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公开(公告)号：CN112760320A
公开(公告)日：2021-05-07
申请号：CN202011394290.4
申请日：2020-12-02
Applicant: 扬州大学
Inventor： 金文杰 , 朱亭帆 , 钱金涵 , 沈子君 , 秦爱建 , 邵红霞 , 钱琨 , 叶建强 , 刘金彪 , 王倩倩 , 王建 , 王姣 , 柴文娴 , 周小兵 , 邓建中 , 郑建高
IPC: C12N15/113 , C12N5/10 , A61K31/713 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于基因工程和生物制品研究领域，具体涉及有效抑制猪流行性腹泻病毒(PEDV)复制的外源性人工miRNA，所述外源性人工miRNA是下述1)或2)的双链核苷酸：1)正义链和反义链的序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示；2)正义链和反义链的序列分别如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。与针对PEDV蛋白编码基因的siRNA相比，本发明筛选的针对病毒N基因保守序列的人工miRNA能抑制PEDV复制，不仅可作为抗PEDV的新型生物制剂进行开发，而且可用于抗病猪品系培育。
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公开(公告)号：CN109295010B
公开(公告)日：2021-04-02
申请号：CN201811178904.8
申请日：2018-10-10
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种利用鸡肝细胞进行坦布苏病毒高效扩增的方法，包括以下步骤：（1）细胞培养：将鸡肝细胞用含体积浓度为10%胎牛血清的DMEM‑F12培养基进行培养，待细胞长满单层后，用PBS洗涤一遍后，以质量浓度为0.25%的胰酶进行消化、传代至细胞培养板中；（2）鸡肝细胞高效扩增坦布苏病毒：将鸡肝细胞接种至细胞培养板内培养，在汇合度为60%到70%时，将坦布苏病毒AHRD2018株接种鸡肝细胞，MOI为0.01，以2ml含体积浓度为2%胎牛血清的培养基培养4天，定时收集200μl上清冻存于‑80℃冰箱备用，同时每孔补200μl含体积浓度为2%胎牛血清的培养基。本发明利用鸡肝细胞可以更早产生高滴度病毒的特性，利用病毒复制速率显著高于DF‑1细胞和BHK‑21细胞的鸡肝细胞来扩增坦布苏病毒。
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公开(公告)号：CN107603957B
公开(公告)日：2020-12-29
申请号：CN201710935163.2
申请日：2017-10-10
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种高效扩增J亚群禽白血病病毒的方法，本发明采用鸡肝细胞可高效扩增J亚群禽白血病病毒，利用鸡肝细胞可以更早产生高滴度病毒的特性，缩短J亚群禽白血病病毒分离检测时间，实现提早检测到病原，提高J亚群禽白血病病毒检测方法的敏感度。在J亚群禽白血病病毒感染MOI为0.001时，ELISA检测感染维持培养3天的鸡肝细胞的效果与感染维持培养7天的DF‑1细胞相当。本发明建立发高效扩增方法的将加快J亚群禽白血病病毒的净化进程，节约时间、成本，本发明在J亚群禽白血病病毒净化检测中具有很好的应用价值。
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公开(公告)号：CN110615839A
公开(公告)日：2019-12-27
申请号：CN201910987165.5
申请日：2019-10-17
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于生物医学技术领域，具体涉及一种鸡源化抗禽流感神经氨酸酶单克隆抗体及其制备方法和应用。通过PCR方法小鼠特异性的Fab与鸡Fc片段拼接并克隆入哺乳动物表达载体中，获得表达重组重链的质粒。两质粒共转染哺乳动物细胞，即可获得分泌表达的鸡源化抗禽流感神经氨酸酶单克隆抗体。本发明可广泛用于抗病毒、细菌单克隆抗体的鸡源化表达，获得的鸡源化抗禽流感神经氨酸酶单克隆抗体既能够保持Fab识别、中和抗原的能力，又具备在体内呈递抗原的潜力。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110551696A
公开(公告)日：2019-12-10
申请号：CN201910845704.1
申请日：2019-09-06
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N7/04 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一株禽传染性支气管炎病毒（IBV）的天然弱毒株（CK/CH/2014/QL1403）。该IBV毒株不引起SPF鸡发病，基因分析属于一个新型IBV分支，该IBV分离株CK/CH/2014/QL1403可以用鸡胚增殖传代，鸡胚尿囊液繁殖的IBV稀释后免疫鸡，可以提供免疫鸡抵抗禽传染性支气管炎病毒强毒的攻击，可以用作疫苗研究。
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公开(公告)号：CN109627296A
公开(公告)日：2019-04-16
申请号：CN201811588180.4
申请日：2018-12-25
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/15 , C07K16/10 , G01N33/68 , G01N33/569
Abstract: 本发明所涉及的是禽网状内皮组织增殖症病毒特异性多肽抗原及其应用，其氨基酸序列为SEQ ID No.5，由病毒的囊膜蛋白gp90基因编码，并具有强的反应原性，该抗原表位具有很好的抗体反应性，可以用来特异性检测REV的抗体，具有临床检测的应用价值。用该多肽抗原免疫动物，可以制备特异性抗REV的抗体。
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公开(公告)号：CN108929919A
公开(公告)日：2018-12-04
申请号：CN201810983323.5
申请日：2018-08-27
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于生物技术领域，本发明公开了鸡Ⅱ型星状病毒环介导等温扩增检测引物组，根据鸡Ⅱ型星状病毒基因组保守序列设计引物：外引物F3和B3，序列见SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2；内引物FIP和BIP，序列见SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4。本发明还公开了鸡Ⅱ型星状病毒检测试剂盒，包括上述引物组。本发明又公开了鸡Ⅱ型星状病毒环介导等温扩增检测方法：根据所设计的引物建立一种检测鸡Ⅱ型星状病毒的环介导等温扩增方法。本发明的检测方法具有快速、高效、特异性强、准确性好、灵敏度高、无需昂贵仪器设备，便于基层现场使用，方便快速。
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公开(公告)号：CN108929881A
公开(公告)日：2018-12-04
申请号：CN201810886338.X
申请日：2018-08-06
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种缺失穿膜区的禽白血病病毒gp37蛋白的表达载体及其构建方法和蛋白表达方法，属于病毒蛋白表达技术领域。本发明提供的缺失穿膜区的禽白血病病毒gp37蛋白的表达载体，包括载体pGEX-6p-1和接入所述载体的gp37del基因，所述gp37del基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供的缺失穿膜区的禽白血病病毒gp37蛋白的表达载体能够实现gp37del蛋白的表达，并能够成功制备抗禽白血病病毒gp37蛋白多克隆抗体。
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公开(公告)号：CN105973854B
公开(公告)日：2018-10-23
申请号：CN201610327763.6
申请日：2016-05-17
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于生物技术检测领域，具体涉及一种基于F2蛋白的检测4型禽腺病毒抗体的间接免疫荧光试剂盒。该试剂盒包括表达F2蛋白的293T细胞，FITC标记的羊抗鸡抗体，样品稀释液和洗涤液。本发明试剂盒具有良好的特异性。该试剂盒不仅能用于血清4型禽腺病毒感染状况流行病学调查，而且能有效用于监测免疫鸡群血清4型禽腺病毒抗体水平，用于评价免疫保护性抗体水平等。
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