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公开(公告)号：CN108179153B
公开(公告)日：2021-01-01
申请号：CN201711465054.5
申请日：2017-12-28
Applicant: 厦门大学
Abstract: 农杆菌EHA105介导地细基江蓠繁枝变种转基因方法，涉及细基江蓠繁枝变种转基因的方法。将长外植体培养于含茉莉酸甲酯、激动素、2,4‑D和卡那霉素的MES培养基中诱导愈伤组织，培养后，观察并统计愈伤的诱导率；用接菌环挑取农杆菌EHA105，接种在LB液体培养基中培养，隔天按质量百分比1％～2％接种到新鲜的LB培养基中，振荡培养，进行二次活化；当OD600为0.4～0.5时，收集菌液于无菌离心管中，离心，去上清，用无菌海水重悬，得重悬农杆菌菌液；将获得的愈伤组织接种到重悬农杆菌菌液中培养后，愈伤组织用含羧苄青霉素、卡那霉素的无菌海水清洗后，于荧光显微镜中观察GFP报告基因的表达情况及绿色荧光。
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公开(公告)号：CN109055411A
公开(公告)日：2018-12-21
申请号：CN201811089877.7
申请日：2018-09-18
Applicant: 厦门大学
CPC classification number: C12N9/6405 , A23K20/189 , A61K38/00 , A61P31/20 , C12N15/70
Abstract: 抑制WSSV增殖的半胱天冬氨酸酶基因Cq‑caspase及其蛋白抗病毒活性应用。提供红螯螯虾caspase的基因序列、氨基酸序列、重组蛋白的制备方法和红螯螯虾caspase重组蛋白在制备抗WSSV类新药和动物抗病饲料添加剂中应用。依据Cq‑caspase基因序列特征成功构建重组表达载体，在大肠杆菌原核表达系统中诱导表达并纯化获得Cq‑caspase重组蛋白。基于得到的rCq‑caspase，探究其抗WSSV活性。结果表明，rCq‑caspase能够抑制WSSV在红螯螯虾Hpt细胞中的增殖。因此重组基因工程产品rCq‑caspase在制备抗WSSV类新药开发应用中显示出非常诱人的应用前景。
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公开(公告)号：CN108912217A
公开(公告)日：2018-11-30
申请号：CN201810788717.5
申请日：2018-07-18
Applicant: 厦门大学
IPC: C07K14/435 , C12N15/12 , C12N15/70
Abstract: 一种促进WSSV感染的前纤维蛋白基因Cq-Pfn1及其制备方法与应用，涉及基因克隆和基因工程表达。将Cq-Pfn1基因连接到pMD18-T载体上，并分析获得ORF阅读框，得Cq-Pfn1ORF基因序列，再进行序列比对分析，与其他物种相比，Cq-Pfn1具有高度的保守性；构建红螯螯虾前纤维蛋白pGEX-4T-1-Cq-Pfn1基因工程重组表达载体；将所得重组原核表达载体pGEX-4T-1-Cq-Pfn1导入宿主细胞中诱导表达，得表达产物，再通过亲和层析获得较高纯度的重组蛋白GST-Cq-Pfn1。红螯螯虾前纤维蛋白Cq-Pfn1在白斑综合征病害靶向防治以及防治白斑综合征药物中应用。
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公开(公告)号：CN105219779B
公开(公告)日：2018-06-15
申请号：CN201510769511.4
申请日：2015-11-12
Applicant: 厦门大学
IPC: C12N15/12 , C07K14/435 , C12N15/81 , A61K38/17 , A61P31/10 , A23K20/147 , C12R1/84
Abstract: 红螯螯虾抗脂多糖因子及其制备方法与应用，涉及红螯螯虾。所述红螯螯虾抗脂多糖因子命名为Cq‑ALF。所述红螯螯虾抗脂多糖因子Cq‑ALF的制备方法包括以下步骤：1)构建Cq‑ALF重组表达载体；2)将步骤1)所得的重组表达载体转化宿主细胞，并对宿主细胞进行诱导表达，获得表达产物；3)分离纯化步骤2)所得的表达产物，获得重组蛋白，即Cq‑ALF。所述红螯螯虾抗脂多糖因子Cq‑ALF对多种病原菌和对虾白斑综合征病毒具有明显的抑杀活性，因此红螯螯虾抗脂多糖因子Cq‑ALF可在制备抗微生物药物和饲料添加剂中应用。
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公开(公告)号：CN105219779A
公开(公告)日：2016-01-06
申请号：CN201510769511.4
申请日：2015-11-12
Applicant: 厦门大学
Abstract: 红螯螯虾抗脂多糖因子及其制备方法与应用，涉及红螯螯虾。所述红螯螯虾抗脂多糖因子命名为Cq-ALF。所述红螯螯虾抗脂多糖因子Cq-ALF的制备方法包括以下步骤：1)构建Cq-ALF重组表达载体；2)将步骤1)所得的重组表达载体转化宿主细胞，并对宿主细胞进行诱导表达，获得表达产物；3)分离纯化步骤2)所得的表达产物，获得重组蛋白，即Cq-ALF。所述红螯螯虾抗脂多糖因子Cq-ALF对多种病原菌和对虾白斑综合征病毒具有明显的抑杀活性，因此红螯螯虾抗脂多糖因子Cq-ALF可在制备抗微生物药物和饲料添加剂中应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102433341B
公开(公告)日：2014-02-26
申请号：CN201110386427.6
申请日：2011-11-28
Applicant: 厦门大学
IPC: C12N15/12
Abstract: 一种斜带石斑鱼抗菌肽的原核表达产物及其制备方法，涉及生物技术领域中的鱼类基因工程表达。提供一种斜带石斑鱼抗菌肽的原核表达产物及其制备方法。构建的含有EC-hepcidin3基因的表达载体可在大肠杆菌中诱导表达，并通过高效纯化表达产物而在体外获得大量的表达产品。含有EC-hepcidin3基因的表达载体是在原核表达载体pET-28a+中插入EC-hepcidin3前体肽基因序列所构成的重组表达载体pET28a/EC-hepcidin3。在体外获得的表达产物，是重组表达载体pET28a/EC-hepcidin3在大肠杆菌中经诱导表达以及纯化后获得的重组蛋白EC-proHep3。
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公开(公告)号：CN102304536B
公开(公告)日：2013-04-17
申请号：CN201110250681.3
申请日：2011-08-29
Applicant: 厦门大学
Abstract: 两种海洋动物抗菌肽基因的真核融合表达产物及制备方法，涉及海洋鱼类与蟹类抗菌肽的基因工程表达。两种海洋动物抗菌肽基因包括拟穴青蟹抗菌肽scygonadin基因、连接肽和大黄鱼抗菌肽hepcidin基因。分别PCR扩增拟穴青蟹抗菌肽scygonadin基因和大黄鱼抗菌肽hepcidin基因，重叠PCR法获得联合多肽Scy-hepc的目的基因片段；将所得的融合基因Scy-hepc导入表达载体，构建携带融合基因Scy-hepc的重组表达载体；将所得的重组表达载体转入宿主细胞，并将宿主细胞进行诱导表达，获得表达产物；分离纯化所得的表达产物，获得重组蛋白，即联合多肽Scy-hepc。
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公开(公告)号：CN101974082B
公开(公告)日：2013-01-02
申请号：CN201010505548.3
申请日：2010-10-13
Applicant: 厦门大学
Abstract: 一种大黄鱼hepcidin抗菌肽及其制备方法。涉及生物技术领域中的鱼类基因工程，提供一种大黄鱼hepcidin抗菌肽及其制备方法。所述大黄鱼hepcidin抗菌肽的制备方法包括：克隆大黄鱼hepcidin抗菌肽基因，构建重组载体，转化宿主细胞，挑选阳性克隆进行原核表达，分离纯化表达产物，获得大黄鱼hepcidin抗菌肽。分离纯化时提高了蛋自的得率，解决了大黄鱼hepcidin抗菌肽表达复性时会有蛋自析出的间题。所用的溶液，配置简单，价格低廉。制备的大黄鱼hepcidin抗菌肽具有很高的广谱抗菌活性，不仅可用于科研，而且可以作为饲料添加剂用于海水养殖鱼类的疾病防治，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN101906165B
公开(公告)日：2012-11-14
申请号：CN201010225669.2
申请日：2010-07-09
Applicant: 厦门大学
Abstract: 两种鱼类抗菌肽基因的串联表达产物及其表达方法，涉及一种海洋生物的基因工程技术。提供两种鱼类抗菌肽基因的串联表达产物以及两种鱼类Hepcidin串联表达载体的构建和串联表达产物的制备方法。通过pET32a原核表达载体串联表达两种鱼类hepcidin基因，实现两种抗菌肽hepcidin同时可溶性表达，两种串联抗菌肽表达量超过50mg/L，可溶性串联表达产物通过N末端His-Tag亲和层析纯化后，再以肠激酶切除串联蛋白标签，切后混合物再经Ni亲和层析柱，获得纯化的Hepcidin串联表达产物。纯化表达产物对金色葡萄球菌、嗜水单胞气菌，溶壁微球菌等均有显著的抑制作用。
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公开(公告)号：CN102352363A
公开(公告)日：2012-02-15
申请号：CN201110327329.5
申请日：2011-10-25
Applicant: 厦门大学
Abstract: 拟穴青蟹抗病毒型抗脂多糖因子及其制备方法与应用，涉及一种抗病毒型抗脂多糖因子。提供拟穴青蟹抗病毒型抗脂多糖因子Sp-ALF2的基因序列、氨基酸序列、拟穴青蟹抗病毒型抗脂多糖因子Sp-ALF2的制备方法以及拟穴青蟹抗病毒型抗脂多糖因子的应用。构建拟穴青蟹抗病毒型抗脂多糖因子Sp-ALF2重组表达载体；将重组表达载体导入宿主细胞，并将宿主细胞进行诱导表达，获得表达产物；分离纯化后产物，获得重组蛋白，即Sp-ALF2。所述拟穴青蟹抗病毒型抗脂多糖因子Sp-ALF2对WSSV和多种病原菌具有明显抑制作用和杀伤作用，在制备抗病新药和作为动物抗病饲料添加剂中具有广泛应用价值。
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