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公开(公告)号:CN106957846A
公开(公告)日:2017-07-18
申请号:CN201710341094.2
申请日:2017-05-16
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N15/113 , A61K31/713 , A61P31/20
CPC classification number: C12N15/113 , C12N2310/14 , C12N2320/30
Abstract: 本发明提供了有效抑制猪瘟病毒复制和增殖的siRNA及用途,涉及抑制猪瘟病毒复制及增殖的2条siRNA及其序列,其可以用于针对猪瘟病毒的生物制剂的研发,同时可以结合基因编辑技术来制备和培育出携带有抗病基因的转基因动物,减少猪瘟病毒给养猪业造成的经济损失。
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公开(公告)号:CN105087563A
公开(公告)日:2015-11-25
申请号:CN201510503913.X
申请日:2015-08-17
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,特别涉及一种动物转基因标签的可视化检测方法。本发明设计、筛选出转基因猪标记基因(Neo)LAMP特异性引物,并优化LAMP反应体系中Mg2+、Betaine、dNTPs、Bst DNA polymerase的浓度以及外引物内引物浓度比,确定了LAMP反应的最适反应条件。建立了可视化LAMP检测方法,可在65℃恒温条件下对不同浓度的转基因猪基因组进行检测,LAMP法检测的灵敏度为2pg/μl,而PCR法仅能检测至2ng/μl。LAMP法检测转基因猪样本准确性达98%。
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公开(公告)号:CN101892257A
公开(公告)日:2010-11-24
申请号:CN201010185086.1
申请日:2010-05-28
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N15/63
Abstract: 本发明涉及一种表达猪源Cre重组酶载体pCEP4-Cre的构建,其特征在于:首先采用基因工程的方法构建pCEP4-Cre质粒,并用载体pCEP4-Cre与载体pEF-stop-eGFP共转染进入细胞,在表达Cre重组酶的情况下,将转入到细胞中的载体pEF-stop-eGFP中的Loxp卯定的终止子删除,使后接的报告基因eGFP得以表达,从而用于剪切条件性表达绿色荧光蛋白载体中的LoxP元件;其应用基因工程技术构建了一个表达Cre重组酶的质粒,并且重组质粒pCEP4-Cre可以在药物压力下独立于细胞染色体外存在,并在撤去药物压力后以每代10%的速率丢失;可有效的防止细胞基因组因插入外源基因而导致的基因突变;其使用的简便性和安全性可被广泛的应用,为人类Cre重组酶系统的检测发展起到积极的推动作用。
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公开(公告)号:CN101570763A
公开(公告)日:2009-11-04
申请号:CN200910066584.1
申请日:2009-03-04
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N15/85 , A01K67/027
Abstract: 本发明提供一种用于制备人类疾病动物模型的转基因猪及其培养方法,采用基因工程的方法构建诱导性表达Cre重组酶表达载体pET28a-Mxl-Cre-BGHpolyA-FRT2neoR,用干扰素诱导剂聚肌胞(polyI:C)进行诱导后能够表达Cre重组酶,从而用于敲除靶基因;通过细胞转染及细胞筛选技术筛选出可以诱导性表达Cre重组酶的猪成纤维细胞;利用体细胞核移植技术进行克隆猪。该克隆猪可用于制备人类疾病的基因敲除的动物模型。
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公开(公告)号:CN101550427A
公开(公告)日:2009-10-07
申请号:CN200910066596.4
申请日:2009-02-28
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/06 , A01K67/027 , C12Q1/25
Abstract: 本发明提供一种检测Cre位点特异重组酶活性的转基因报告猪及培养方法,采用基因工程的方法构建LoxP位点锚定终止子,后接报告基因的打靶载体,当Cre重组酶存在的情况下,将Loxp锚定的终止子删除,使后接的报告基因得以表达,从而用于监测Cre重组酶的活性;通过细胞转染及细胞筛选技术筛选出可以特异性检测Cre活性的成纤维细胞;利用体核移植技术进行克隆猪。用于在体内监测Cre重组酶的活性,为建立人类疾病模型提供了监测工具,解决了目前转基因克隆猪的技术不成熟,克隆效率较低问题。
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