一种人干细胞的免疫缺陷鼠移植模型的构建方法

    公开(公告)号:CN102920522A

    公开(公告)日:2013-02-13

    申请号:CN201210369276.8

    申请日:2012-09-27

    Abstract: 本发明公开了一种人干细胞的免疫缺陷鼠移植模型的构建方法,包括如下步骤:移植前采用抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸对受体小鼠(NOD/SCID)进行腹腔注射,同时给予受体小鼠含N-乙酰半胱氨酸(NAC)的饮水,将人的干细胞移植后,继续给予受体小鼠含N-乙酰半胱氨酸的饮水,即得该人干细胞的免疫缺陷鼠移植模型。本发明成功建立了NOD/SCID小鼠移植的优化模型,通过本发明的方法,无论是在尾静脉还是髓腔移植时都有效的提高了人干细胞的植入率,移植过程中小鼠死亡率低,状态佳,可以长期存活。该方法简单,新颖,易实施,对小鼠的创伤小,且该方法使用的抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸价格低廉。

    建立iPS的方法
    7.
    发明授权

    公开(公告)号:CN103756969B

    公开(公告)日:2016-04-13

    申请号:CN201410008450.5

    申请日:2014-01-02

    Abstract: 本发明涉及一种建立iPS的方法,该方法包括如下步骤:利用ficoll分离外周血单核细胞,红系培养方法培养8天,将episomal的三个质粒用lonza的Human CD34+CellKit电转到单核细胞中,之后用vitrinectin处理的板子上培养,利用E6培养基培养12-15天后会看到克隆,20天左右将单克隆调到用vitrinectin处理的板子上用E8培养基培养,传代到10后鉴定。本发明建立在无插入的episomal技术上,无FBS,无feeder甚至是无动物源的iPS诱导和培养技术。

    一种抑制PUMA功能改善iPS细胞建立功效的方法

    公开(公告)号:CN103571794B

    公开(公告)日:2016-01-20

    申请号:CN201310306002.9

    申请日:2013-07-19

    Inventor: 程涛 李彦欣

    Abstract: 本发明提供一种抑制PUMA功能改善iPS细胞建立功效的方法,包括以下步骤:(1)PUMA-/-(PUMA基因敲除)小鼠或PUMA-/+小鼠成纤维细胞MEF的制备、传代、冻存;(2)DH5α大肠杆菌株转化质粒PMX-Oct4、PMX-Sox2、PMX-c-Myc和PMX-KLF4,并进行质粒小提和质粒大提;(3)逆转录病毒的包装、滴度测定与冻存;(4)PUMA基因敲除小鼠或PUMA-/+小鼠胚胎成纤维细胞MEF的重编程;(5)敲降PUMA功能的人成纤维细胞的重编程。本发明的有益效果是通过在体细胞重编程步骤中抑制PUMA功能改善iPS细胞建立功效,同时能够保护iPS细胞基因组稳定性。

    一种检测SETD2基因突变的试剂盒

    公开(公告)号:CN103215352B

    公开(公告)日:2015-03-11

    申请号:CN201310107889.9

    申请日:2013-03-29

    Abstract: 本发明涉及一种检测SETD2基因突变的试剂盒,该试剂盒包括扩增SETD2基因的试剂和检测SETD2基因突变的试剂。所述扩增SETD2基因的试剂包括扩增SETD2基因的PCR引物及相应的PCR反应试剂,其中所述扩增SETD2基因的PCR引物为针于SETD2基因21个外显子设计的PCR引物,所述PCR引物序列包括SEQ ID NO:1-SEQ ID NO:64的序列。所述检测SETD2基因突变的试剂包括用于检测SETD2突变的测序引物,所述测序引物序列包括SEQ ID NO:65-SEQ ID NO:103的序列。本发明试剂盒可以对SETD2基因所有已知或未知的突变进行筛选和检测。

Patent Agency Ranking