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公开(公告)号：CN103667106B
公开(公告)日：2015-10-28
申请号：CN201310470098.2
申请日：2013-10-10
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N1/20 , C12P21/02 , C07K7/06 , C07K14/335 , C07K1/36 , C07K1/30 , C07K1/20 , C07K1/16 , A23L3/3526 , A61K38/08 , A61K38/16 , A61P31/00 , C12R1/25
Abstract: 本发明公开了一种植物乳杆菌、其细菌素以及培养与分离纯化方法，其中植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）163菌种保藏号为CGMCC NO.8224。该植物乳杆菌在MRS液体培养基或者白菜番茄培养基中进行培养，可以发酵产生细菌素，其中所产生的细菌素为由两种氨基酸序列构成一级结构的两种新型细菌素，细菌素通过四次分离纯化以及鉴定得到。经过测定，该细菌素具有较广的抑菌谱以及较好的热稳定性和pH稳定性，可以广泛应用于食品及医药领域中。
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公开(公告)号：CN104450940A
公开(公告)日：2015-03-25
申请号：CN201410833123.3
申请日：2014-12-29
Applicant: 南京农业大学
CPC classification number: C12Q1/689 , C12Q1/6844
Abstract: 本发明公开了一种用于检测单核细胞增生李斯特氏菌的核苷酸序列及检测方法与检测试剂盒，其中核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，检测方法为首先提取待测样品的基因组DNA；然后以该基因组DNA为模板，与特异性引物Lm16、PCR缓冲液、MgCl2溶液、脱氧三磷酸核苷混合物和Taq-DNA聚合酶混合配置PCR反应体系，进行PCR反应；最后检测PCR产物是否为大小为1623bp的单一扩增产物。试剂盒包括特异性引物、PCR缓冲液、MgCl2溶液、脱氧三磷酸核苷混合物和Taq-DNA聚合酶。本发明提供的试剂盒能够有效地检测出食品中的单核细胞增生李斯特菌氏菌，且细菌的检测灵敏度高，特异性好，抗干扰能力强。
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公开(公告)号：CN103478509A
公开(公告)日：2014-01-01
申请号：CN201310505342.4
申请日：2013-10-24
Applicant: 南京农业大学 , 无锡健宏生物科技有限公司 , 无锡恒泽元生物科技有限公司
Abstract: 本发明涉及一种解淀粉芽孢杆菌抗菌脂肽的生产方法及其在对虾饲料中的应用，属于农业领域中的水产养殖技术领域和生物技术领域。以保藏号为CGMCC No.6249的解淀粉芽孢杆菌fmb-50为菌种，依次通过种子培养、扩大培养和发酵生产获得发酵液；发酵液经微滤去除菌体或经膜过滤和纳滤，加入玉米淀粉或多孔淀粉吸附、喷雾干燥得所述的抗菌物质饲料添加剂抗菌效价为40000～50000IU或250000IU/g。本发明利用解淀粉芽孢杆菌fmb-50为原料发酵生产抗菌物质，可大规模工业化生产，生产周期短，生产成本大大降低，用于对虾饲料中，可以降低死亡率,提高对虾的饲料利用率、促进对虾非专一性免疫反应和提高能量代谢水平。
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公开(公告)号：CN102174558B
公开(公告)日：2013-04-10
申请号：CN201110071211.0
申请日：2011-03-24
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及通过敲除abrB基因提高枯草杆菌抗菌肽产量的方法，属于生物技术领域。本方法首先以枯草芽孢杆菌ATCC9943为出发菌株，以大肠杆菌克隆载体pGEM-T为骨架构建一个基因敲除载体pAbrB-Cm，利用同源重组原理，通过双交换过程敲除枯草芽孢杆菌ATCC9943基因组abrB基因的方法构建了一个高产抗菌肽菌株FMB29。经过高效液相色谱分析，确定改良菌株产surfactin和fengycin的能力大大提高，并通过质谱鉴定了改良菌体FMB29发酵产物中surfactin和fengycin的存在。
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公开(公告)号：CN103013873A
公开(公告)日：2013-04-03
申请号：CN201210527691.1
申请日：2012-12-10
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于微生物技术领域，涉及一株产热稳定性β-葡聚糖酶的菌株及其应用。一株产热稳定性β-葡聚糖酶的菌株高地芽孢杆菌（Bacillus altintudins）YC-9，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），保藏号为CGMCC No.6075，保藏日期为2012年5月3日。本发明首次提供了一株来源于温泉的能够产生β-1,3-1,4-葡聚糖酶的新菌株，并克隆得到了其酶基因。由于该酶具有较高的热稳定性，故能够为构建耐热及高产的基因工程菌株奠定基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102168053A
公开(公告)日：2011-08-31
申请号：CN201110036987.9
申请日：2011-02-13
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于微生物发酵和生物分离领域，公开了一株联产LI-F类抗生素和邻苯二甲酸二丁酯的多粘类芽孢杆菌菌株及其应用。该菌株为多粘类芽孢杆菌(Paenibacilluspolymyxa)JSa-9，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏号为CGMCC No.4314。该菌株能联产LI-F类抗生素和邻苯二甲酸二丁酯，可用于制备抗生素，可开发成为新型的天然食品防腐剂及生防试剂，广泛应用于水果和蔬菜等食品加工和防腐保鲜，对于延长食品保质期和减少农作物病虫害等具有十分重要的价值。
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公开(公告)号：CN101948767A
公开(公告)日：2011-01-19
申请号：CN201010256208.1
申请日：2010-08-18
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明阐述了一种产γ-氨基丁酸乳酸菌的筛选方法，属于生物技术领域。取经分离纯化的乳酸菌，接种于MRS培养基中，待菌体生长达到稳定期时，离心收集菌体，采用全细胞催化，以L-谷氨酸或L-谷氨酸钠为唯一底物，以醋酸-醋酸钠为缓冲体系，在pH3.2～8.0，20～80℃下进行搅拌反应1～24h，利用产GAD乳酸菌含有的谷氨酸脱羧酶使L-谷氨酸或L-谷氨酸钠发生脱羧作用生成γ-氨基丁酸，然后通过纸层析分析反应体系中是否含有γ-氨基丁酸来筛选产γ-氨基丁酸的乳酸菌，并通过形态学特征、生理生化特征和16S rDNA序列分析对所产γ-氨基丁酸的菌株进行鉴定。本发明的方法可以大大提高功能性益生菌的定向筛选效率。
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公开(公告)号：CN101475944B
公开(公告)日：2010-12-08
申请号：CN200810243721.X
申请日：2008-12-12
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了本发明涉及一种提高淀粉液化芽孢杆菌fengycin产量的启动子置换方法，属于生物技术领域。是通过PCR方法从淀粉液化芽孢杆菌ES-2菌株基因组中扩增得到450bp的同源序列，从质粒pHB201上扩增启动子P59序列，将上述两个DNA片段连接到一起，并克隆到质粒pMD19-T上，并连接上新霉素抗性基因做为筛选标记，从而构建了一个同源整合载体。将构建好的同源整合载体转化到野生淀粉液化芽孢杆菌ES-2中，启动子置换菌株的fengycin产量为5704.77±258.89mg/L，比野生菌的fengycin产量提高了约0.65倍。
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公开(公告)号：CN101475944A
公开(公告)日：2009-07-08
申请号：CN200810243721.X
申请日：2008-12-12
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种提高淀粉液化芽孢杆菌fengycin产量的启动子置换方法，属于生物技术领域。是通过PCR方法从淀粉液化芽孢杆菌ES－2菌株基因组中扩增得到450bp的同源序列，从质粒pHB201上扩增启动子P59序列，将上述两个DNA片段连接到一起，并克隆到质粒pMD19－T上，并连接上新霉素抗性基因做为筛选标记，从而构建了一个同源整合载体。将构建好的同源整合载体转化到野生淀粉液化芽孢杆菌ES－2中，启动子置换菌株的fengycin产量为5704.77±258.89mg/L，比野生菌的fengycin产量提高了约0.65倍。
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公开(公告)号：CN101402959A
公开(公告)日：2009-04-08
申请号：CN200810235133.1
申请日：2008-11-14
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种提高枯草芽孢杆菌surfactin产量的启动子置换方法，属于生物技术领域。采用DNA同源整合技术使启动子Pspac置换枯草芽孢杆菌fmbR surfactin合成酶基因本身的启动子。通过PCR方法从fmbR菌株基因组中扩增得到1081bp的同源序列，连接到质粒pMUTIN4的HindIII和BamH I酶切位点上，并将构建好的载体转化到野生枯草芽孢杆菌fmbR中，经过抗生素培养基筛选并通过分子生物学方法鉴定获得。本发明方法可以直接从遗传上改良抗菌肽生产菌株，在工业上具潜在的应用价值。菌株surfactin产量提高约4.85倍，在IPTG诱导下，surfactin产量约提高10倍。
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