100r/min离心2min，吸去上清液；向沉淀中加入CPW洗液洗涤原生质体，转速1100r/min离心2min，收集沉淀加入悬浮液悬浮，即得到产量为(5.0±0.3)×106个/g，活性达到85％的原生质体，9h后80％的原生质体可维持活性。用本发明的分离方法获得了高活性、高产量及状态良好的原生质体，可满足原生质体的培养及植株再生的条件，为植物原生质体融合培育新品种提供实验材料。

公开(公告)号：CN104920220A

公开(公告)日：2015-09-23

申请号：CN201510347453.6

申请日：2015-06-19

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 曾丽 ,  赵子刚 ,  丁国平 ,  刘晓丛 ,  彭勇政 ,  舒雅娟 ,  穆廷云 ,  王鹏 ,  林登贵 ,  王梦茹 ,  迪力达尔.依明 ,  徐佳琳

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种结合瓶外生根技术的月季组培快繁的方法；以月季半木质化茎段为外植体，接种到含有MS培养基、6-BA、NAA、蔗糖和琼脂的诱导培养基中培养，继代培养两到三次，然后切取新芽转入含有MS培养基、6-BA、CPPU、NAA、蔗糖和琼脂的培养基中进行连续增殖培养；将再生苗浸泡生根液后扦插于复合基质上，实现瓶外生根。本发明在组培瓶内阶段，包括初代诱导及继代增殖中以6-BA为植物生长调节剂，它具有促进细胞分裂，促进细胞生长等作用，增殖系数高，植株强壮，可不经壮苗直接进用瓶外生根程序；同时采用瓶外生根技术，相对瓶内生根速度快，效率高、成本低，进一步加快了繁殖速度。

公开(公告)号：CN105941148B

公开(公告)日：2018-08-03

申请号：CN201610316552.2

申请日：2016-05-12

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 曾丽 ,  王鹏 ,  刘晓丛 ,  彭勇政 ,  王梦茹 ,  周元飞 ,  刘国锋 ,  陶懿伟 ,  赵子刚 ,  李水仙

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开了种矮牵牛叶肉原生质体分离及培养方法,所述原生质体分离方法包括以下步骤:称量矮牵牛幼嫩叶片进行处理后用酶解液酶解;向酶解后的溶液中加入CPW洗液,经过滤、离心,吸去上清液;再次加入CPW洗液洗涤,离心,收集沉淀,即得纯化后的原生质体。所述原生质体培养方法包括:将制备的原生质体加入原生质体培养液中,24℃黑暗环境固液培养法培养30d后,将培养形成的微型愈伤组织转移至增殖培养基;培养21d后,转移至分化培养基;培养即可。用本发明的分离及培养方法可获得高活性、高产量的原生质体,对其培养可诱导出愈伤组织,最终分化出芽,为矮牵牛进步体细胞融合等研究提供实验材料,可为矮牵牛种质资源创新奠定基础。

公开(公告)号：CN105941148A

公开(公告)日：2016-09-21

申请号：CN201610316552.2

申请日：2016-05-12

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 曾丽 ,  王鹏 ,  刘晓丛 ,  彭勇政 ,  王梦茹 ,  周元飞 ,  刘国锋 ,  陶懿伟 ,  赵子刚 ,  李水仙

IPC: A01H4/00

CPC classification number: A01H4/005

Abstract: 本发明公开了一种矮牵牛叶肉原生质体分离及培养方法，所述原生质体分离方法包括以下步骤：称量矮牵牛幼嫩叶片进行处理后用酶解液酶解；向酶解后的溶液中加入CPW洗液，经过滤、离心，吸去上清液；再次加入CPW洗液洗涤，离心，收集沉淀，即得纯化后的原生质体。所述原生质体培养方法包括：将制备的原生质体加入原生质体培养液中，24℃黑暗环境固液培养法培养30d后，将培养形成的微型愈伤组织转移至增殖培养基；培养21d后，转移至分化培养基；培养即可。用本发明的分离及培养方法可获得高活性、高产量的原生质体，对其培养可诱导出愈伤组织，最终分化出芽，为矮牵牛进一步体细胞融合等研究提供实验材料，可为矮牵牛种质资源创新奠定基础。

公开(公告)号：CN102379241A

公开(公告)日：2012-03-21

申请号：CN201110219616.4

申请日：2011-08-02

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 曾丽 ,  龚霄雯 ,  汪晓沙 ,  丁国平 ,  张嫔 ,  薛芹芹 ,  王华君 ,  赵子刚

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明涉及一种生物技术领域的红叶石楠组织培养的快繁方法，包括如下步骤：步骤一，取红叶石楠茎段，修剪为外植体，灭菌后诱导，得不定芽；步骤二，将不定芽进行继代培养，之后进行增殖培养；步骤三，将增殖培养后的不定芽进行生根培养，得到生根苗；步骤四，将生根苗炼苗，移栽到消毒栽培基质中培养，获得红叶石楠再生植株。本发明具有如下的有益效果：本发明的方法是以红叶石楠茎段作为外植体，通过不定芽诱导分化，再分化获得再生植株。本发明的方法取材方便，材料来源充足，不定芽的诱导率最高可达100%，增殖速度较快，增殖系数可达7.1，生根率亦可达95%以上，移栽成活率可达80%以上。

公开(公告)号：CN101543185A

公开(公告)日：2009-09-30

申请号：CN200910050455.3

申请日：2009-04-30

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 曾丽 ,  唐克轩 ,  赵子刚 ,  孙佳 ,  杨帆 ,  张永强

IPC: A01H4/00

Abstract: 一种生物技术领域的色素万寿菊的组织培养方法，包括如下步骤：取万寿菊叶片，灭菌后诱导；诱导使用的分化培养基具体为MS基本培养基，添加剂为：3mg/L的6－BA，3mg/L的IAA，30g/L的蔗糖，6g/L的植物凝胶；培养条件为：温度23～27℃，光照时间10h～20h/d，光照强度2000～3000lux，不定芽的诱导时间为9～14d；将分化出的不定芽继代培养，诱导芽生长培养基与步骤一中的分化培养基相同，培养条件为：温度23～27℃，光照时间10h～20h/d，光照强度2000～3000lux，培养时间为30～50d；将分化伸长的芽进行生根培养，生根培养时间为30d，得到万寿菊再生植株。本发明的方法取材方便、可高频率地诱导出大量的万寿菊再生芽，再生植株成活率高，再生植株变异小和遗传稳定性较高。

公开(公告)号：CN102379241B

公开(公告)日：2013-03-27

申请号：CN201110219616.4

申请日：2011-08-02

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 曾丽 ,  龚霄雯 ,  汪晓沙 ,  丁国平 ,  张嫔 ,  薛芹芹 ,  王华君 ,  赵子刚

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明涉及一种生物技术领域的红叶石楠组织培养的快繁方法，包括如下步骤：步骤一，取红叶石楠茎段，修剪为外植体，灭菌后诱导，得不定芽；步骤二，将不定芽进行继代培养，之后进行增殖培养；步骤三，将增殖培养后的不定芽进行生根培养，得到生根苗；步骤四，将生根苗炼苗，移栽到消毒栽培基质中培养，获得红叶石楠再生植株。本发明具有如下的有益效果：本发明的方法是以红叶石楠茎段作为外植体，通过不定芽诱导分化，再分化获得再生植株。本发明的方法取材方便，材料来源充足，不定芽的诱导率最高可达100%，增殖速度较快，增殖系数可达7.1，生根率亦可达95%以上，移栽成活率可达80%以上。