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公开(公告)号：CN108676851B
公开(公告)日：2021-09-07
申请号：CN201810748731.2
申请日：2018-07-10
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6844 , C12Q1/6895 , C12Q1/04 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于基因工程领域，公开了一种检测致病疫霉的环介导等温扩增引物组合物及其应用。致病疫霉病菌的检测靶标为PiSMC，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，该靶标序列特异性的LAMP引物组合物，正向内引物FIP如SEQ ID NO.2所示，反向内引物BIP如SEQ ID NO.3所示，正向外引物F3如SEQ ID NO.4所示，反向外引物B3如SEQ ID NO.5所示，反向环引物LB如SEQ ID NO.6所示。本发明的检测体系在LAMP扩增条件下，能快速、高效、高特异、高灵敏地检测到致病疫霉病菌，同时可以肉眼观察检测结果。因此，对于田间马铃薯晚疫病病害的检测具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN113174423A
公开(公告)日：2021-07-27
申请号：CN202110263303.2
申请日：2021-03-11
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明目的在于提供一种植物疫霉菌荧光素酶标记菌株的制备方法及其在植物疫病防控中的应用，制备表达荧光素酶的病原菌，使用该病原菌的游动孢子、菌丝、卵孢子或菌饼接种植物，侵染一定时间后添加荧光素酶底物，统计病斑长度或面积；以病斑长度或面积衡量农作物抗性或不同类型潜在抗病资源对病原菌的抑制或促进作用。本发明具有快速、简便、定量、高通量地检测疫病菌发病进程的特点，适用于精准评估各种疫病防控方法的效果，且本发明提供的思路适用于植物病原菌，可广泛应用于抗病资源筛选领域。
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公开(公告)号：CN112195111A
公开(公告)日：2021-01-08
申请号：CN202011074081.1
申请日：2020-10-09
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种GFP标记的终极腐霉PyuLK1及其应用。GFP标记的终极腐霉(Pythium ultimum)PyuLK1，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2020年7月20号，保藏编号为CGMCC No.20225。本发明终极腐霉PyuLK1荧光稳定性强，本发明获得的菌株在无G418选择培养基下多代培养(＞5代)，菌株仍具有稳定强度的荧光，极大地便利了后续的研究。该菌株与野生型菌株在生长速率、致病性、卵孢子数量指标方面均无显著差异，可作为终极腐霉的基因工程菌株，为终极腐霉的防治提供理论依据。
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公开(公告)号：CN107699579B
公开(公告)日：2020-12-15
申请号：CN201711067417.X
申请日：2017-11-03
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供一种提高植物抗病性的基因及其应用，属于植物分子生物学与植物遗传工程领域，本发明涉及一种植物源抗病基因ReXEG1及其重组表达载体和应用。该基因来源于烟草，具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，其编码的产物氨基酸序列为SEQ ID NO.3。本发明还提供一种基因沉默和重组表达载体，包括本发明所述的基因ReXEG1。该基因对烟草抗疫霉菌具有关键作用。过表达该基因显著性促进烟草对不同疫霉菌的抗病性，是一种理想的增强植物抗病性的基因。通过遗传转化的方法使该基因在烟草中表达使其获得对多种病原菌的抗性能力，从而可以提高作物田间抗病性。本发明可以运用在作物育种抗病性改良方面。
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公开(公告)号：CN111676311A
公开(公告)日：2020-09-18
申请号：CN202010604316.7
申请日：2020-06-29
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种用于检测刺腐霉菌的LAMP引物组合物、试剂盒及其检测方法。一种用于检测刺腐霉菌的LAMP引物组合物：正向内引物FIP如SEQ ID NO.1所示，反向内引物BIP如SEQ ID NO.2所示，正向外引物F3如SEQ ID NO.3所示，反向外引物B3如SEQ ID NO.4所示，正向环引物LF如SEQ ID NO.5所示,反向环引物LB如SEQ ID NO.6所示。与传统的依据形态特征来鉴定刺腐霉菌的检测技术相比，本发明具备更高的准确性、灵敏度和实效性，而且操作方便、实用性好，为刺腐霉菌的检测提供了新的技术平台，可用于刺腐霉菌的高灵敏度快速检测。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110938650A
公开(公告)日：2020-03-31
申请号：CN201911298590.X
申请日：2019-12-17
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/82 , C12Q1/6897
Abstract: 本发明提供一种mRNA可变剪切-荧光素酶报告系统及其应用，所述的可变剪切-荧光素酶报告系统，包含番茄RLPK基因的可变剪切区域序列和荧光素酶报告基因LUC序列。本发明还提供一种可变剪切-荧光素酶报告系统的转基因烟草种子，利用农杆菌介导的瞬时过表达技术，在该转基因烟草叶片上表达外源基因；或者利用农杆菌介导的基因沉默技术，在该转基因烟草叶片上沉默烟草的內源基因，通过检测荧光素酶活性的变化来判断待测基因编码蛋白是否参与植物mRNA的可变剪切过程。本发明为快速筛选外源基因或植物内源基因是否调控植物mRNA可变剪切过程提供一套重要的技术手段。
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公开(公告)号：CN110938118A
公开(公告)日：2020-03-31
申请号：CN201911298598.6
申请日：2019-12-17
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种致病疫霉菌分泌的植物免疫激活蛋白PC2及其应用，该植物免疫激活蛋白PC2具有如SEQ ID NO：2所示氨基酸序列的蛋白质。本发明研究发现PC2能够被植物免疫系统识别产生免疫反应，为提高植物抗性提供了新的途径。最小片段PC2138-198能够诱导植物防卫反应，有望合成有功能的肽段，为生物农药合成提供新的材料。本发明可以运用在定向改造新型有益共生菌、作物育种抗病性改良方面和生物农药等方面，有望提高植物对疫病的抗病性，从而达到增产减药的目的，因而在农业生产上具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN109652431A
公开(公告)日：2019-04-19
申请号：CN201910143225.5
申请日：2019-02-26
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/57 , C12N9/50 , C12N15/82 , C12N1/21 , A01H5/00 , A01H6/54 , A01H6/82 , C12R1/01 , C12R1/19
Abstract: 本发明提供一种提高植物抗病性的基因GmAP1及其应用，属于植物分子生物学与植物遗传工程领域，本发明涉及一种植物源抗病基因GmAP1及其重组表达载体和应用。该基因来源于大豆，具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，或与序列SEQ ID NO.1具有70％以上同源性。本发明还提供一种基因沉默和重组表达载体。过表达该基因显著性促进大豆对大豆疫霉菌的抗病性以及促进烟草对辣椒疫霉菌的抗病性，是一种理想的增强植物抗病性的基因。通过遗传转化的方法使该基因在大豆或烟草中表达使其获得对多种病原菌的抗性能力，从而可以提高作物田间抗病性。本发明可以运用在作物育种抗病性改良方面。
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公开(公告)号：CN105256049B
公开(公告)日：2019-01-25
申请号：CN201510758279.4
申请日：2015-11-09
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种检测黄色镰孢菌的环介导等温扩增引物组合物及其应用。所述的引物组合物由SEQ ID NO.2所示的正向外引物CYP51C‑F3，SEQ ID NO.3所示的反向外引物CYP51C‑B3，SEQ ID NO.4所示的正向内引物CYP51C‑FIP，SEQ ID NO.5所示的反向内引物CYP51C‑BIP，SEQ ID NO.6所示的环引物CYP51C‑LF，SEQ ID NO.7所示的环引物CYP51C‑LB组成。本发明解决了现有黄色镰孢菌的检测方法所需周期长、费时费力、繁琐、特异性偏低的问题，所需检测时间短(仅需85min)、特异性强、灵敏度高、可肉眼观察检测结果。
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公开(公告)号：CN105907863A
公开(公告)日：2016-08-31
申请号：CN201610297980.5
申请日：2016-05-06
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6895 , C12Q1/686 , C12Q2561/113 , C12Q2563/107 , C12Q2545/114 , C12Q2531/113
Abstract: 一种测定大豆疫霉菌对抗病基因Rps1b毒性的分子方法，包括以下步骤：将待检测大豆疫霉菌接种于大豆叶片上，12小时后提取待检测大豆疫霉菌的总RNA；以提取的总RNA为模版进行逆转录，得到cDNA反应液；采用毒性检测引物AVR1BR2F/ AVR1BR2R，以所得cDNA反应液为模版进行实时荧光定量PCR，如果在实时荧光定量PCR扩增过程中能够检测到无毒基因Avr1b?1的转录，则对应的待检测大豆疫霉菌为无毒菌株，否则为毒性菌株。本发明能够快速准确的测定出待检测大豆疫霉菌对抗病基因Rps1b的毒性，并为大量、快速和准确鉴定大豆疫霉菌的生理小种或致病型提供有力支持。
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