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公开(公告)号：CN112877352A
公开(公告)日：2021-06-01
申请号：CN202110171963.8
申请日：2021-02-08
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种适用于谷氨酸棒状杆菌的cumate诱导系统及该诱导系统构建的质粒载体和应用。该系统包括：阻遏蛋白CymR基因、启动子、操纵基因CuO及强启动子；启动子控制阻遏蛋白CymR基因，强启动子控制操纵基因CuO。所述阻遏蛋白CymR基因的序列如SEQ ID NO:1所示；所述操纵基因CuO的如SEQ ID NO:2所示。本发明提供的质粒载体包含上述cumate诱导系统。本发明构建的诱导系统严格受诱导剂cumate(四‑异丙基苯甲酸)的调控，实现了cumate对目的基因表达的调控，并且可通过诱导剂cumate的浓度及诱导时间对目的蛋白的表达量进行控制。
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公开(公告)号：CN107119051B
公开(公告)日：2020-09-22
申请号：CN201710235664.X
申请日：2017-04-12
Applicant: 华南理工大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/75 , C12N1/21 , C12R1/11 , C12R1/125
Abstract: 本发明公开了一种巨大芽孢杆菌具有启动子功能的DNA片段及其应用。该DNA片段为如下任一序列：(a)如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列或者其互补序列；(b)对SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列进行一个或多个核苷酸取代、缺失或添加所获得的，具有与SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列相同的作为启动子功能的核苷酸序列或者其互补序列；(c)对SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列添加一个或多个核糖体结合位点的序列。本发明的DNA片段具有启动子的功能，同时具有很强的表达活性，在不需要添加诱导物的条件下即能实现外源基因的高表达，可将其运用于耐热β‑半乳糖苷酶和转谷氨酰胺酶的表达，特别是为枯草芽孢杆菌表达分泌系统提供了有效的元件。
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公开(公告)号：CN110423832A
公开(公告)日：2019-11-08
申请号：CN201910804285.7
申请日：2019-08-28
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种基于特异性基因靶标lmo0160的单增李斯特菌的PCR检测引物。本发明针对新挖掘到的单增李斯特菌的特异性检测靶标lmo0160基因设计特异性引物，正向引物序列为5’-ACGATGGCAACACGGTAGGTC-3’，反向引物序列为5’-CGCCGTGGAATGCTTTTAT-3’。所述特异性检测靶标通过比较基因组学和生物信息学挖掘获得，选自lmo0160基因。该检测靶标同时具有特异性好和敏感性高的特点。本发明提供的PCR检测引物有特异性好、敏感性高的特点。
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公开(公告)号：CN107759675A
公开(公告)日：2018-03-06
申请号：CN201710990081.8
申请日：2017-10-23
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种来源于枯草芽孢杆菌可提高分泌效率的信号肽及其应用。该信号肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。编码该信号肽的核苷酸序列选自如下任一序列：(a)如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列或者其互补序列；(b)对SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列进行一个或多个核苷酸取代、缺失或添加所获得的，具有与SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列相同的作为信号肽功能的核苷酸序列或者其互补序列。本发明提供了一种具有很强的分泌表达活性的信号肽，能实现外源基因的高表达，为枯草芽孢杆菌表达外源基因提供了有效的元件，可将其应用于耐热β-半乳糖苷酶和转谷氨酰胺酶的表达。
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公开(公告)号：CN107698669A
公开(公告)日：2018-02-16
申请号：CN201710990101.1
申请日：2017-10-23
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种可提高分泌效率的信号肽及其应用。该信号肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。编码该信号肽的核苷酸序列选自如下任一序列：(a)如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列或者其互补序列；(b)对SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列进行一个或多个核苷酸取代、缺失或添加所获得的，具有与SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列相同的作为信号肽功能的核苷酸序列或者其互补序列。本发明中构建了该信号肽与β-半乳糖苷酶编码基因相结合的表达载体，结合筛选方法，筛选出能提高β-半乳糖苷酶分泌的信号肽。同时构建该信号肽与转谷氨酰胺酶酶原编码基因相结合的表达载体，实现了转谷氨酰胺酶酶原的分泌表达。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102276702B
公开(公告)日：2013-09-25
申请号：CN201110215805.4
申请日：2011-07-29
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种毕赤酵母壁蛋白及其构建的表面展示系统和构建方法。所述巴斯德毕赤酵母壁蛋白的氨基酸序列为SEQ NO：1；所述巴斯德毕赤酵母细胞表面展示系统是以所述的巴斯德毕赤酵母壁蛋白Gcw30为锚定蛋白，将靶蛋白固定在巴斯德毕赤酵母细胞表面构成的。本发明的壁蛋白Gcw30在毕赤酵母中表达量十分高，与现已用于巴斯德毕赤酵母表面展示系统的内源锚定蛋白Pir1蛋白和Pir2蛋白相比，分别高6倍和13倍。
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公开(公告)号：CN102260334B
公开(公告)日：2013-07-24
申请号：CN201110215855.2
申请日：2011-07-29
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种毕赤酵母壁蛋白及其构建的表面展示系统和构建方法。所述巴斯德毕赤酵母壁蛋白的氨基酸序列为SEQNO：1；所述巴斯德毕赤酵母细胞表面展示系统是以所述的巴斯德毕赤酵母壁蛋白GCW21为锚定蛋白，将靶蛋白固定在巴斯德毕赤酵母细胞表面构成的。本发明的壁蛋白GCW21在毕赤酵母中表达量十分高，与现已用于巴斯德毕赤酵母表面展示系统的内源锚定蛋白Pir1蛋白和Pir2蛋白相比，分别高15倍和34倍。
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公开(公告)号：CN102276707A
公开(公告)日：2011-12-14
申请号：CN201110215853.3
申请日：2011-07-29
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种毕赤酵母壁蛋白及其构建的表面展示系统和构建方法。所述巴斯德毕赤酵母壁蛋白的氨基酸序列为SEQNO：1；所述巴斯德毕赤酵母细胞表面展示系统是以所述的巴斯德毕赤酵母壁蛋白Gcw19为锚定蛋白，将靶蛋白固定在巴斯德毕赤酵母细胞表面构成的。本发明的壁蛋白Gcw19在毕赤酵母中表达量十分高，与现已用于巴斯德毕赤酵母表面展示系统的内源锚定蛋白Pir1蛋白和Pir2蛋白相比，分别高6倍和14倍。
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公开(公告)号：CN102276706A
公开(公告)日：2011-12-14
申请号：CN201110215844.4
申请日：2011-07-29
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种毕赤酵母壁蛋白及其构建的表面展示系统和构建方法。所述巴斯德毕赤酵母壁蛋白的氨基酸序列为SEQNO：1；所述巴斯德毕赤酵母细胞表面展示系统是以所述的巴斯德毕赤酵母壁蛋白Gcw15为锚定蛋白，将靶蛋白固定在巴斯德毕赤酵母细胞表面构成的。本发明的壁蛋白Gcw15在毕赤酵母中表达量十分高，与现已用于巴斯德毕赤酵母表面展示系统的内源锚定蛋白Pir1蛋白和Pir2蛋白相比，分别高10倍和23倍。
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公开(公告)号：CN102276702A
公开(公告)日：2011-12-14
申请号：CN201110215805.4
申请日：2011-07-29
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种毕赤酵母壁蛋白及其构建的表面展示系统和构建方法。所述巴斯德毕赤酵母壁蛋白的氨基酸序列为SEQNO：1；所述巴斯德毕赤酵母细胞表面展示系统是以所述的巴斯德毕赤酵母壁蛋白Gcw30为锚定蛋白，将靶蛋白固定在巴斯德毕赤酵母细胞表面构成的。本发明的壁蛋白Gcw30在毕赤酵母中表达量十分高，与现已用于巴斯德毕赤酵母表面展示系统的内源锚定蛋白Pir1蛋白和Pir2蛋白相比，分别高6倍和13倍。
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