一种斜带石斑鱼抗菌肽的原核表达产物及其制备方法

    公开(公告)号:CN102433341A

    公开(公告)日:2012-05-02

    申请号:CN201110386427.6

    申请日:2011-11-28

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 一种斜带石斑鱼抗菌肽的原核表达产物及其制备方法,涉及生物技术领域中的鱼类基因工程表达。提供一种斜带石斑鱼抗菌肽的原核表达产物及其制备方法。构建的含有EC-hepcidin3基因的表达载体可在大肠杆菌中诱导表达,并通过高效纯化表达产物而在体外获得大量的表达产品。含有EC-hepcidin3基因的表达载体是在原核表达载体pET-28a+中插入EC-hepcidin3前体肽基因序列所构成的重组表达载体pET28a/EC-hepcidin3。在体外获得的表达产物,是重组表达载体pET28a/EC-hepcidin3在大肠杆菌中经诱导表达以及纯化后获得的重组蛋白EC-proHep3。

    菊黄东方鲀肌肉酶解多肽的提取方法及化妆品

    公开(公告)号:CN112831535A

    公开(公告)日:2021-05-25

    申请号:CN202110169922.5

    申请日:2021-02-04

    Abstract: 本发明公开了菊黄东方鲀肌肉酶解多肽的提取方法,包括以下步骤:S1.保留菊黄东方鲀的肌肉部分,并清洗干净;S2.用绞肉机把菊黄东方鲀肌肉绞为肉糜,并且在肌肉搅碎过程中冰敷降温至5~15℃;S3.往肉糜中加入蛋白酶进行酶解反应,反应得到酶解液;S4.沸水加热酶解液将其中的蛋白酶进行灭活;S5.离心酶解液,收集上清液;S6.对酶解液的上清液进行超滤处理,并且收集0~1KD组分;S7.将收集的组分进行冻干,得到菊黄东方鲀肌肉酶解多肽。本发明还公开了一种化妆品,包括上述提取方法提取得到的菊黄东方鲀肌肉酶解多肽。本发明提取方法简单,制得的多肽产物利于机体吸收,提取得到的多肽可应用于化妆品中,天然,无副作用。

    黑鲷抗菌肽表达载体与构建方法及表达产物与制备方法

    公开(公告)号:CN102517293A

    公开(公告)日:2012-06-27

    申请号:CN201110386673.1

    申请日:2011-11-28

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 黑鲷抗菌肽表达载体与构建方法及表达产物与制备方法,涉及鱼类基因工程。根据获得的黑鲷抗菌肽AS-hepc2 cDNA序列,用pET28a+原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达AS-hepc2前体肽融合蛋白得可溶性表达产物,经亲和层析纯化后得目的蛋白,用以测定抗菌活性。构建的BL21(DE3)(pET28a/AS-hepc2)表达产物无需经过P3C蛋白酶切割标签,只需通过一次亲和纯化即可获蛋白纯品,简化操作步骤,降低操作成本,快速获得可溶性纯品蛋白。构建的BL21(DE3)(pET28a/AS-hepc2)表达体系再诱导表达5h,经镍亲和纯化后获得的蛋白纯品量可为二者的10~50倍,表达效率高。

    菊黄东方鲀肌肉酶解多肽的提取方法及化妆品

    公开(公告)号:CN112831535B

    公开(公告)日:2023-07-07

    申请号:CN202110169922.5

    申请日:2021-02-04

    Abstract: 本发明公开了菊黄东方鲀肌肉酶解多肽的提取方法,包括以下步骤:S1.保留菊黄东方鲀的肌肉部分,并清洗干净;S2.用绞肉机把菊黄东方鲀肌肉绞为肉糜,并且在肌肉搅碎过程中冰敷降温至5~15℃;S3.往肉糜中加入蛋白酶进行酶解反应,反应得到酶解液;S4.沸水加热酶解液将其中的蛋白酶进行灭活;S5.离心酶解液,收集上清液;S6.对酶解液的上清液进行超滤处理,并且收集0~1KD组分;S7.将收集的组分进行冻干,得到菊黄东方鲀肌肉酶解多肽。本发明还公开了一种化妆品,包括上述提取方法提取得到的菊黄东方鲀肌肉酶解多肽。本发明提取方法简单,制得的多肽产物利于机体吸收,提取得到的多肽可应用于化妆品中,天然,无副作用。

    一种斜带石斑鱼抗菌肽的原核表达产物及其制备方法

    公开(公告)号:CN102433341B

    公开(公告)日:2014-02-26

    申请号:CN201110386427.6

    申请日:2011-11-28

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 一种斜带石斑鱼抗菌肽的原核表达产物及其制备方法,涉及生物技术领域中的鱼类基因工程表达。提供一种斜带石斑鱼抗菌肽的原核表达产物及其制备方法。构建的含有EC-hepcidin3基因的表达载体可在大肠杆菌中诱导表达,并通过高效纯化表达产物而在体外获得大量的表达产品。含有EC-hepcidin3基因的表达载体是在原核表达载体pET-28a+中插入EC-hepcidin3前体肽基因序列所构成的重组表达载体pET28a/EC-hepcidin3。在体外获得的表达产物,是重组表达载体pET28a/EC-hepcidin3在大肠杆菌中经诱导表达以及纯化后获得的重组蛋白EC-proHep3。

    两种海洋动物抗菌肽基因的真核融合表达产物及制备方法

    公开(公告)号:CN102304536B

    公开(公告)日:2013-04-17

    申请号:CN201110250681.3

    申请日:2011-08-29

    Applicant: 厦门大学

    Inventor: 王克坚 彭会 陈贝

    Abstract: 两种海洋动物抗菌肽基因的真核融合表达产物及制备方法,涉及海洋鱼类与蟹类抗菌肽的基因工程表达。两种海洋动物抗菌肽基因包括拟穴青蟹抗菌肽scygonadin基因、连接肽和大黄鱼抗菌肽hepcidin基因。分别PCR扩增拟穴青蟹抗菌肽scygonadin基因和大黄鱼抗菌肽hepcidin基因,重叠PCR法获得联合多肽Scy-hepc的目的基因片段;将所得的融合基因Scy-hepc导入表达载体,构建携带融合基因Scy-hepc的重组表达载体;将所得的重组表达载体转入宿主细胞,并将宿主细胞进行诱导表达,获得表达产物;分离纯化所得的表达产物,获得重组蛋白,即联合多肽Scy-hepc。

    两种海洋动物抗菌肽基因的真核融合表达产物及制备方法

    公开(公告)号:CN102304536A

    公开(公告)日:2012-01-04

    申请号:CN201110250681.3

    申请日:2011-08-29

    Applicant: 厦门大学

    Inventor: 王克坚 彭会 陈贝

    Abstract: 两种海洋动物抗菌肽基因的真核融合表达产物及制备方法,涉及海洋鱼类与蟹类抗菌肽的基因工程表达。两种海洋动物抗菌肽基因包括拟穴青蟹抗菌肽scygonadin基因、连接肽和大黄鱼抗菌肽hepcidin基因。分别PCR扩增拟穴青蟹抗菌肽scygonadin基因和大黄鱼抗菌肽hepcidin基因,重叠PCR法获得联合多肽Scy-hepc的目的基因片段;将所得的融合基因Scy-hepc导入表达载体,构建携带融合基因Scy-hepc的重组表达载体;将所得的重组表达载体转入宿主细胞,并将宿主细胞进行诱导表达,获得表达产物;分离纯化所得的表达产物,获得重组蛋白,即联合多肽Scy-hepc。

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