一种基于基因打靶家蚕制备蜘蛛家蚕复合丝纤维的方法

    公开(公告)号:CN117025672A

    公开(公告)日:2023-11-10

    申请号:CN202310944134.8

    申请日:2023-07-28

    Applicant: 苏州大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于基因打靶家蚕制备蜘蛛家蚕复合丝纤维的方法,具体为基于基因打靶家蚕制备蜘蛛大壶状腺丝蛋白与家蚕丝蛋白复合丝纤维的方法。将pUC‑target‑Heavy‑g和表达Cas12a核酸酶的质粒piggyCPF1注射至家蚕初产卵中,通过荧光初筛、分子生物学鉴定和继代筛选,获得蜘蛛大壶状腺丝蛋白基因序列表达盒替代家蚕丝素重链基因表达盒的基因打靶家蚕。该基因打靶家蚕常规饲养,将熟蚕移至簇具,营茧,采茧,经过缫丝获含金丝织网蜘蛛大壶状腺丝蛋白的复合蚕丝。利用本发明可获取含有金丝织网蜘蛛大壶状腺丝蛋白的蚕丝,用于制作各种纺织丝绸制品,满足制备各种生物材料对丝蛋白的多样性的需求,也可以用获得的基因打靶家蚕通过常规杂交育种的手段,选育新家蚕品种。

    一种含多种蜘蛛腺丝蛋白的高强度蚕丝及其制备方法

    公开(公告)号:CN114957485A

    公开(公告)日:2022-08-30

    申请号:CN202210482497.X

    申请日:2022-05-05

    Applicant: 苏州大学

    Abstract: 本发明公开了一种含多种蜘蛛腺丝蛋白的高强度蚕丝及其制备方法,得到的蚕丝含金丝织网蜘蛛大壶状腺丝蛋白MaSp‑g和MaSp‑c。现有技术通过家蚕转基因的方法将蜘蛛丝蛋白基因导入家蚕基因组,须经过较复杂的程序进行转基因家蚕的筛选鉴定,进一步通过杂交筛选获得转基因纯系,历时近2年,且多为表达一种蜘蛛丝蛋白基因;本发明可以在较短的时间获取重组病毒,并通过该病毒接种5龄家蚕能在一周左右获得含有多种蜘蛛丝蛋白的嵌合蚕丝,其断裂强度达到1116.55MPa,丝长达到纯蚕丝丝长的65%,既解决了现有技术仅能用于实用性差的多化性品种的问题,又克服了现有技术复合丝长较纯蚕丝丝长明显下降的缺陷。

    一种制备包裹外源蛋白的多角体的方法

    公开(公告)号:CN114181969A

    公开(公告)日:2022-03-15

    申请号:CN202111499178.1

    申请日:2021-12-09

    Applicant: 苏州大学

    Abstract: 本发明涉及固定化蛋白领域,具体涉及一种制备包裹外源蛋白的多角体的方法。通过基因工程方法利用杆状病毒表达系统在家蚕培养细胞或家蚕中共表达家蚕质型多角体蛋白、带有家蚕质型多角体病毒结构蛋白VP5标签以及蛋白酶特异性断裂位点的融合外源蛋白,从而形成包裹外源蛋白质的多角体。形成的多角体可以通过简单的差速离心实现纯化;多角体对其包裹的外源蛋白有保护和缓释作用。纯化的多角体在碱性条件下裂解后,用盐酸溶液调pH至多角体蛋白等电点,可以通过离心使多角体蛋白沉淀,而融合外源蛋白留存在上清中,从而可以快速、方便地获得融合外源蛋白;融合外源蛋白通过相应的蛋白酶酶切移除VP5标签可以方便地获得更接近天然的外源蛋白。

    lncRNAs作为活动性肺结核病特异性标志物的应用

    公开(公告)号:CN107653315A

    公开(公告)日:2018-02-02

    申请号:CN201710960636.4

    申请日:2017-10-16

    Abstract: 本发明公开了lncRNAs作为活动性肺结核病特异性标志物的应用。lncRNAs有组织特异性与时空特异性,不同组织之间的lncRNAs表达量不同,同一组织或器官在不同生长阶段,其中的lncRNAs表达量也会变化,本发明首次公开了两个lncRNAs作为活动性肺结核病特异性标志物,利用临床上比较容易直接获得的全血标本,结合设计的引物对进行RT-qPCR验证lncRNAs的差异表达,具有快速、简单、省时、检测灵敏度高,样品消耗少的优点,是非常适合的利用差异表达的lncRNAs诊断活动性肺结核病的方法,对研究控制肺结核病的传播,降低其发生率具有重要的意义。

    一种防水透湿涂层胶、制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN102633977A

    公开(公告)日:2012-08-15

    申请号:CN201210136332.3

    申请日:2012-05-04

    Applicant: 苏州大学

    Inventor: 周向东 朱敏

    Abstract: 本发明公开了一种防水透湿涂层胶、制备方法及其应用。将聚醚二元醇脱水处理后,加入二异氰酸酯和亲水单体预聚;再加入交联单体交联、扩链剂扩链,以长链饱和脂肪醇接枝,经中和剂中和后,进行乳化、除去溶剂,得到一种防水透湿涂层胶,用于棉、涤纶和锦纶织物涂层整理。本发明采用具有较强疏水性的长链饱和脂肪醇改性水性聚氨酯,能较大幅度地提高聚氨酯膜的防水性能;同时,采用聚醚二元醇为软单体,在聚氨酯分子中与硬链段的微相分离程度高,能够提高聚氨酯膜的透湿性能。本发明原料来源广泛,价格便宜,对环境无危害,产品的性价比高;制备工艺简单、易于控制,适合工业化生产。

    一种抗传染性脾肾坏死病毒的circRNA疫苗及其构建方法与应用

    公开(公告)号:CN114317572B

    公开(公告)日:2024-07-26

    申请号:CN202111657441.5

    申请日:2021-12-31

    Applicant: 苏州大学

    Abstract: 本发明涉及一种抗传染性脾肾坏死病毒的circRNA疫苗及其构建方法与应用。合成5’端依次为体外T7(或S6)转录启动子、脑心肌炎病毒的内部核糖体进入位点IRES、N6‑甲基腺嘌呤m6A位点、传染性脾肾坏死病毒ISKNV主要衣壳蛋白MCP开放读码框的融合序列P‑IRES‑m6A‑MCP,以P‑IRES‑m6A‑MCP为模板,用T7(或S6)转录酶体外转录RNA,用DNaseI去除DNA模板后,用T4 RNA连接酶连接环化,用RNase R酶去除线性RNA后获环状RNA,即circRNA‑MCP。该circRNA‑MCP免疫注射后可减少传染性脾肾坏死病的发生。

    一种制备包裹外源蛋白的多角体的方法

    公开(公告)号:CN114181969B

    公开(公告)日:2024-05-28

    申请号:CN202111499178.1

    申请日:2021-12-09

    Applicant: 苏州大学

    Abstract: 本发明涉及固定化蛋白领域,具体涉及一种制备包裹外源蛋白的多角体的方法。通过基因工程方法利用杆状病毒表达系统在家蚕培养细胞或家蚕中共表达家蚕质型多角体蛋白、带有家蚕质型多角体病毒结构蛋白VP5标签以及蛋白酶特异性断裂位点的融合外源蛋白,从而形成包裹外源蛋白质的多角体。形成的多角体可以通过简单的差速离心实现纯化;多角体对其包裹的外源蛋白有保护和缓释作用。纯化的多角体在碱性条件下裂解后,用盐酸溶液调pH至多角体蛋白等电点,可以通过离心使多角体蛋白沉淀,而融合外源蛋白留存在上清中,从而可以快速、方便地获得融合外源蛋白;融合外源蛋白通过相应的蛋白酶酶切移除VP5标签可以方便地获得更接近天然的外源蛋白。

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