一株恶臭假单胞菌突变菌株及其在6-羟基烟酸生物制备中的应用

    公开(公告)号:CN112877264A

    公开(公告)日:2021-06-01

    申请号:CN202110398624.3

    申请日:2021-04-12

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一株恶臭假单胞菌突变菌株及其在6‑羟基烟酸生物制备中的应用。本发明的恶臭假单胞菌突变菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏日期:2021年3月8日,保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,保藏号为CGMCC No.21876。本发明的突变株Pseudomonas putida S14 mut‑5,活性为2.68U·mL‑1,是野生型的2.4倍。该菌株底物耐受性明显提高,与腈水解酶联合应用,可以转化3‑氰基吡啶累积获得6‑羟基烟酸54.5g·L‑1,其最适pH为6.0,相较于大多数偏好中性及碱性的烟酸脱氢酶,更适应工业生产条件,在工业应用上具有广阔的开发前景。

    一种精准调控谷氨酸棒杆菌基因表达的方法

    公开(公告)号:CN109486845B

    公开(公告)日:2021-03-30

    申请号:CN201811549261.3

    申请日:2018-12-18

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种精准调控谷氨酸棒杆菌基因表达的方法,属于合成生物技术领域。本发明标准化的最简启动子与RBS文库,使针对目标基因表达量的调控的改造工作大幅缩短,省去了内源启动子或RBS的筛选和强度表征环节,平均一个目标基因的改造周期可以由之前的30‑40天缩短为10天以内。所述调控方法的强度跨度较单一元件高一百倍以上,由此可实现对代谢途径的大幅度调控及生物系统的功能优化。较以往的粗线条的上调或下调基因表达量的方法,本发明中的利用标准元件组合调控的方法可以更加精准、定量的调控目的基因。使代谢途径得到进行更加精准的调控,尤其是分支点处的流量调节,可提高目标产物产量,同时防止某些基因过度表达给细胞带来的代谢负担。

    一种富含产己酸菌营养液及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN112011419A

    公开(公告)日:2020-12-01

    申请号:CN202010817031.1

    申请日:2020-08-14

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种富含产己酸菌营养液及其制备方法和应用,通过先活化后富集的两段式发酵,实现了在短时间内制备富含己酸菌和高产己酸的多菌种复合菌液,为改善白酒品质提供了一种新策略。将上述富含产己酸菌液用于人工窖泥老熟,可以减少老窖泥的使用量或代替老窖泥,实现新窖泥中产己酸菌在短期内大量富集,同时丰富其它有益菌(如梭菌)的组成,说明该方法能够保持窖泥群落中功能菌群的物种和代谢途径的多样性,增加这一人工富集群落在实际应用中的群落结构的稳定性。将上述富含产己酸菌液用于白酒酿造,可以提高白酒中酸类和酯类物质含量,尤其是己酸和己酸乙酯,显著改善白酒的风味品质,特别是有助于提高新窖池的优级酒产率。

    一种基于loop区域改造的褐藻胶裂解酶突变体及其应用

    公开(公告)号:CN111269907A

    公开(公告)日:2020-06-12

    申请号:CN202010260033.5

    申请日:2020-04-03

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于loop区域改造的褐藻胶裂解酶突变体及其应用,属于基因工程技术领域。本发明基于褐藻胶裂解酶的结构推测,采用结构序列分析方法,确定对催化域附近的loop区域进行改造,并通过定点突变和组合突变进行改造,得到对PolyG片段具有较高的降解能力的突变体;将亲本褐藻胶裂解酶氨基酸序列中位于催化域附近的loop区205位、210位突变为酪氨酸,将褐藻胶裂解酶对底物的偏好性由M转变为G,酶活6100U/mL,稳定性得以提高。

    一种重组褐藻胶裂解酶及其构建方法及应用

    公开(公告)号:CN108285900B

    公开(公告)日:2020-06-09

    申请号:CN201810325487.9

    申请日:2018-04-12

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种重组褐藻胶裂解酶及其构建方法及应用,属于生物技术领域。本发明所涉及的褐藻胶裂解酶Aly‑Cob来源于环境样品(海带堆放处与工厂生产废料的混合物),本发明利用基因工程的技术方法,将该褐藻胶裂解酶的基因克隆到表达载体上,获得可异源表达褐藻胶裂解酶的重组菌株,该菌株发酵产生的褐藻胶裂解酶Aly‑Cob,具有降解海藻酸钠制备褐藻寡糖的功能。本发明提供的褐藻胶裂解酶Aly‑Cob可广泛应用于农业、食品、饲料添加、医药及海藻加工等领域。

    一种腈水解酶重组表达菌株的构建及其高密度发酵方法

    公开(公告)号:CN107267433B

    公开(公告)日:2020-05-22

    申请号:CN201710580770.1

    申请日:2017-07-17

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明涉及一种腈水解酶组成型表达体系的构建及其在烟酸合成中的应用,属于工业生物技术领域。所述的腈水解酶组成型表达载体是通过在pET‑3b质粒导入恶臭假单胞菌Pseudomonas putida腈水解酶基因编码序列构建而成,得到重组质粒pET‑3b‑NIT,转化至E.coli BL21(DE3)中得到无需进行体外诱导的组成型重组腈水解酶表达菌株,命名为大肠埃希氏菌Escherichia coli NIT‑1,现保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心,保藏编号为CGMCC No.14254。进一步采用pH‑stat补料策略进行精确调控以提升菌体密度和腈水解酶产量,并以大肠埃希氏菌游离细胞为催化剂,以3‑氰基吡啶为底物,通过批次投料的方式进行连续转化生产烟酸。本发明提供了一种新的无需体外诱导的组成型重组腈水解酶产生菌,该重组菌可高效表达腈水解酶,生产成本低,周期短,发酵过程无需添加诱导剂,最终获得的菌体密度大,可有效催化3‑氰基吡啶生产烟酸,具有广阔的应用前景。

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