一种基于PCR-ELISA的结核分枝杆菌耐药基因检测方法

    公开(公告)号:CN102465177A

    公开(公告)日:2012-05-23

    申请号:CN201010541361.9

    申请日:2010-11-12

    Abstract: 本发明提供一种基于PCR-ELISA的结核分枝杆菌耐药基因检测方法,包括以下步骤:(1)针对rpoB基因突变位点设计11个探针,并将之点样于96微孔板;(2)每一个检测样本的DNA均分3个反应管同时扩增,每管加入rpoB-F和rpoB-R两种引物,每对引物中的下游引物5’端均用地高辛标记,经PCR扩增出大量含有地高辛标记的结核分枝杆菌相应的基因片段产物;(3)将扩增产物与探针进行杂交,杂交后带有地高辛标记的目标基因与探针结合在一起,洗去未结合的片段,通过ELISA反应,测量OD值得出结果。本方法提供了一次杂交实验即可快速获得结核分枝杆菌对多个临床分离株的药物耐受信息,使得结核分枝杆菌分离株耐药性检测缩短到6-8h,充分显示了该方法的优越性。

    一种应用于结核病快速诊断的糖芯片、其制备方法及采用其的结核病诊断试剂盒

    公开(公告)号:CN102707053A

    公开(公告)日:2012-10-03

    申请号:CN201210185439.7

    申请日:2012-06-07

    Abstract: 本发明涉及一种用于结核病快速诊断的糖芯片,其包括固相载体,其特征在于,所述糖芯片还包括结核分枝杆菌脂多糖类抗原探针,所述结核分枝杆菌脂多糖类抗原探针通过肟化反应被固定于所述固相载体上。本发明还涉及上述糖芯片的制备方法以及采用其的结核病诊断试剂盒。本发明通过分离提取及纯化结核分枝杆菌细胞壁中脂多糖,利用肟化反应的方法将LAM和LM糖探针固定于硝酸纤维膜或微孔板等固相载体,制作成糖芯片,通过与血清中的相应抗体结合及酶联显色反应,从而判断结核分枝杆菌的感染与否。本发明使用的具有种属特异性的细胞壁脂多糖类抗原只能与特异的结核抗体结合,从而使结核病的检测特异性和敏感性大大提高。

    分枝杆菌最低抑菌浓度检测系统的制备方法

    公开(公告)号:CN102559844A

    公开(公告)日:2012-07-11

    申请号:CN201210005116.5

    申请日:2012-01-09

    Abstract: 本发明提供一种分枝杆菌MIC检测系统的制备方法,其包括以下步骤:将配制好的含药液体培养基与一定体积的分枝杆菌菌液、显色剂的反应体系在一定温度下恒温共培养一段时间后,采用一定的检测方法进行显色检测,并根据显色检测结果,判定药物最低抑菌浓度。与现有技术相比,本发明通过一开始将含药液体培养基、菌液、显色剂、中间电子受体共培养,省略了现有技术中的培养一段时间后再开盖加入显色剂的步骤,使操作更为简化,降低了操作污染及生物安全风险。本发明这一检测体系简单、安全、低污染、可目视并快速判读分枝杆菌药物最低抑菌浓度值。

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