公开(公告)号：CN115161287B

公开(公告)日：2024-03-01

申请号：CN202110369372.1

申请日：2021-04-06

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 周磊 ,  王扬 ,  杨汉春 ,  盖新娜 ,  张永宁 ,  韩军 ,  郭鑫

IPC: C12N7/00 ,  C12N15/11 ,  C12N15/63 ,  C12Q1/70 ,  A61P31/14 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种重组猪繁殖与呼吸综合征病毒及其构建方法和应用。所述重组猪繁殖与呼吸综合征病毒为：基因序列中含有HiBiT序列的猪繁殖与呼吸综合征病毒。本发明通过将HiBiT序列插入猪繁殖与呼吸综合征病毒的序列中，构建得到了一种具有荧光酶特性，同时可以正常增殖的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒。该重组猪繁殖与呼吸综合征病毒具备较好的遗传稳定性，通过该重组病毒可以准确快速地实现病毒的定量检测和抗病毒药物的筛选。

公开(公告)号：CN116694789A

公开(公告)日：2023-09-05

申请号：CN202310559526.2

申请日：2023-05-18

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 郭鑫 ,  康浩然 ,  张永宁 ,  杨汉春 ,  盖新娜 ,  周磊 ,  韩军

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明提供一种检测猪格拉瑟氏菌的RAA引物对和探针组合及试剂盒，可以简单、快速、灵敏、特异性检测使猪格拉瑟氏菌。所提供的RAA引物对和探针，其中引物对中上游引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:1，下游引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:2，所述的探针的核苷酸序列为SEQ ID NO:3。本发明所提供的基于上述引物对和探针用于检测猪格拉瑟氏菌的RAA试剂盒，只需在42℃恒温条件下反应30min即可完成，整个反应过程对仪器设备要求低，耗时短，操作简单，结果可实现肉眼可视化，更适用于基层现场诊断和即时检测，真正意义上实现了便携式快速核酸检测，可为格拉瑟氏病的快速诊断、实时监测防控提供技术支持。

公开(公告)号：CN115976281B

公开(公告)日：2023-07-25

申请号：CN202211450766.0

申请日：2022-11-18

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 王少林 ,  左扬 ,  沈张奇 ,  周磊 ,  韩军 ,  沈建忠

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6893 ,  C12Q1/689 ,  C12Q1/6869 ,  C12Q1/14 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  C12R1/21 ,  C12R1/01 ,  C12R1/46 ,  C12R1/90 ,  C12R1/35 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明提供了一种通过高通量靶向测序实现猪15种病原同时检测的引物组及应用，涉及靶标基因检测的高通量技术领域，所述通过高通量靶向测序实现猪15种病原同时检测的引物组，包括核苷酸序列如SEQ IDNO.1～SEQ ID NO.302所示的引物，所述病原靶标基因核苷酸序列如SEQ IDNO.303～SEQ ID NO.344所示。本发明所述引物组用于针对15种猪呼吸道病原的42种靶标基因扩增子测序检测分析方法，具有快速、高效、高靶向、特异性强等技术优点，适用于猪场患病猪的病原快速、准确与多病原同时诊断。

公开(公告)号：CN116287460A

公开(公告)日：2023-06-23

申请号：CN202310211472.0

申请日：2023-03-07

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 张永宁 ,  王文龙 ,  周磊 ,  盖新娜 ,  韩军 ,  郭鑫 ,  杨汉春

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/6804 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了PEAV的RAA‑CRISPR/Cas12a检测组合物、反应装置、试纸条及试剂盒，基于RAA和CRISPR/Cas12a技术相结合的PEAV核酸快速可视化检测方法的引物对、向导RNA(gRNA)、探针、反应装置、试纸条和试剂盒，以PEAV的N基因为诊断靶标，设计、筛选、优化并最终获得了能够特异性检测PEAV核酸的通用引物对、通用向导RNA以及两种不同探针。在实现对PEAV快速、特异、灵敏和便携检测的同时，本发明提供的反应装置有效避免了扩增子开盖转移极易造成气溶胶污染和检测时间延长的问题，适用于PEAV的现场、快速、可视化检测，应用前景广阔。

公开(公告)号：CN115852042A

公开(公告)日：2023-03-28

申请号：CN202210831910.9

申请日：2022-07-15

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 韩军 ,  王晨 ,  王迪 ,  李劼 ,  杨汉春 ,  盖新娜 ,  周磊 ,  张永宁 ,  郭鑫 ,  高鹏

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6841 ,  C12Q1/6851 ,  A61K39/225 ,  A61P31/14 ,  A01K67/02 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了基于反向遗传操作的PEDV嵌合病毒致弱的鉴定方法及筛选潜在弱毒疫苗的应用，通过构建并拯救PEDV嵌合病毒CHM2013‑SPBJ、CHM2013‑SBJ、CHM2013‑SPBJ‑ORF3CHM、CHM2013‑SPBJ‑ECHM、CHM2013‑SPBJ‑MCHM、CHM2013‑SPBJ‑NCHM和CHM2013‑(S+ORF3)BJ，进行功能丧失性试验和功能获得性试验，得到致弱嵌合病毒CHM2013‑SPBJ‑ORF3CHM和CHM2013‑SPBJ‑MCHM，揭示了PEDV变异株BJ2011C S基因协同ORF3、E和M基因促进病毒致病，其中ORF3基因最关键。

公开(公告)号：CN113969267A

公开(公告)日：2022-01-25

申请号：CN202111369459.5

申请日：2021-11-15

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 韩军 ,  高鹏 ,  杨汉春 ,  刘园园 ,  张永宁 ,  周磊 ,  盖新娜 ,  郭鑫

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/86 ,  C07K14/005 ,  A61K39/12 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明涉及病毒基因工程技术领域，具体地，涉及一种猪繁殖与呼吸综合征突变病毒RvJXwn‑nsp1β‑VS19GG，并进一步公开其构建方法与应用。本发明所述猪繁殖与呼吸综合征突变病毒RvJXwn‑nsp1β‑VS19GG，利用反向遗传操作技术，通过将高致病性PRRSV毒株JXwn06在非结构蛋白nsp1β的第19位缬氨酸和20位丝氨酸均突变为甘氨酸，进而构建得到所需突变病毒。所述突变病毒不仅遗传性状稳定，并且由于关键氨基酸位点的突变明显改变了亲本毒株诱导炎症反应的能力，使得所述突变病毒感染宿主细胞诱导强烈炎症反应，可以作为疫苗研发的候选毒株，为设计增强细胞免疫疫苗提供新的思路。

公开(公告)号：CN111549028A

公开(公告)日：2020-08-18

申请号：CN202010383517.9

申请日：2020-05-08

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 刘剑锋 ,  胡蒸蒸 ,  周磊

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/63 ,  C12N5/10 ,  C12N1/21 ,  A61K31/713 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体公开了一种shRNA及其应用。本发明的shRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供一种包含编码所述的shRNA的DNA片段的表达载体，包含该表达载体的细胞、包含所述的shRNA的细胞和药物，及其它们在抑制PEDV的M基因表达和制备治疗PEDV的药物中的应用。本发明的shRNA表达质粒安全无毒，能显著抑制猪流行性腹泻病毒的复制，使得PEDV的M基因表达抑制，具有广阔应用前景。

公开(公告)号：CN104593336A

公开(公告)日：2015-05-06

申请号：CN201410823151.7

申请日：2014-12-25

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 盖新娜 ,  杨汉春 ,  郭鑫 ,  周磊 ,  张家龙 ,  颜忠 ,  姚晟晨

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/85 ,  C12N15/66 ,  A61K39/12 ,  A61P31/14 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明提供了一种猪繁殖与呼吸综合征嵌合病毒RvHBJX及其应用，属于病毒基因工程技术领域。本发明的猪繁殖与呼吸综合征嵌合病毒RvHBJX是以低致病性PRRSV毒株HB-1/3.9为骨架包含高致病性PRRSV毒株JXwn06结构蛋白编码区的嵌合病毒，该嵌合病毒经MARC-145细胞体外连续传代80次，该病毒遗传性质表现稳定；病毒对宿主细胞的适应性随传代次数的增加逐渐增强；嵌合病毒传代60次(P60)及以上对本体动物具有较好的安全性，且接种后能够对高致病性PRRSV毒株感染提供100％的免疫保护，可作为猪繁殖与呼吸综合征的疫苗侯选株，用于预防猪繁殖与呼吸综合征，具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN119249086B

公开(公告)日：2025-03-28

申请号：CN202411774537.3

申请日：2024-12-05

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 刘剑锋 ,  周磊 ,  李思雨 ,  刘振 ,  卓越 ,  杜恒

IPC: G06F18/15 ,  G06Q50/02 ,  G06F18/2431 ,  G06F18/27

Abstract: 本发明公开了一种种猪生长性能数据的质控与填充方法及系统，涉及种猪数据处理领域，方法步骤包括：采集种猪生长性能数据并进行预处理，种猪生长性能数据包括体重数据和采食量数据；利用回归分析方法，结合Tukey权重函数以及稳健回归方法，对处理后的体重数据进行质控；根据缺失数据的类型，采用线性插值法和拟合二项式回归法对处理后的体重数据进行填充；基于处理后的采食量数据识别若干种异常采食行为类型，将出现异常类型的采食量设为空缺，然后使用线性混合模型对无异常数据进行校正，基于栏位、体重、日增重和异常类型频率，通过Loess局部加权回归法填充缺失的采食量数据。

公开(公告)号：CN117159527A

公开(公告)日：2023-12-05

申请号：CN202210583728.6

申请日：2022-05-25

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 周磊 ,  王扬 ,  杨汉春 ,  盖新娜 ,  韩军 ,  张永宁 ,  郭鑫

IPC: A61K31/194 ,  A61K31/225 ,  A61P11/00 ,  A61P31/14 ,  C07C57/13

Abstract: 本发明涉及生物制品技术领域，尤其涉及衣康酸在抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒的方法。衣康酸是三羧酸循环重编的产物，由顺乌头酸脱羧酶催化顺乌头酸脱羧产生，本发明通过外源添加能够穿过细胞膜的衣康酸衍生物4‑辛基衣康酸在MARC‑145细胞和PAMs上能高效的抑制PRRSV的复制，在200μM浓度以上可以完全抑制病毒增殖，并且该药物细胞毒性较低，在200μM时未见对细胞活性的影响。本发明同时研究发现衣康酸通过烷基化Keap1激活Nrf2，诱导HO‑1的高表达从而发挥抗PRRSV活性，这对于PRRSV的防治具有重要意义。