公开(公告)号：CN103013951B

公开(公告)日：2014-03-26

申请号：CN201210577803.4

申请日：2012-12-27

Applicant: 江南大学

Inventor： 夏小乐 ,  辛瑜 ,  陈金花 ,  张玲 ,  王武

IPC: C12N9/20

Abstract: 一种提取纯化小麦胚芽脂肪酶的方法，属于生物工程技术领域。本发明包括以下步骤：（1）高效提取粗酶：确定从麦胚中提取粗酶的最佳方法；（2）硫酸铵沉淀和浓缩：将提取的粗酶液通过硫酸胺沉淀，并选用超滤膜对酶的盐析液进行浓缩，获得超滤液；（3）离子交换层析：采用离子交换层析纯化超滤液中的脂肪酶，得到较纯的小麦胚芽脂肪酶；（4）制备小麦胚芽脂肪酶的亲和介质；（5）吸附和洗脱：得到纯酶，纯度达到95%。本发明所提供的小麦胚芽脂肪酶高效提取方法，回收率高，纯度高。

公开(公告)号：CN103361335A

公开(公告)日：2013-10-23

申请号：CN201310301117.9

申请日：2013-07-18

Applicant: 江南大学

Inventor： 杨海麟 ,  辛瑜 ,  仝艳军 ,  王武 ,  张玲

IPC: C12N11/08

Abstract: 一种提高肌氨酸氧化酶稳定性的方法，属于酶工程领域。肌氨酸氧化酶简称SOX，本发明以多聚赖氨酸poly-lysine为氨基载体，选用1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC)为交联剂，对肌氨酸氧化酶进行固定化处理，固定化SOX酶在热稳定性、pH稳定性和存储稳定性方面均优于游离SOX酶，本发明易操作、成本低、环境污染小、适于大规模应用。

公开(公告)号：CN103055825A

公开(公告)日：2013-04-24

申请号：CN201310022527.X

申请日：2013-01-21

Applicant: 江南大学

Inventor： 杨海麟 ,  辛瑜 ,  仝艳军 ,  王武 ,  张玲

IPC: B01J20/26 ,  B01D15/38 ,  C12N9/06 ,  C08B37/08

Abstract: 肌氨酸氧化酶亲和介质及其合成和纯化肌氨酸氧化酶的方法，属于生物工程技术领域。本发明所述一种肌氨酸氧化酶亲和介质，由肌氨酸氧化酶亲和配体和层析介质连接而成，较佳地，肌氨酸氧化酶亲和配体是底物类似物4-氨基吡咯-2-羧酸，所述层析介质是Sepharose或聚壳聚糖，还提供了上述肌氨酸氧化酶亲和介质的合成方法，以及利用上述的肌氨酸氧化酶亲和介质大规模纯化肌氨酸氧化酶的方法。利用本发明的肌氨酸氧化酶亲和介质可以大规模快速分离纯化肌氨酸氧化酶，可在仅用一步亲和层析的情况下，得到肌氨酸氧化酶纯品，整个纯化步骤消耗时间短，蛋白和活性回收率较高，适于大规模推广应用。

公开(公告)号：CN102380347A

公开(公告)日：2012-03-21

申请号：CN201010273489.1

申请日：2010-09-06

Applicant: 江南大学

Inventor： 辛瑜 ,  杨海麟 ,  张玲 ,  夏小乐 ,  张玉然 ,  仝艳军 ,  王武

IPC: B01J20/24 ,  B01J20/30 ,  C12N9/04

Abstract: 本发明涉及一种胆固醇氧化酶亲和介质，由胆固醇氧化酶亲和配体和层析介质连接而成，较佳地，胆固醇氧化酶亲和配体是FAD片段核黄素，所述层析介质是Sepharose、壳聚糖或聚苯乙烯，还提供了上述胆固醇氧化酶亲和介质的合成方法，以及利用上述的胆固醇氧化酶亲和介质大规模纯化胆固醇氧化酶的方法，利用本发明的胆固醇氧化酶亲和介质可以大规模快速分离纯化胆固醇氧化酶，可在仅用一步亲和层析的情况下，得到胆固醇氧化酶纯品，整个纯化步骤消耗时间段，蛋白和活性回收率较高，适于大规模推广应用。

公开(公告)号：CN102145941A

公开(公告)日：2011-08-10

申请号：CN201010108274.4

申请日：2010-02-09

Applicant: 江南大学

Inventor： 辛瑜 ,  杨海麟 ,  夏小乐 ,  王武 ,  张玲

IPC: C02F3/34

Abstract: 本发明涉及一种利用小球藻培养降低太湖水富营养的方法，小球藻是小球藻Chlorella sp菌株，较佳地，太湖水预先进行沉降和过滤处理，培养小球藻时通入二氧化碳气体和空气的混合气体，其中二氧化碳气体占4～6％，混合气体的通气量为40～60ml/min，培养时间为10～12小时，培养小球藻时加入占培养液体积0.4％以上的维生素母液，小球藻的接种液的菌体浓度为1.5×107个/mL，接种量为培养液体积的10～20％，小球藻的培养温度为室温，初始pH为5～7，光照为普通温室大棚内日光，采用本发明的方法，可在降低水体氮磷含量的同时，制造可作为生产生物柴油基础材料的生物油脂，达到保护环境和生产生物资源的双重效果，具有较大的社会价值和经济价值，适于大规模推广应用。

公开(公告)号：CN101386817A

公开(公告)日：2009-03-18

申请号：CN200810195378.6

申请日：2008-10-31

Applicant: 江南大学

Inventor： 杨海麟 ,  李克朗 ,  王武 ,  张玲

IPC: C12N1/00 ,  C12R1/865

Abstract: 一种利用蓝藻发酵生产酵母单细胞蛋白的方法，属于蓝藻治理技术领域。本发明采用酿酒酵母为发酵菌株，以蓝藻原料为氮源，发酵生产酵母单细胞蛋白，考察了碳源、维生素、微量元素、矿物质元素、培养温度、接种量、初始pH、溶解氧等对酵母产量的影响，优化了发酵条件，使得1％(干重)的蓝藻培养基最终可使酵母产量达到6.2g/L。本发明提供了一种具有工业应用潜力的利用太湖蓝藻的新方法。

公开(公告)号：CN110004121B

公开(公告)日：2020-12-15

申请号：CN201910266761.4

申请日：2019-04-03

Applicant: 江南大学

Inventor： 张玲 ,  王武 ,  武迪 ,  杨海麟 ,  辛瑜

IPC: C12N9/04 ,  C12N15/53 ,  C12P33/02 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种胆固醇氧化酶及其应用，属于酶工程技术领域。本发明首先构建得到胆固醇氧化酶的基因工程菌E.coli BL21(DE3)‑pET20b(+)‑COD，其发酵所得的粗酶液中胆固醇氧化酶酶活高达700U·L‑1，纯化得到的胆固醇氧化酶比酶活为18.5U·mg‑1，其分子量约60,000kDa，该胆固醇氧化酶具有良好的温度耐受性和有机溶剂耐受性。利用工程菌发酵液制备胆甾‑4‑烯‑3‑酮和胆甾‑4‑烯‑3,6‑二酮，在有机相为甲苯的两相转化体系中，以胆固醇为底物制备胆甾‑4‑烯‑3‑酮的转化率为30％；制备胆甾‑4‑烯‑3,6‑二酮的转化率为45％。

公开(公告)号：CN111471737A

公开(公告)日：2020-07-31

申请号：CN202010337974.4

申请日：2020-04-26

Applicant: 江南大学

Inventor： 张玲 ,  王武 ,  杨海麟 ,  武迪

IPC: C12P33/02 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了伯克霍尔德菌转化制备甾醇衍生物的方法及应用，属于甾醇微生物转化技术领域。在向含有环糊精或其衍生物的反应体系中添加伯克霍尔德菌，能够使得产物转化得率由对照的0.1％～0.3％提高为12％～15％；且该方法在制备过程中无需添加有机溶剂，更加环保、经济、安全。

公开(公告)号：CN105543189B

公开(公告)日：2020-02-07

申请号：CN201610021070.4

申请日：2016-01-13

Applicant: 江南大学

Inventor： 杨海麟 ,  张玲 ,  王武 ,  辛瑜 ,  张亚慧

IPC: C12N9/18 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21

Abstract: 本发明公开了一种表达微生物胆固醇酯酶的基因工程菌及其构建方法，属于酶工程技术领域。本发明方法是将Burkholderia cepacia.源的胆固醇酯酶和胆固醇酯酶分子伴侣基因进行串联共表达，其中胆固醇酯酶基因和分子伴侣基因之间通过SD序列连接。本发明成功地表达了Burkholderia cepacia.源的胆固醇酯酶，并实现了Burkholderia cepacia.源的胆固醇酯酶的活性表达、高效表达。本发明构建的基因工程菌发酵的粗酶液中胆固醇酯酶酶活可达640U/L。

公开(公告)号：CN109813881A

公开(公告)日：2019-05-28

申请号：CN201910117379.7

申请日：2019-02-15

Applicant: 无锡市妇幼保健院 ,  江南大学 ,  江苏龙维生物科技有限公司

Inventor： 臧嘉 ,  许耀辉 ,  王晶 ,  陈妮娜 ,  贾梦玥 ,  张玲 ,  杨海麟

IPC: G01N33/53 ,  G01N33/543 ,  G01N33/577 ,  G01N33/533

Abstract: 本发明涉及一种抗缪勒氏管激素(AMH)检测试剂，该检测试剂包括抗缪勒氏管激素抗体、麦胚凝集素和固相载体，将抗缪勒氏管激素抗体或麦胚凝集素二者之一包被在所述的固相载体上，另外一个则采用标记物进行标记。其主要特点是采用抗AMH抗体与麦胚凝集素(WGA)形成夹心法的检测试剂，该检测试剂检测灵敏度高，特异性强，适于大规模推广。