一种植物高效胞嘧啶单碱基编辑器及其构建与应用

    公开(公告)号:CN112266420A

    公开(公告)日:2021-01-26

    申请号:CN202011189809.5

    申请日:2020-10-30

    Abstract: 本发明提供了一种植物高效胞嘧啶单碱基编辑器及其构建与应用。该编辑器包含SpCas9变体融合蛋白PeCBE‑NG,从N端到C端,依次包含1个核定位bpNLS功能元件,1个脱氨酶eCBE功能元件,1个SpCas9变体Cas9n‑NG编码序列,2个串联的尿嘧啶糖基化酶抑制蛋白UGI功能元件,以及1个核定位bpNLS功能元件。相比现有植物胞嘧啶单碱基编辑器,本发明构建的胞嘧啶单碱基编辑器具有高效、无靶序列偏好性、编辑窗口适中、自靶向sgRNA效率低、脱靶效率低、以及广靶向识别NG‑PAM的特点,将有利于植物基因功能研究和作物遗传改良的发展,在植物单碱基替换与饱和突变筛选等方面具有广泛的应用前景。

    一种短小型小核RNA启动子及其构建方法和在基因组编辑中的应用

    公开(公告)号:CN111019946B

    公开(公告)日:2020-12-11

    申请号:CN201911338845.0

    申请日:2019-12-23

    Abstract: 本发明提供了一种短小型小核RNA启动子及其构建方法和应用。所述短小型小核RNA启动子的长度为150‑300bp,3’端至5’端方向依次含有1个TATA box保守元件,1个USE保守元件,以及至少一个MSP保守元件。相比现有野生型小核RNA基因启动子,本发明所构建的短小型小核RNA启动子转录活性更强,具有明显更高的驱动sgRNA的编辑效率,而且长度较短,可以减少每个sgRNA表达盒的长度,提高多靶点sgRNA克隆构建载体的效率,利于进行多靶点多基因的同时编辑,在基因组编辑方面具有很好的应用前景。

    一种植物生长负调控顺式元件SE1及其在调控植物株高中的应用

    公开(公告)号:CN105463011B

    公开(公告)日:2019-02-01

    申请号:CN201510969303.9

    申请日:2015-12-22

    Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体公开了一种植物生长负调控顺式元件SE1及其在调控植物株高中的应用。本发明利用一个水稻T‑DNA插入的矮化植物,通过TAIL‑PCR扩增旁侧序列发现,该T‑DNA插入位于的Eui1基因内含子处。eui1是杂种优势利用的水稻育种中的四大遗传材料之一。本发明通过利用携带内含子小缺失的Eui1遗传转化eui1突变体的功能互补实验,在Eui1基因的内含子区段确定了一个Eui1基因的沉默子SE1,获得了新型的与Eui1相关的矮化植物,这表明SE1元件在控制水稻株高,对构建理想株型用于杂交水稻育种,提高水稻产量的遗传改良上具有较好的应用潜力。

    一种多基因组装载体系统及其多基因组装方法

    公开(公告)号:CN107177616A

    公开(公告)日:2017-09-19

    申请号:CN201710384197.7

    申请日:2017-05-26

    Inventor: 刘耀光 祝钦泷

    Abstract: 本发明公开了一种多基因组装载体系统及其多基因组装方法。该系统包括1类接受载体、2类供给载体、以及可选择使用的能发生筛选标记自删除的供给质粒。该系统利用Cre/loxP重组系统和两组突变型loxP的不可逆重组位点,在Cre酶作用下,以野生型loxP位点的重组来实现供给载体整合到接受载体中,然后其一组突变型loxP的不可逆重组自动删除供给载体的骨架,只留下目的基因在接受载体上;重复2类供给载体交替与接受载体的组装,就能实现多基因的快速组装。本发明是目前最简单高效的多基因载体系统。因此本发明对重要的、复杂生物合成途径和重要农艺性状的多基因遗传工程操作提供了可操作的技术平台,具有重要的应用价值。

    一种水稻雄性育性可控系的构建方法及育种方法

    公开(公告)号:CN102925478B

    公开(公告)日:2015-05-20

    申请号:CN201210339978.1

    申请日:2012-09-14

    Abstract: 本发明提供一种水稻雄性育性可控系的构建方法,包括:(a)获得水稻雄性育性基因的不育突变系和相应的功能型雄性育性基因;(b)构建由诱导型启动子控制的功能型雄性育性基因表达盒转化载体;(c)以所述表达盒转化载体转化所述不育突变系,获得水稻雄性育性可控系。本发明创制的雄性育性可控系可利用相应的诱导剂诱导重组育性基因表达,使其可育自交繁殖;不施加诱导剂时表现完全雄性不育,因而可与父本杂交生产杂交种子。此育种方法克服了基于细胞质雄性不育的三系杂交稻和基于光温敏不育系的二系杂交稻育种以及其它基因工程方法创制不育系方法的缺点。

    一种水稻雄性育性可控系的构建方法及育种方法

    公开(公告)号:CN102925478A

    公开(公告)日:2013-02-13

    申请号:CN201210339978.1

    申请日:2012-09-14

    Abstract: 本发明提供一种水稻雄性育性可控系的构建方法,包括:(a)获得水稻雄性育性基因的不育突变系和相应的功能型雄性育性基因;(b)构建由诱导型启动子控制的功能型雄性育性基因表达盒转化载体;(c)以所述表达盒转化载体转化所述不育突变系,获得水稻雄性育性可控系。本发明创制的雄性育性可控系可利用相应的诱导剂诱导重组育性基因表达,使其可育自交繁殖;不施加诱导剂时表现完全雄性不育,因而可与父本杂交生产杂交种子。此育种方法克服了基于细胞质雄性不育的三系杂交稻和基于光温敏不育系的二系杂交稻育种以及其它基因工程方法创制不育系方法的缺点。

    水稻杂种花粉育性基因及其应用

    公开(公告)号:CN101492682B

    公开(公告)日:2011-03-23

    申请号:CN200810132341.9

    申请日:2008-07-11

    Abstract: 本发明涉及植物基因工程技术领域,具体涉及水稻杂种花粉育性基因座Sa的2个命名为SaM和SaF的基因的分离克隆和应用。细菌双杂交实验证明籼稻和粳稻的SaM和SaF的特定等位基因编码的蛋白发生特异的相互作用。遗传分析和转基因功能互补实验表明,在杂种中杂合的SaM和来源于籼稻的SaF即3个等位基因的相互作用产生杂种花粉不育,缺少它们中的任何一个或抑制其表达时产生杂种亲和性即花粉可育。本发明还涉及利用所述基因培育水稻杂种育性亲和系的方法和应用,以及鉴定水稻杂种育性基因型的分子标记及其应用。

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