公开(公告)号：CN108912217A

公开(公告)日：2018-11-30

申请号：CN201810788717.5

申请日：2018-07-18

Applicant: 厦门大学

Inventor： 刘海鹏 ,  李东利 ,  孟闯 ,  谢晓露 ,  刘曼君 ,  王克坚

IPC: C07K14/435 ,  C12N15/12 ,  C12N15/70

Abstract: 一种促进WSSV感染的前纤维蛋白基因Cq-Pfn1及其制备方法与应用，涉及基因克隆和基因工程表达。将Cq-Pfn1基因连接到pMD18-T载体上，并分析获得ORF阅读框，得Cq-Pfn1ORF基因序列，再进行序列比对分析，与其他物种相比，Cq-Pfn1具有高度的保守性；构建红螯螯虾前纤维蛋白pGEX-4T-1-Cq-Pfn1基因工程重组表达载体；将所得重组原核表达载体pGEX-4T-1-Cq-Pfn1导入宿主细胞中诱导表达，得表达产物，再通过亲和层析获得较高纯度的重组蛋白GST-Cq-Pfn1。红螯螯虾前纤维蛋白Cq-Pfn1在白斑综合征病害靶向防治以及防治白斑综合征药物中应用。

公开(公告)号：CN108912217B

公开(公告)日：2021-10-15

申请号：CN201810788717.5

申请日：2018-07-18

Applicant: 厦门大学

Inventor： 刘海鹏 ,  李东利 ,  孟闯 ,  谢晓露 ,  刘曼君 ,  王克坚

IPC: C07K14/435 ,  C12N15/12 ,  C12N15/70

Abstract: 一种促进WSSV感染的前纤维蛋白基因Cq‑Pfn1及其制备方法与应用，涉及基因克隆和基因工程表达。将Cq‑Pfn1基因连接到pMD18‑T载体上，并分析获得ORF阅读框，得Cq‑Pfn1ORF基因序列，再进行序列比对分析，与其他物种相比，Cq‑Pfn1具有高度的保守性；构建红螯螯虾前纤维蛋白pGEX‑4T‑1‑Cq‑Pfn1基因工程重组表达载体；将所得重组原核表达载体pGEX‑4T‑1‑Cq‑Pfn1导入宿主细胞中诱导表达，得表达产物，再通过亲和层析获得较高纯度的重组蛋白GST‑Cq‑Pfn1。红螯螯虾前纤维蛋白Cq‑Pfn1在白斑综合征病害靶向防治以及防治白斑综合征药物中应用。

公开(公告)号：CN107903319A

公开(公告)日：2018-04-13

申请号：CN201711462568.5

申请日：2017-12-28

Applicant: 厦门大学

Inventor： 刘海鹏 ,  李东利 ,  张秋霞 ,  王克坚

IPC: C07K14/66 ,  C07K14/435 ,  C12N15/81 ,  C12N15/66 ,  A61P31/20 ,  A23K20/184

Abstract: 一种抗WSSV感染的胸腺素蛋白Cq-TRP1在毕赤酵母中的表达与应用，涉及红螯螯虾胸腺素蛋白。红螯螯虾胸腺素命名为Cq-TRP1。根据pPICZaA载体多克隆位点，设计扩增编码红螯螯虾Cq-TRP1基因ORF的特异性上游引物F1和下游引物R1，在上游引物F1的5′端添加EcoR I酶切位点；在下游引物R1的5′端添加XbaI酶切位点、终止密码子和编码His-tag的碱基。将Cq-TRP1基因连接到真核表达载体pPICZaA，构建pPICZaA-Cq-TRP1真核表达载体；将所得真核重组表达载体导入毕赤酵母中，对其进行诱导表达，获得表达产物；先将所得的表达产物进行透析，再亲和层析。