公开(公告)号：CN101892257A

公开(公告)日：2010-11-24

申请号：CN201010185086.1

申请日：2010-05-28

Applicant: 吉林大学

Inventor： 逄大欣 ,  周杨 ,  欧阳红生 ,  朱建国 ,  张明军 ,  王铁东 ,  李莉 ,  聂代邦 ,  段新平 ,  毛丹

IPC: C12N15/63

Abstract: 本发明涉及一种表达猪源Cre重组酶载体pCEP4-Cre的构建，其特征在于：首先采用基因工程的方法构建pCEP4-Cre质粒，并用载体pCEP4-Cre与载体pEF-stop-eGFP共转染进入细胞，在表达Cre重组酶的情况下，将转入到细胞中的载体pEF-stop-eGFP中的Loxp卯定的终止子删除，使后接的报告基因eGFP得以表达，从而用于剪切条件性表达绿色荧光蛋白载体中的LoxP元件；其应用基因工程技术构建了一个表达Cre重组酶的质粒，并且重组质粒pCEP4-Cre可以在药物压力下独立于细胞染色体外存在，并在撤去药物压力后以每代10％的速率丢失；可有效的防止细胞基因组因插入外源基因而导致的基因突变；其使用的简便性和安全性可被广泛的应用，为人类Cre重组酶系统的检测发展起到积极的推动作用。