一种新型高分辨定量多色荧光原位杂交方法及其应用

    公开(公告)号:CN103114128A

    公开(公告)日:2013-05-22

    申请号:CN201210369888.7

    申请日:2012-09-27

    Abstract: 本发明涉及一种新型高分辨定量多色荧光原位杂交方法及其应用,利用本发明提供的方法选用的荧光素标记BAC(细菌人工染色体)探针,运用连续荧光原位杂交法即探针洗脱重杂交,每次杂交后在荧光显微镜下对DAPI,Spectrum GreenTM,Cy3TM v1,Texas Red,Cy5,PF-415六个滤光片通路中的荧光信息进行采集,采用计算机自动荧光视野重定位法使每张切片所采集图像精确定位于同一视野,因此可以对单个正常或肿瘤细胞同时进行5-20个基因的分析。本发明提供了一种在单细胞水平筛选和验证多种基因异变的方法,可以用于多种疾病不同亚型的区分也可用于同一个亚型疾病的进一步分类。

    miR-99a作为急性髓系白血病干细胞分子标志的应用

    公开(公告)号:CN105838784B

    公开(公告)日:2019-08-06

    申请号:CN201610171586.7

    申请日:2016-03-23

    Abstract: 本发明提供了miR‑99a作为急性髓系白血病干细胞分子标志的应用,本发明还提供了其在作为评价髓系白血病预后、疾病进展和治疗中的用途。本发明以流式分选和实时荧光定量PCR技术为基础,以白血病患者的骨髓miR‑99a为检测对象,通过比对白血病患者异常细胞群中白血病干细胞和非干性白血病细胞、白血病干细胞和正常造血干细胞中的表达水平,发现miR‑99a在复发和难治患者的白血病干细胞中异常高表达,并且与患者预后不良相关。因此,将miR‑99a作为白血病干细胞的标志物和分子靶标,为白血病的预后评估提供了新的分子标志,同时也为个体化治疗提供了新的分子靶标,用于制备以检测miR‑99a表达为基础的诊断治疗产品,该产品将对肿瘤的治疗具有重要意义和临床应用价值,有广阔的应用前景。

    一种sgRNA的设计方法及构建的慢病毒载体、质粒

    公开(公告)号:CN104928292B

    公开(公告)日:2019-06-14

    申请号:CN201510281885.1

    申请日:2015-05-26

    Abstract: 本发明涉及一种sgRNA的设计方法及构建的慢病毒载体、质粒,该方法中,sgRNA设计的长度为17bp或18bp,sgRNA的末端带有G或A;靶序列为(N16)GNGG、(N16)ANGG、(N16)CNCC或(N16)TNCC;当第一个碱基为A、C或T,在前面加g。在TagScan数据库中搜索基因组中是否有类似序列;对于17bp长的sgRNA,当另有完全匹配的序列,抛弃该sgRNA,再测试其他合适序列;对于18bp长的sgRNA,当另有且只有1个非匹配核苷酸的序列,也抛弃该sgRNA,继续测试其他具有设计的sgRNA序列。本发明优化设计sgRNA的方法,可导致高敲除效率但低脱靶或无脱靶。

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