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公开(公告)号：CN117025672A
公开(公告)日：2023-11-10
申请号：CN202310944134.8
申请日：2023-07-28
Applicant: 苏州大学
IPC: C12N15/85 , D01F4/02 , A01K67/04 , C07K14/435
Abstract: 本发明公开了一种基于基因打靶家蚕制备蜘蛛家蚕复合丝纤维的方法，具体为基于基因打靶家蚕制备蜘蛛大壶状腺丝蛋白与家蚕丝蛋白复合丝纤维的方法。将pUC‑target‑Heavy‑g和表达Cas12a核酸酶的质粒piggyCPF1注射至家蚕初产卵中，通过荧光初筛、分子生物学鉴定和继代筛选，获得蜘蛛大壶状腺丝蛋白基因序列表达盒替代家蚕丝素重链基因表达盒的基因打靶家蚕。该基因打靶家蚕常规饲养，将熟蚕移至簇具，营茧，采茧，经过缫丝获含金丝织网蜘蛛大壶状腺丝蛋白的复合蚕丝。利用本发明可获取含有金丝织网蜘蛛大壶状腺丝蛋白的蚕丝，用于制作各种纺织丝绸制品，满足制备各种生物材料对丝蛋白的多样性的需求，也可以用获得的基因打靶家蚕通过常规杂交育种的手段，选育新家蚕品种。
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公开(公告)号：CN114128723B
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202111322681.X
申请日：2021-11-09
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明公开了一种新型抗病毒纳米材料及其应用。具体的，抗病毒纳米材料为纳米二氧化硅（nSiO2）。通过本发明设计的多组实验，（1）nSiO2和病毒粒子共孵育再感染细胞；(2)nSiO2先处理细胞，再感染病毒；（3）病毒先感染细胞，再nSiO2处理细胞，结果证实nSiO2处理细胞后，能够抑制病毒对细胞的感染，而病毒粒子和nSiO2共孵育后再感染细胞则病毒感染效果很弱。
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公开(公告)号：CN116284364A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202211515400.7
申请日：2022-11-29
Applicant: 苏州培恩特生物科技有限公司 , 苏州大学
IPC: C07K16/12 , C07K16/02 , G01N33/569 , A61K39/40 , A61P31/04
Abstract: 本发明公开了一种抗诺卡氏菌病的卵黄抗体及其制备方法和应用，涉及生物医药技术领域。所述卵黄抗体的轻链序列包括如SEQ ID NO.1所示序列，重链序列包括如SEQ ID NO.2所示序列。本发明将病原菌诺卡氏菌扩大培养，制成灭活菌苗免疫蛋鸡，使之通过免疫应答产生抗诺卡氏菌的卵黄抗体，收集免疫后的鸡蛋，采用水稀释法从卵黄中提取得到抗诺卡氏菌病的卵黄抗体。经验证，该卵黄抗体与诺卡氏菌有很强的结合能力，并可以有效抑制诺卡氏菌，效价最高可达1:64000。
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公开(公告)号：CN114957485A
公开(公告)日：2022-08-30
申请号：CN202210482497.X
申请日：2022-05-05
Applicant: 苏州大学
IPC: C07K19/00 , C12N15/866 , A01K67/033
Abstract: 本发明公开了一种含多种蜘蛛腺丝蛋白的高强度蚕丝及其制备方法，得到的蚕丝含金丝织网蜘蛛大壶状腺丝蛋白MaSp‑g和MaSp‑c。现有技术通过家蚕转基因的方法将蜘蛛丝蛋白基因导入家蚕基因组，须经过较复杂的程序进行转基因家蚕的筛选鉴定，进一步通过杂交筛选获得转基因纯系，历时近2年，且多为表达一种蜘蛛丝蛋白基因；本发明可以在较短的时间获取重组病毒，并通过该病毒接种5龄家蚕能在一周左右获得含有多种蜘蛛丝蛋白的嵌合蚕丝，其断裂强度达到1116.55MPa，丝长达到纯蚕丝丝长的65%，既解决了现有技术仅能用于实用性差的多化性品种的问题，又克服了现有技术复合丝长较纯蚕丝丝长明显下降的缺陷。
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公开(公告)号：CN114181969A
公开(公告)日：2022-03-15
申请号：CN202111499178.1
申请日：2021-12-09
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明涉及固定化蛋白领域，具体涉及一种制备包裹外源蛋白的多角体的方法。通过基因工程方法利用杆状病毒表达系统在家蚕培养细胞或家蚕中共表达家蚕质型多角体蛋白、带有家蚕质型多角体病毒结构蛋白VP5标签以及蛋白酶特异性断裂位点的融合外源蛋白，从而形成包裹外源蛋白质的多角体。形成的多角体可以通过简单的差速离心实现纯化；多角体对其包裹的外源蛋白有保护和缓释作用。纯化的多角体在碱性条件下裂解后，用盐酸溶液调pH至多角体蛋白等电点，可以通过离心使多角体蛋白沉淀，而融合外源蛋白留存在上清中，从而可以快速、方便地获得融合外源蛋白；融合外源蛋白通过相应的蛋白酶酶切移除VP5标签可以方便地获得更接近天然的外源蛋白。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106834352B
公开(公告)日：2020-06-16
申请号：CN201710109641.4
申请日：2017-02-27
Applicant: 苏州大学
IPC: C12N15/866 , C12N7/04 , A61K39/245 , A61P31/22 , C12N15/62
Abstract: 本发明涉及抗原蛋白表达技术，具体涉及基于杆状病毒表达系统制备包裹鲤疱疹病毒II型抗原的多角体的方法，通过设计重组家蚕核型多角体病毒BmNPV‑VP3‑cyHV‑polh，ORF72、ORF66、ORF81和ORF82的1‑186、993‑1197、603‑783、85‑186区域序列与家蚕质型多角体病毒结构蛋白VP3基因1‑279区域的编码序列串联融合序列由杆状病毒P10启动子控制；家蚕质型多角体蛋白基因由杆状病毒的多角体蛋白基因启动子控制。用该病毒接种家蚕或家蚕培养细胞，重组病毒表达的鲤疱疹病毒II型的抗原蛋白可包裹进家蚕质型多角体内。形成的多角体可以通过简单的差速离心实现纯化；纯化的多角体在碱性条件下裂解后，可以通过离心使多角体蛋白沉淀，而鲤疱疹病毒II型抗原留存在上清中，从而可以快速、方便地获得鲤疱疹病毒II型抗原。
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公开(公告)号：CN110628958A
公开(公告)日：2019-12-31
申请号：CN201911095969.0
申请日：2019-11-11
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明公开了一种用于中华绒螯蟹茧蜂病毒PCR检测的引物对及试剂盒。本发明提供了一种用于中华绒螯蟹茧蜂病毒PCR检测的引物对，本发明的引物对根据如SEQ ID NO.3所示的中华绒螯蟹茧蜂病毒特异性序列进行设计，实现了中华绒螯蟹茧蜂病毒的PCR检测。本发明实现了中华绒螯蟹茧蜂病毒的快速检测，从模板制备至PCR产物的电泳检测通常在5小时左右完成，由于PCR技术已非常普及，因此在一般的生物学实验室均可实现，可广泛应于养殖生产中中华绒螯蟹茧蜂病毒的检测。与宏基因组、宏转录组检测相比，速度快、费用低、针对性强，应用性好。
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公开(公告)号：CN108660157A
公开(公告)日：2018-10-16
申请号：CN201810535576.6
申请日：2018-05-30
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明公开了一种基于DNA载体的家蚕质型多角体病毒的体外构建方法。具体而言，本发明的方法包括下列步骤：1）获得家蚕质型多角体病毒基因组；2）设计并合成引物；3）获得病毒基因组S1至S10片段的cDNA；4）对cDNA进行PCR扩增；5）将扩增产物进行酶切，然后克隆到质粒载体中，获得重组质粒；6）将重组质粒进行酶切、线性化；以及7）将线性化质粒等摩尔混合，使用脂质体进行包裹并转染表达T7 RNA聚合酶的宿主细胞，进而获得体外构建的家蚕质型多角体病毒。本发明的一种基于DNA载体的家蚕质型多角体病毒的体外构建方法不但对家蚕质型多角体病毒基因组各片段的功能研究有促进作用，为体外获取家蚕质型多角体病毒提供新方法，而且也可以为构建重组质型多角体病毒生物杀虫剂的研发提供理论指导和技术支撑。
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公开(公告)号：CN104789597B
公开(公告)日：2018-03-30
申请号：CN201510209183.2
申请日：2015-04-28
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明公开了一种家蚕质型多角体病毒的体外构建方法。具体而言，本发明的方法包括下列步骤：1）获得家蚕质型多角体病毒基因组；2）设计并合成引物；3）获得病毒基因组S1至S10片段的cDNA；4）对cDNA进行PCR扩增；5）将扩增产物进行酶切，然后克隆到质粒载体中，获得重组质粒；6）将重组质粒进行酶切、线性化后，经过体外转录，获得RNA；以及7）将RNA等摩尔混合，使用脂质体进行包裹并转染宿主，进而获得体外构建的家蚕质型多角体病毒。本发明的家蚕质型多角体病毒的体外构建方法不但对家蚕质型多角体病毒基因组各片段的功能研究有促进作用，也可以为重组质型多角体病毒生物杀虫剂的研发提供技术支持。
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公开(公告)号：CN104789598A
公开(公告)日：2015-07-22
申请号：CN201510209184.7
申请日：2015-04-28
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明公开了一种表达红色荧光蛋白的重组家蚕质型多角体病毒的构建方法。具体而言，本发明的方法包括下列步骤：1）获得病毒基因组；2）设计并合成引物；3）获得病毒基因组的cDNA；4）对cDNA进行PCR扩增；5）将扩增产物进行酶切，获得重组质粒；6）将重组质粒pT-S1至pT-S9进行酶切，体外转录获得对应的RNA；7）构建带有红色荧光蛋白基因的重组质粒pT-S10-DsRed并获得S10-DsRed RNA；以及8）将上述RNA等摩尔混合，包裹并转染宿主，进而获得病毒。利用本发明建立的方法可以在家蚕细胞中表达红色荧光蛋白，进而有可能获得人们所需的重组质型多角体病毒生物杀虫剂。
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