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公开(公告)号:CN118344986A
公开(公告)日:2024-07-16
申请号:CN202410453794.0
申请日:2024-04-16
Abstract: 本发明涉及利用廉价氮源产β‑胡萝卜素的菌株及其构建方法和应用,所述菌株通过向巴斯德毕赤酵母GS115中导入香叶基二磷酸合酶CrtE、八氢番茄红素合成酶/番茄红素环化酶CrtYB、八氢番茄红素去饱和酶CrtI和3‑羟基‑3‑甲基戊二酰CoA还原酶tHMGR的表达盒得到;所述CrtE的编码基因序列如SEQ ID No:1所示;所述CrtYB的编码基因序列如SEQ ID No:2所示;所述CrtI的编码基因序列如SEQ ID No:3所示;所述tHMGR的编码基因序列如SEQ ID No:4所示。本发明的菌株构建方法简单、高效,得到的重组菌株能够利用廉价氮源高效合成β‑胡萝卜素。
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公开(公告)号:CN114703072B
公开(公告)日:2024-04-12
申请号:CN202210490034.8
申请日:2022-05-07
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了利用3D打印构建好氧真菌和兼性或厌氧微生物共存的方法,将好氧真菌接种至发酵培养基,在发酵培养基上放置带孔隙的支撑材料,使好氧真菌在支撑材料上形成致密的生物膜;通过3D打印将兼性或厌氧微生物制成栅栏结构的活体材料;将所述活体材料放入发酵培养基,与好氧真菌共存并发酵反应。本发明还提供了利用3D打印的容器和活体材料构建的生物反应器。本发明通过好氧真菌在支撑材料和在活体材料上形成的生物膜来实现氧气的消耗,为活体材料内部的兼性或厌氧微生物创造了适宜的生长和生产条件,并通过活体材料和3D打印设备设计了一个生物反应器,利用好氧菌的氧气消耗在生物反应器中产生氧梯度,满足以CBP系统为基础的化学品生产的氧气需求。
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公开(公告)号:CN117801958A
公开(公告)日:2024-04-02
申请号:CN202311661763.6
申请日:2023-12-05
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株高产β‑葡萄糖苷酶的木质纤维素降解菌株及其应用,所述菌株的分类命名为棘孢木霉(Trichoderma asperellum)ML02,已保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 20221877,保藏日期为2022年12月5日。该菌株生长迅速,72 h即能覆盖PDA平板,同时菌丝更加茂密,有利于水解酶的分泌和与底物的结合,降解性能提升。用该菌株可用于直接降解未经预处理的玉米芯和小麦秸秆等木质纤维素,降解率分别为54.6%和56.8%,表明其出色的木质纤维素降解能力和广泛的底物谱。将其与乳酸菌混合培养后,以纤维素为碳源时,乳酸产量168 h就能达到50 g/L,缩短了发酵周期。本发明生物炼制提供了一株性能优异的木质纤维素降解菌株,具有较大的工业发展潜力。
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公开(公告)号:CN114806914B
公开(公告)日:2024-01-30
申请号:CN202210559567.7
申请日:2022-05-20
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种高产β‑胡萝卜素的解脂耶氏酵母菌及其应用。所述重组菌株是在初始菌株po1f基因组插入香叶基香叶基二磷酸合酶、八氢番茄红素脱氢酶、八氢番茄红素合成酶/八氢番茄红素环化酶、3‑羟基‑3‑甲基戊二酰辅酶A还原酶、乙酰辅酶A羧化酶构建得到菌株解脂耶氏酵母Yli‑CAH后,再次插入crtE、crtI、crtYB、柠檬酸裂解酶(ACL)或者tHMGR中至少一种表达盒后得到的。本发明重组解脂耶氏酵母的构建方法,操作简单、高效,可以解除MVA途径的限速步骤,使更多的乙酰CoA转通量流向β‑胡萝卜素的合成,通过过表达柠檬酸裂解酶编码基因,能够提高细胞生长,有利于工业化利用。
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公开(公告)号:CN116970658A
公开(公告)日:2023-10-31
申请号:CN202310878293.2
申请日:2023-07-18
Applicant: 南京工业大学 , 江苏省化工本质安全研究院
Abstract: 本发明公开了一种基于生物炭发酵产丁二酸的方法,包括菌种活化、种子培养和发酵培养,菌种为大肠埃希氏菌(Escherichiacoli)BER208,保藏编号为CCTCCNO:M2012351;所述发酵培养的发酵培养基的配方为:0~70g/L生物炭、0.12g/L甜菜碱、20~80g/L葡萄糖、2.6g/L(NH4)HPO4、0.87g/LNH4H2PO4、0.15g/LKCl、0.37g/LMgSO4·7H2O、2.4g/LFeCl3·6H2O、0.1g/LH3BO3、0.3g/LCoCl2·6H2O、0.15g/LCuCl2·2H2O、0.5g/LZnCl2·4H2O、0.5g/LNaMoO4·2H2O、0.5g/LMnCl2·4H2O,溶剂为水。本方法丁二酸的产量最高达到78.90g/L,收率为0.98g/g且本发明的方法能够有效降低发酵产物中甲酸等副产物的含量。与传统的化学法生产的丁二酸相比,生物法所得的天然丁二酸具有高效、环保等优点,具有广阔的市场前景。
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公开(公告)号:CN114921504B
公开(公告)日:2023-07-07
申请号:CN202210128191.4
申请日:2022-02-11
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12P7/6463 , C12P23/00 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了变温发酵生产微生物油脂和类胡萝卜素的方法,包括制备斜面单菌落、种子活化、发酵培养,发酵培养过程中分阶段进行温度调控,具体为:第一阶段:时长36‑60h,发酵温度30℃;第二阶段:时长6h,发酵温度25℃;第三阶段:时长54‑78h,发酵温度22℃;发酵的总时长为120h。本发明所述变温发酵圆红冬孢酵母菌生产微生物油脂和类胡萝卜素的方法,可同时实现高菌株生长量、高微生物油脂含量、高类胡萝卜素含量,降低了发酵成本、提高了发酵效率,降低了生产成本,能够为工业化生产带来巨大的经济效益。
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公开(公告)号:CN114107081B
公开(公告)日:2023-05-05
申请号:CN202111442005.6
申请日:2021-11-30
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开一种利用甲醇生物转化的重组解脂耶氏酵母基因工程菌,其是在宿主菌解脂耶氏酵母的基因组中导入甲醇氧化酶基因aox、过氧化氢酶基因cta、二羟丙酮合酶基因das、二羟丙酮激酶基因dak、木糖还原酶基因xyr、木糖醇脱氢基因xdh、木酮糖激酶基因xyk、1,6‑果糖双磷酸酶基因fbp、1,6‑二磷酸果糖醛缩酶基因fba和转醛缩酶基因tal后得到,同时提出了上述基因工程菌的构建方法和应用。本发明利用合成生物学的方法将甲醇同化途径、木糖利用途径及过氧化物酶体内木桐糖五磷酸循环途径引入解脂耶氏酵母中,从而实现解脂耶氏酵母酵母以非食品级原料甲醇和木糖作为共底物碳源生产柠檬酸,在一定的程度上降低了生产成本,具有重大的意义和经济价值。
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公开(公告)号:CN115820761A
公开(公告)日:2023-03-21
申请号:CN202211503997.3
申请日:2022-11-28
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种生物法催化合成D‑葡萄糖醛酸的方法。利用重组大肠杆菌PET‑28(+)‑Mm‑MIOX表达来自小鼠(Marmota monax)的肌醇加氧酶,反复冻融后加入底物肌醇进行全细胞催化反应,得D‑(+)‑葡萄糖醛酸。其中,所述的酶包括来自小鼠(Marmota monax)的肌醇加氧酶Mm‑MIOX,诱导产酶的诱导剂为0.1M的异丙基‑β‑D‑硫代半乳糖苷,通过反复的冻融可以有效地提高底物肌醇的转化率,从而提高D‑葡萄糖醛酸的产量。本发明方法原料利用率高,D‑葡萄糖醛酸转化率高,步骤简捷,生产成本低,污染小,对环境影响小,可实现D‑葡萄糖醛酸的规模化生产。经重组大肠杆菌生产的肌醇氧化酶,以8g/L肌醇为底物,全细胞催化反应的D‑葡萄糖醛酸产量能达到5.62g/L,转化率高达86.3%。
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公开(公告)号:CN115197977A
公开(公告)日:2022-10-18
申请号:CN202210758427.2
申请日:2022-06-30
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用功能互补的真菌‑细菌混菌体系实现木质纤维素合成乳酸的方法,包括以下步骤:(1)将活化的棘孢木霉接种到含有微晶纤维素的发酵培养基中进行发酵,得到发酵液;(2)将活化的副干酪乳杆菌接种到步骤(1)得到的发酵液中,厌氧发酵生产乳酸。当棘孢木霉培养了40 h时接入副干酪乳杆菌,乳酸产量最高,达到57.59 g/L,该方法是目前利用微晶纤维素为唯一碳源时混菌发酵得到的最高乳酸产量,同时,该方法还可以应用到直接以木质纤维素为原料合成乳酸的发酵过程中,在以玉米芯为底物的发酵培养基中进行发酵,可产生9.80 g/L的乳酸,极大降低了工业生产乳酸的底物成本,具有重要的应用价值。
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公开(公告)号:CN114258923B
公开(公告)日:2022-10-14
申请号:CN202111662228.3
申请日:2021-12-30
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种棘孢木霉微生物菌剂在防治农作物病害中的应用,所述菌株的分类命名为棘孢木霉(Trichoderma asperellum),已保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 20211179,保藏日期为2021年9月15日。所述棘孢木霉可抑制诸多病原真菌的生长,可有效防治尖孢镰刀菌、小麦全蚀病菌、黄瓜褐斑病菌、西瓜枯萎病菌、南瓜叶斑病菌、辣椒疫霉病菌、黄瓜枯萎病菌等引起的农作物病害。该微生物菌剂对环境及植物无毒害作用,并对农作物生长具有一定的促生作用,可应用在制备防止农作物致病菌拮抗菌剂中。
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