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公开(公告)号：CN102994530A
公开(公告)日：2013-03-27
申请号：CN201210562538.2
申请日：2012-12-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种底物亲和力强的甘露聚糖酶的设计与制备。本发明提出了一种底物亲和力强的AusMan5AY111F与AusMan5AY115F突变酶的设计与构建的方法，通过序列同源性分析、同源建模、结合能的计算等最终确定突变位点，大引物PCR得到的相应的基因命名为Ausman5AY111F、man5AY115F。本发明还公开了突变酶工程菌的构建以及高效表达和纯化的方法，制备的突变酶具有底物亲和力强、催化效率高的特性，具有较大的工业化生产潜力和经济价值。
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公开(公告)号：CN102676411A
公开(公告)日：2012-09-19
申请号：CN201210181373.4
申请日：2012-06-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种新型的共表达源自黑曲霉(Aspergillus niger)LW-1的β-甘露聚糖酶基因和源自米曲霉(Aspergillus oryzae)CICC 40186的β-1，4-木聚糖酶耐热突变子基因的工程菌GS115/man5A-AEx11A的构建方法。所构建成的毕赤酵母共表达系统可用于的β-甘露聚糖酶和β-1，4-木聚糖酶的工业化生产。所制备的两种酶具有底物亲和力强、催化效率高的特性，具有较大的工业化生产潜力和经济价值。
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公开(公告)号：CN102559526A
公开(公告)日：2012-07-11
申请号：CN201110410598.8
申请日：2011-12-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种新型的共表达源自黑曲霉(Aspergillus niger)LW-1的β-甘露聚糖酶基因和源自宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001的β-1，4-木聚糖酶基因的工程菌GS115/man5A-xyn II的构建方法。所构建成的毕赤酵母共表达系统可用于的β-甘露聚糖酶和β-1，4-木聚糖酶的工业化生产。所制备的两种酶具有底物亲和力强、催化效率高的特性，具有较大的工业化生产潜力和经济价值。
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公开(公告)号：CN102492677A
公开(公告)日：2012-06-13
申请号：CN201110410568.7
申请日：2011-12-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种新型羧肽酶及其基因序列，新型羧肽酶工程菌的构建，以其重组羧肽酶的高效表达和纯化方法，经生物信息学分析确定该酶属于蛋白水解酶S1家族，特命名为Aus CpA，相应的基因序列命名为Aus cpA。Aus CpA具有较好的活性和稳定性，有较大工业化生产的潜力和经济价值，也为其他羧肽酶的研究奠定了理论基础。
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公开(公告)号：CN102392036A
公开(公告)日：2012-03-28
申请号：CN201110410517.4
申请日：2011-12-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提出了一种源自绿色木霉(Trichoderma viride)WL 0422的新型β-甘露聚糖酶基因序列的克隆方法，其核苷酸序列为SEQ ID NO：1。生物信息学分析表明该β-甘露聚糖酶属于糖苷水解酶第5家族，命名为Tvi Man5A，其氨基酸序列为SEQ ID NO：2，相应的基因命名为Tvi man5A。本发明还公开了β-甘露聚糖酶工程菌的构建以及重组β-甘露聚糖酶的高效表达和纯化的方法，制备的重组β-甘露聚糖酶的最适作用温度和pH分别为70℃和3.5，在pH3.0-7.0、60℃以下稳定，具有较大的工业化生产潜力和经济价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102392033A
公开(公告)日：2012-03-28
申请号：CN201110410412.9
申请日：2011-12-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提出了一种源自米曲霉(Aspergillus oryzae)CICC 40186菌株的新型木聚糖酶基因序列的克隆方法，其核苷酸序列为SEQ ID NO：1。生物信息学分析表明该木聚糖酶属于糖苷水解酶第11家族，命名为Aor Xyn11A，其氨基酸序列为SEQ ID NO：2，相应的基因命名为Aor xyn11A。本发明还公开了Aor Xyn11A工程菌的构建以及重组Aor Xyn11A的高效表达和纯化的方法，制备的重组Aor Xyn11A的最适作用温度和pH分别为50℃和5.5，在pH 4.5-7.5、40℃以下稳定，具有较大的工业化生产潜力和经济价值。
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公开(公告)号：CN102154343A
公开(公告)日：2011-08-17
申请号：CN201010550927.4
申请日：2010-11-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提出了一种源自宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001的新型β-甘露聚糖酶基因完整mRNA和DNA序列的克隆方法，其核苷酸序列分别为SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2。生物信息学分析表明该β-甘露聚糖酶属于糖苷水解酶第5家族，命名为Aus Man5A，其氨基酸序列为SEQ ID NO：3，相应的基因命名为Aus man5A。本发明还公开了β-甘露聚糖酶工程菌的构建以及重组β-甘露聚糖酶的高效表达和纯化的方法，制备的重组β-甘露聚糖酶的最适作用温度和pH分别为75℃和3.5，在pH 3.0-7.0、70℃以下稳定，具有较大的工业化生产潜力和经济价值。
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公开(公告)号：CN102154250A
公开(公告)日：2011-08-17
申请号：CN201010602803.6
申请日：2010-12-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种利用宇佐美曲霉生产羧肽酶的方法，属于生物工程技术领域。本发明采用麸皮、豆饼粉和玉米粉等农副产品为发酵基料，通过适当改变培养基中碳源和氮源的比例，粗酶提取时间，利用宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001固态发酵生产羧肽酶。本发明提供了实验室小试生产的固态发酵培养基配方和培养条件，成熟发酵曲料的羧肽酶活性达到3452.4～5321.6U/g麸皮。本发明具有设备简单、投入少、见效快、生产成本低廉、对环境友好以及羧肽酶活性较高等特点，有利于羧肽酶的开发和利用，具有较高的经济和实用价值。
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公开(公告)号：CN102140502A
公开(公告)日：2011-08-03
申请号：CN201010550886.9
申请日：2010-11-19
Applicant: 江南大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明是一种利用限制性内切酶酶切、发卡结构连接和巢式PCR扩增等技术，基于已知DNA序列测定其3′端侧翼未知DNA序列的方法。该方法通过合成一条易形成发卡结构的寡聚核苷酸序列；选用单一限制性内切酶酶切基因组DNA，纯化后与发卡结构连接；利用引物设计软件选定发卡结构序列上的互补序列作为3′端引物、两条靠近未知序列端的已知DNA序列上的特异性序列作为5′端引物；以发卡结构连接物为模板，用设计的引物进行巢式PCR扩增以获取已知DNA序列3′端侧翼的未知序列。本发明具有操作简便、应用范围广、操作限制少、引物特异性强、结果验证简捷、未知序列长度不限和成本低廉等特点。
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公开(公告)号：CN102127555A
公开(公告)日：2011-07-20
申请号：CN201010581299.6
申请日：2010-12-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提出了一种源自宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001的β-1，4-内切葡聚糖酶基因完整mRNA和DNA序列的克隆方法，其核苷酸序列分别为SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2。生物信息学分析表明该β-内切葡聚糖酶属于糖苷水解酶第12家族，命名为Aus Cel12A，其氨基酸序列为SEQ ID NO：3，相应的基因命名为Aus cel12A。本发明还公开了Aus Cel12A工程菌的构建以及重组Aus Cel12A的高效表达和纯化的方法。制备的重组Aus Cel12A的最适作用温度和pH分别为60℃和5.0，在pH 4.0-7.0、60℃以下稳定，具有较大的工业化生产潜力和经济价值，也为其它β-内切葡聚糖酶的研究奠定了理论基础。
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