公开(公告)号：CN114181969B

公开(公告)日：2024-05-28

申请号：CN202111499178.1

申请日：2021-12-09

Applicant: 苏州大学

Inventor： 贡成良 ,  薛仁宇 ,  胡小龙 ,  朱敏 ,  曹广力 ,  张梓瑶 ,  冯永杰

IPC: C12N15/866 ,  C12N15/64 ,  C12N15/62 ,  C07K19/00 ,  A61K47/64 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及固定化蛋白领域，具体涉及一种制备包裹外源蛋白的多角体的方法。通过基因工程方法利用杆状病毒表达系统在家蚕培养细胞或家蚕中共表达家蚕质型多角体蛋白、带有家蚕质型多角体病毒结构蛋白VP5标签以及蛋白酶特异性断裂位点的融合外源蛋白，从而形成包裹外源蛋白质的多角体。形成的多角体可以通过简单的差速离心实现纯化；多角体对其包裹的外源蛋白有保护和缓释作用。纯化的多角体在碱性条件下裂解后，用盐酸溶液调pH至多角体蛋白等电点，可以通过离心使多角体蛋白沉淀，而融合外源蛋白留存在上清中，从而可以快速、方便地获得融合外源蛋白；融合外源蛋白通过相应的蛋白酶酶切移除VP5标签可以方便地获得更接近天然的外源蛋白。

公开(公告)号：CN114181969A

公开(公告)日：2022-03-15

申请号：CN202111499178.1

申请日：2021-12-09

Applicant: 苏州大学

Inventor： 贡成良 ,  薛仁宇 ,  胡小龙 ,  朱敏 ,  曹广力 ,  张梓瑶 ,  冯永杰

IPC: C12N15/866 ,  C12N15/64 ,  C12N15/62 ,  C07K19/00 ,  A61K47/64 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及固定化蛋白领域，具体涉及一种制备包裹外源蛋白的多角体的方法。通过基因工程方法利用杆状病毒表达系统在家蚕培养细胞或家蚕中共表达家蚕质型多角体蛋白、带有家蚕质型多角体病毒结构蛋白VP5标签以及蛋白酶特异性断裂位点的融合外源蛋白，从而形成包裹外源蛋白质的多角体。形成的多角体可以通过简单的差速离心实现纯化；多角体对其包裹的外源蛋白有保护和缓释作用。纯化的多角体在碱性条件下裂解后，用盐酸溶液调pH至多角体蛋白等电点，可以通过离心使多角体蛋白沉淀，而融合外源蛋白留存在上清中，从而可以快速、方便地获得融合外源蛋白；融合外源蛋白通过相应的蛋白酶酶切移除VP5标签可以方便地获得更接近天然的外源蛋白。