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公开(公告)号：CN107446872A
公开(公告)日：2017-12-08
申请号：CN201710756881.3
申请日：2017-08-29
Applicant: 东北农业大学
CPC classification number: C07K14/005 , A61K39/12 , A61K2039/552 , C12N15/65 , C12N15/66 , C12N15/74 , C12N2750/14322 , C12N2750/14334
Abstract: 本发明公开一种组成型表达兔病毒性出血症病毒VP60蛋白的重组乳酸菌疫苗株及其制备方法和用途。所述的重组乳酸菌疫苗株含有EGFP标记的组成型表达兔病毒性出血症病毒VP60蛋白的乳酸菌表达质粒。本发明利用乳酸菌为疫苗抗原传递载体，以兔病毒性出血症病毒VP60蛋白为免疫原制备重组乳酸菌口服疫苗诱导动物机体产生免疫应答，能够有效地刺激机体产生局部黏膜免疫应答，又能刺激机体的体液免疫应答，以达到预防兔病毒性出血症病毒的感染的目的。此外，本发明以增强型绿色荧光蛋白EGFP作为筛选标记，构建非抗生素抗性筛选标记的基因工程乳酸菌，符合绿色、环保的发展理念。
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公开(公告)号：CN107271667A
公开(公告)日：2017-10-20
申请号：CN201710415171.4
申请日：2017-06-05
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/577
CPC classification number: G01N33/56983 , G01N33/558 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种蓝舌病病毒型特异性竞争ELISA检测试剂盒及其应用。所述试剂盒包括以下两组组分：组分I中包括包被蓝舌病病毒抗原I的酶标板和用于蓝舌病病毒型特异性检测的单克隆抗体I，所述的单克隆抗体I由杂交瘤细胞株8B3G11分泌产生；组分II中包括包被蓝舌病病毒抗原II的酶标板和用于蓝舌病病毒型特异性检测的单克隆抗体II，所述的单克隆抗体II由杂交瘤细胞株8B5D4分泌产生。本发明利用制备的两株8型BTV VP2单克隆抗体8B5D4以及8B3G11建立了蓝舌病病毒型特异性检测的联合竞争ELISA检测方法，该检测方法短时间内可以用于初步区分不同型蓝舌病感染的动物血清，实验条件要求低，适合于大规模的BTV血清抗体检查。
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公开(公告)号：CN107179408A
公开(公告)日：2017-09-19
申请号：CN201710318544.6
申请日：2017-05-08
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/68
CPC classification number: G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种用于蓝舌病病毒型特异性检测的竞争ELISA检测试剂盒及其应用。所述试剂盒包括以下两组组分：组分I中包括包被蓝舌病病毒抗原I的酶标板和用于蓝舌病病毒型特异性检测的单克隆抗体I，所述的单克隆抗体I由杂交瘤细胞株1B6分泌产生；组分II中包括包被蓝舌病病毒抗原II的酶标板和用于蓝舌病病毒型特异性检测的单克隆抗体II，所述的单克隆抗体II由杂交瘤细胞株4A‑1G7分泌产生。本发明利用制备的两株4型BTV VP2单克隆抗体4A‑1G7以及1B6建立了蓝舌病病毒型特异性检测的联合竞争ELISA检测方法，该检测方法短时间内可以用于初步区分不同型蓝舌病感染的动物血清，实验条件要求低，适合于大规模的BTV血清抗体检查。
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公开(公告)号：CN106987548A
公开(公告)日：2017-07-28
申请号：CN201710229189.5
申请日：2017-04-10
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种同时表达产气荚膜梭菌α、β2、ε、β1外毒素的重组乳酸杆菌及其构建方法和应用。本发明以从基因水平去毒性化改造的产气荚膜梭菌α、β1、β2和ε外毒素为免疫原，改造后的外毒素完全失去致病性，但仍保留其免疫原性，同时以乳酸杆菌作为传递与表达免疫抗原的安全级活菌载体，构建得到了一株能够同时表达产气荚膜梭菌α、β2、ε、β1外毒素的重组乳酸杆菌，并且创制了能够有效预防5个血清型产气荚膜梭菌感染的基因工程乳酸杆菌多价亚单位类毒素口服免疫制剂。本发明的提出为预防产气荚膜梭菌感染提供了有效的技术手段。
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公开(公告)号：CN103555754B
公开(公告)日：2015-09-30
申请号：CN201310521441.1
申请日：2013-10-29
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种干酪乳杆菌菌影及其制备方法和应用，属于生物技术领域。本发明选择干酪乳杆菌作为研究对象，通过分离干酪乳杆菌的噬菌体，预测并克隆其裂解基因，将含有克隆得到的裂解基因的重组载体转化干酪乳杆菌，诱导裂解基因表达后制成菌影。本发明以干酪乳杆菌菌影作为抗原传递载体使用，做到了真正意义上的安全可靠。此外，干酪乳杆菌菌影可通过发酵大量生产，冻干后在室温下可保存较长时间，为进一步应用于生产实践降低了成本，也为进一步设计新型安全有效的药物，特别是疫苗的递送系统，从而应用于预防及治疗疾病提供了一种新的思路和方法。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103689247A
公开(公告)日：2014-04-02
申请号：CN201310594969.1
申请日：2013-11-22
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明涉及一种作为断乳仔猪饲料添加剂的表达乳铁蛋白重组乳酸菌组合物，其特征在于，所述组合物将戊糖乳杆菌（Lactobacillus pentosus KLDS1.0413）和植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum KLDS1.0344）作为口服活载体，其中，戊糖乳杆菌和植物乳杆菌中均含有连接有PLF基因的穿梭表达载体pPG612.1。本发明可以替代抗生素，乳铁蛋白还能刺激肠道细胞的生长，增加肠道中有益菌群，如双歧杆菌和乳酸杆菌等的数量，减少大肠杆菌等有害菌群的繁殖，从而保障仔猪肠道健康发育，增强仔猪肠道对营养物质的消化、吸收能力，降低腹泻率，提高其生长性能，促进仔猪生长。
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公开(公告)号：CN103555754A
公开(公告)日：2014-02-05
申请号：CN201310521441.1
申请日：2013-10-29
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种干酪乳杆菌菌影及其制备方法和应用，属于生物技术领域。本发明选择干酪乳杆菌作为研究对象，通过分离干酪乳杆菌的噬菌体，预测并克隆其裂解基因，将含有克隆得到的裂解基因的重组载体转化干酪乳杆菌，诱导裂解基因表达后制成菌影。本发明以干酪乳杆菌菌影作为抗原传递载体使用，做到了真正意义上的安全可靠。此外，干酪乳杆菌菌影可通过发酵大量生产，冻干后在室温下可保存较长时间，为进一步应用于生产实践降低了成本，也为进一步设计新型安全有效的药物，特别是疫苗的递送系统，从而应用于预防及治疗疾病提供了一种新的思路和方法。
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公开(公告)号：CN101050450A
公开(公告)日：2007-10-10
申请号：CN200710071893.9
申请日：2007-03-16
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明提供的是一种β－葡萄糖苷酸酶在干酪乳杆菌表达系统中的诱导表达方法。以干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393为宿主菌，通过细胞表面表达载体pPG611.1以及细胞外分泌表达载体pPG612.1表达β－葡萄糖苷酸酶。本发明确定目的蛋白均在细胞内产生，细胞表面表达的目的蛋白结合在细胞壁上，而分泌表达的目的蛋白并未在上清中出现，实际上仍然结合在菌体上。本发明使用D－木糖作为诱导物诱导目的蛋白的表达；同时根据干酪乳杆菌的生长特性，从多方面探索了gusA的最佳诱导表达条件，该系统的高效表达为抗原传递奠定了基础。
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公开(公告)号：CN1300583C
公开(公告)日：2007-02-14
申请号：CN200510009701.2
申请日：2005-02-02
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/531 , G01N33/569 , G01N1/28
Abstract: 本发明提供的是取发病猪的粪便与裂解液以1∶8-12的比例进行混合，室温静置10分钟，2000g离心2分钟后，上清液即为含有高滴度病毒的抗原试剂，其中所用的裂解液是含有500mmol/L Tris-HCl，pH8.3，20%PVP-40，1%PEG 6000，140mmol/L NaCl和0.05%Tween 20的溶液。本发明的方法对猪传染性胃肠炎发病猪粪便使用特异的裂解液进行裂解，使病毒从细胞中释放出来从而为诊断本病提供了一种特异性强的诊断抗原，大大缩短了疾病诊断的时间，为猪传染性胃肠炎的及早发现及预防争得了宝贵的时间和经济效益。
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公开(公告)号：CN119530134A
公开(公告)日：2025-02-28
申请号：CN202510103996.7
申请日：2025-01-23
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪肠类器官与淋巴细胞共培养体系及其构建方法和应用，属于病毒培养技术领域。所述的共培养体系是由猪回肠类器官与猪小肠上皮内淋巴细胞通过共培养后得到。使用所述的共培养体系在不添加胰酶的情况下，PEDV仍然可以感染类器官，且使用该共培养体系分离培养PEDV野毒株，在盲传第四代时可观察到类器官病变，而此时其在Vero细胞上没出现病变。RT‑PCR鉴定发现，PEDV野毒株在该共培养体系上连续传代五代均可扩增出条带，而无论是否添加胰酶，PEDV在Vero细胞上连续盲传五代均没有扩增出条带。本发明的提出对了解PEDV发病机制及开发预防PEDV感染的新药物以及疗法具有重要意义。
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