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公开(公告)号：CN109182313A
公开(公告)日：2019-01-11
申请号：CN201811168269.5
申请日：2018-10-08
Applicant: 南京福斯弗瑞生物科技有限公司 , 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种纳豆激酶、其表达载体的构建及生产方法。它是以纳豆芽孢杆菌（Bacillus natto）基因组数据为模板，扩增纳豆激酶基因，通过自主复制性质粒和整合型质粒的方法在地衣芽孢杆菌中表达。本发明还对表达框的启动子和信号肽进行选择，得到一种能够在地衣芽孢杆菌中高效分泌表达的重组菌株，并且实现了在50L发酵罐中的小试生产，产品活力达到15000FU/g。
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公开(公告)号：CN109097380A
公开(公告)日：2018-12-28
申请号：CN201810817502.1
申请日：2018-07-24
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及乳酸菌基因工程领域，具体是枯草芽孢杆菌swrC基因作为乳酸菌筛选标记的应用。本发明通过构建swrC基因表达盒，在乳酸菌中表达SwrC蛋白，阳性转化子能够在添加有surfactin的平板正常生长，对照转化子在surfactin平板的生长受到抑制。Surfactin对大部分革兰氏阳性菌具有优异的抑菌效果，并且较抗生素更安全，因此以surfactin及swrC基因构建的乳酸菌筛选标记系统具有开发为替代抗生素抗性筛选的广宿主安全筛选系统的潜力。
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公开(公告)号：CN108728371A
公开(公告)日：2018-11-02
申请号：CN201711228833.3
申请日：2017-11-29
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种不动杆菌Y-3及其L-天冬酰胺酶基因的表达与应用。本发明公开的L-天冬酰胺酶基因来源于从土壤中筛选得到的一株不动杆菌（Acinetobacter soli）Y-3（菌种保藏号：CGMCC NO:14831），其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。该L-天冬酰胺酶具有良好的催化活力，有效抑制了油炸食品中丙烯酰胺的生成，可从根源上控制含淀粉类食品高温加工中潜在致癌物质丙烯酰胺的产生，在食品加工领域具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN108330079A
公开(公告)日：2018-07-27
申请号：CN201711013184.5
申请日：2017-10-25
Applicant: 南京福斯弗瑞生物科技有限公司 , 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种产普鲁兰酶的解淀粉芽孢杆菌、其发酵得到的普鲁兰酶及重组载体的构建与应用。它是从云南腾冲热泉附近的土壤样品中，通过菌体的富集、筛选得到一株产中温普鲁兰酶的解淀粉芽孢杆菌。通过蛋白质电泳和N端测序技术分析普鲁兰酶N端组成，分析基因组数据得到中温普鲁兰酶的基因。本发明将该基因以整合到枯草芽孢杆菌基因组的方式在枯草芽孢杆菌中表达，得到较原始菌株酶活有极大提高的重组菌株，为后续的工业生产提供基础。
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公开(公告)号：CN107988330A
公开(公告)日：2018-05-04
申请号：CN201711305271.8
申请日：2017-12-11
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6851 , C12Q1/04 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了同时检测单增李斯特菌和伊氏利斯特菌的双重PCR方法。属于食源性致病菌检测技术领域。本发明针对新发掘的单增李斯特菌特异性基因LMOf2365_0970和伊氏利斯特菌特异性基因AX25_00730设计引物和探针，该检测方法能够有效地检测出食品中的单增李斯特菌和伊氏利斯特菌，对两种目标菌的检测限为N×102CFU/mL，荧光定量PCR检测时间小于40min，具有检测灵敏度高、特异性好、抗干扰能力强的特点，可实现对食品中单增李斯特菌和伊氏利斯特菌快速定性和准确定量检测，达到快速筛查污染食品样本的目的。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107723348A
公开(公告)日：2018-02-23
申请号：CN201711229374.0
申请日：2017-11-29
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6865 , C12Q1/689 , C12Q1/04 , C12N15/11
CPC classification number: C12Q1/6865 , C12Q1/689 , C12Q2531/143 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明公开了一种鉴定单增李斯特菌1/2c血清型的NASBA检测引物及方法，属于生物技术领域。正向引物序列为5’-GAAATACATTTTGGTCTAG-3’，反向引物序列为5’-aattctaatacgactcactatagggATTACTGGGAATAACTTGA-3’，单增李斯特菌1/2c血清型检测用分子信标探针序列为5’-JOE-CGATCGAGGAAATGCTTATGCAGATATTACGATCG-DABCYL-3’，检测方法包括下列步骤：单增李斯特菌RNA提取，实时NASBA反应，定性分析。本发明构建的引物和分子信标对单增李斯特菌1/2c血清型菌株的鉴定具有高度的特异性和灵敏度，所述的检测方法操作步骤简单，检测时间短，可进行实时定性分析，并且可对活菌和死菌有效区分。
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公开(公告)号：CN104561295B
公开(公告)日：2017-11-24
申请号：CN201410835984.5
申请日：2014-12-29
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种检测阪崎克罗诺杆菌目的核苷酸序列及检测试剂盒与检测方法，其中目的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，试剂盒包括：PCR buffer，MgCl2溶液，dNTP，CS21‑L引物，CS21‑R引物和TaqDNA聚合酶；检测方法为首先提取待测样品的基因组DNA，然后以提取的基因组DNA为模板，以CS21‑L和CS21‑R引物对CS21进行PCR反应，最后检测PCR产物中是否存在大小为152bp的单一扩增产物。该方法具有检测时间短，抗干扰能力强，成本低，特异性好，灵敏度高的优点，对我国的食品安全具有重要意义。
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公开(公告)号：CN104611433B
公开(公告)日：2017-01-18
申请号：CN201510044659.1
申请日：2015-01-28
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供一种检测丙型副伤寒沙门氏菌的3个特异性靶基因、相应的PCR引物对、利用以上引物对和靶基因进行检测的方法。PCR引物对是根据3个丙型副伤寒沙门氏菌特异性检测靶点设计而成，该特异性检测靶点稳定高、特异性强，通过合理优化PCR反应体系，凝胶电泳检测手段，可以快速、准确地鉴定出丙型副伤寒沙门氏菌。本发明提供的检测方法包括：(1)提取样品DNA，PCR扩增(2)凝胶电泳检测扩增产物(3)比较电泳后条带，如果在523bp、212bp和169bp位置有条带，则证明样品中含有丙型副伤寒沙门氏菌。通过实验比较分析，本发明方法具有单一性强，检测结果可靠，结果判定简单的特点，可以广泛应用于食品卫生领域。
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公开(公告)号：CN105754917A
公开(公告)日：2016-07-13
申请号：CN201610010187.2
申请日：2016-01-07
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种Plipastatin衍生环五脂肽及其产生菌和应用。产Plipastatin衍生环五脂肽的枯草芽孢杆菌Best2，通过同源重组的方法靶向缺失枯草芽孢杆菌pB2?L基因组中的ppsC和ppsD基因，获得缺失ppsC和ppsD基因的枯草芽孢杆菌Best2。在改良的Landy培养基中对枯草芽孢杆菌Best2进行发酵，获得含Plipastatin衍生环五脂肽的发酵液，对发酵液进行分离纯化，获得含Plipastatin衍生环五脂肽粗提物。该新型的plipastatin衍生环五脂肽不仅对丝状真菌仍然具有一定的抑菌活性，并且对革兰氏阳性菌的抑菌活性有所提高。
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公开(公告)号：CN105695543A
公开(公告)日：2016-06-22
申请号：CN201610046208.6
申请日：2016-01-22
Applicant: 南京农业大学
CPC classification number: C07K7/50
Abstract: 本发明公开了一种生物表面活性素的生产方法，将解淀粉芽孢杆菌fmb50先后接种于PDA斜面培养基进行培养，培养后再接种于BPY种子培养基继续培养，最后再接种于发酵培养基培养后得到含有生物表面活性素的培养液；然后将培养液加水稀释后调节pH，再通过加入壳聚糖、海藻酸钠和硅藻土进行絮凝后过滤；最后将滤饼使用低级醇溶解提取后过滤，将滤液减压蒸馏得到生物表面活性素粗品。本发明提供的生物表面活性素的生产方法能够实现工业化制备生物表面活性素，并且制备得到的生物表面活性素纯度高，有效弥补了目前生物表面活性素不能大规模生产的不足。
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