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公开(公告)号：CN103409558B
公开(公告)日：2016-03-30
申请号：CN201310317342.1
申请日：2013-07-25
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一套用于同时检测猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒以及猪轮状病毒的多重PCR引物组。本发明的引物组由三对引物组成，其中，用于猪流行性腹泻病毒检测的引物序列为SEQ ID NO：1和2所示；用于猪传染性胃肠炎病毒检测的引物序列为SEQ ID NO：3和4所示；用于猪轮状病毒检测的引物序列为SEQ ID NO：5和6所示。应用本发明引物序列通过多重PCR方法可同时对猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒以及猪轮状病毒的不同毒株进行检测，结果均为阳性，而对其他常见猪源病毒检测结果均为阴性，说明本发明的引物组特异性强、重复性好；对病毒cDNA梯度稀释后进行PCR检测，说明该引物灵敏度高。
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公开(公告)号：CN103013897A
公开(公告)日：2013-04-03
申请号：CN201210424842.0
申请日：2012-10-30
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种干酪乳杆菌菌影及其制备方法和应用，属于生物技术领域。本发明选择干酪乳杆菌作为研究对象，通过分离干酪乳杆菌的噬菌体，预测并克隆其裂解基因，将含有克隆得到的裂解基因的重组载体转化干酪乳杆菌，诱导裂解基因表达后制成菌影。本发明以干酪乳杆菌菌影作为抗原传递载体使用，做到了真正意义上的安全可靠。同时，干酪乳杆菌细胞壁中的胞壁酰二肽具有很好的佐剂作用，能明显加强异质性抗原的免疫原性。此外，干酪乳杆菌菌影可通过发酵大量生产，冻干后在室温下可保存较长时间，为进一步应用于生产实践降低了成本，也为进一步设计新型安全有效的药物，特别是疫苗的递送系统，从而应用于预防及治疗疾病提供了一种新的思路和方法。
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公开(公告)号：CN101580541A
公开(公告)日：2009-11-18
申请号：CN200910071261.1
申请日：2009-01-14
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明提供的是一种传染性胰腺坏死重组VP2蛋白抗原及纯化方法。从传染性胰腺坏病毒细胞培养液中进行病毒核酸(RNA)提取，以IPNV VP2基因的下游引物P2进行病毒基因组cDNA的合成，再利用IPNV VP2基因的上、下游引物，进行VP2基因的扩增，将扩增得到的IPNV VP2基因克隆到原核表达载体质粒pET30b中，并在大肠杆菌BL21菌株中进行表达得到传染性胰腺坏死重组VP2蛋白抗原。该抗原可以克服传染性胰腺坏死传统诊断方法中的抗原所存在的排毒、散毒的潜在危险，可作为一种疾病监测的诊断抗原。
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公开(公告)号：CN1285609C
公开(公告)日：2006-11-22
申请号：CN200510009706.5
申请日：2005-02-04
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明提供的是一种猪传染性胃肠炎重组N蛋白抗原及纯化方法。从纯化后的TGEV病毒液中进行病毒核酸提取，以TGEV N基因的上游引物Li01进行病毒基因组cDNA的合成，再使用TGEV N基因的上、下游引物，进行N基因的扩增，将扩增后的TGEV N基因克隆到原核表达载体质粒pProEXHTb中，并在大肠杆菌DH5α菌株中进行表达得到的猪传染性胃肠炎重组N蛋白抗原。该抗原可以克服猪传染性胃肠炎传统诊断方法中的抗原所存在的排毒、散毒的潜在危险，可作为一种疾病监测的诊断抗原。
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公开(公告)号：CN1740316A
公开(公告)日：2006-03-01
申请号：CN200510009883.3
申请日：2005-04-08
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/18
Abstract: 本发明提供的是一种抗猪传染性胃肠炎重组N蛋白杂交瘤细胞株。以纯化的重组TGEV N蛋白免疫BALB/c小鼠制备诊断用单克隆抗体。取免疫脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合，用间接ELISA方法进行筛选，经过3次克隆筛选，最终获得一株分泌抗重组TGEV N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为E10F10D5，其染色体平均计数为87±10对，间接ELISA检测制备的腹水抗体效价达1∶12800。本发明以生物技术手段纯化重组TGEV N蛋白，制备诊断抗原，建立检测抗体的Dot－ELISA检测方法，制备快诊膜，缩短检测时间；建立间接ELISA检测方法，检测TGEV感染和抗体效价测定，为建立标准化诊断试剂盒奠定基础；为建立快速检测病毒抗原的诊断方法奠定物质基础。
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公开(公告)号：CN1680433A
公开(公告)日：2005-10-12
申请号：CN200510009706.5
申请日：2005-02-04
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明提供的是一种猪传染性胃肠炎重组N蛋白抗原及纯化方法。从纯化后的TGEV病毒液中进行病毒核酸提取，以TGEV N基因的上游引物Li01进行病毒基因组cDNA的合成，再使用TGEV N基因的上、下游引物，进行N基因的扩增，将扩增后的TGEV N基因克隆到原核表达载体质粒pProEXHTb中，并在大肠杆菌DH5α菌株中进行表达得到的猪传染性胃肠炎重组N蛋白抗原。该抗原可以克服猪传染性胃肠炎传统诊断方法中的抗原所存在的排毒、散毒的潜在危险，可作为一种疾病监测的诊断抗原。
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公开(公告)号：CN118460584A
公开(公告)日：2024-08-09
申请号：CN202410433277.7
申请日：2024-04-10
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas9系统的营养缺陷型乳酸菌基因编辑系统及应用，所述的营养缺陷型乳酸菌基因编辑系统包括以pLCNICK为骨架构建得到的基因编辑质粒，所述的基因编辑质粒中含有识别特异性靶序列的sgRNAs以及所要插入或敲除位点的上下游同源序列，其连接顺序为上游同源序列‑下游同源序列‑sgRNAs。所述的系统用于外源基因插入时，还包括在上、下游同源序列中间插入外源基因序列。本发明利用CRISPR‑Cas9系统和营养缺陷型选择标记建立了一套在乳酸菌基因组任意位点进行插入、缺失或突变操作的基因组编辑系统，实现了对不同乳酸菌菌株的不同基因位点高效、精确敲除及插入，实现了乳酸菌系统复制的人工控制。
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公开(公告)号：CN117088943B
公开(公告)日：2024-05-14
申请号：CN202310815193.5
申请日：2023-07-04
Applicant: 东北农业大学
IPC: C07K7/06 , C12N15/11 , A61K39/385 , A61K47/64
Abstract: 本发明公开了一种猪源树突状细胞靶向肽KC1及其应用。所述的猪源树突状细胞靶向肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明利用噬菌体随机肽库和全细胞差异筛选技术筛选猪单核源DCs优势结合多肽，得到了猪源DCs靶向肽KC1(KCCYPN)，实验证明该靶向肽能较强地结合于猪源DCs，显示了良好的特异性。该靶向肽可作为基因导向载体等药物先导分子，为细胞特异性小分子治疗奠定基础，或与疫苗联合使用，提高猪病疫苗免疫效率，促进机体提早产生免疫力。本发明的提出为研发猪源DCs靶向疫苗提供了物质基础。
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公开(公告)号：CN117070432A
公开(公告)日：2023-11-17
申请号：CN202310884511.3
申请日：2023-07-18
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种融合表达猪源树突状细胞靶向肽和PEDV中和抗原表位的重组乳酸杆菌及其应用。所述的重组乳酸杆菌中含有融合表达猪源树突状细胞靶向肽KC1和猪流行性腹泻病毒(PEDV)中和抗原表位COE的质粒，其中，所述的猪源树突状细胞靶向肽KC1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明从益生菌乳酸菌将免疫原性抗原特异性靶向树突细胞可以诱导抗原的强大免疫反应这一特点出发，研发出一种融合表达猪源树突状细胞靶向肽KC1和PEDV中和抗原表位COE的重组乳酸杆菌疫苗。本发明的提出为靶向疫苗的研究提供重要的物质基础和技术手段，对猪的新型靶向性疫苗的研制与开发具有重要意义。
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公开(公告)号：CN110734879B
公开(公告)日：2023-03-28
申请号：CN201911107985.7
申请日：2019-11-13
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N1/20 , A23K10/18 , A23K50/30 , A61K35/747 , A61P1/00 , A61P37/04 , A61P31/14 , A61P31/04 , C12R1/225
Abstract: 本发明提供了一株罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)LR‑CO21及其应用，涉及益生菌技术领域。该罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)LR‑CO21，其在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC No.M 2019601。该罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)LR‑CO21在肠道内定植性能好，黏附性好，定植后能有效抑制TGEV感染，提高仔猪抵抗病毒侵染、抵抗细菌感染的能力和免疫力。此外，本发明还提供了罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)LR‑CO21株在提高仔猪抗传染病能力中应用的方法。
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