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公开(公告)号：CN108018278A
公开(公告)日：2018-05-11
申请号：CN201810060068.7
申请日：2018-01-22
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种催化效率提高的D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体，属于酶工程技术领域。本发明提供的一种Dorea sp.DPEase的突变体酶A38E/G105A，其最适催化条件没有发生改变，在最适催化条件下，酶催化底物D‑果糖生成D‑阿洛酮糖的相对酶活则提高了38.6％，这一发现对于工业化制备D‑阿洛酮糖具有重要的研究价值。
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公开(公告)号：CN115960879B
公开(公告)日：2025-01-21
申请号：CN202310086878.0
申请日：2023-01-30
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/90 , C12N15/61 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12P19/24 , C12P19/02 , C12Q1/533 , G01N21/35 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体文库的高通量筛选方法及获得的突变体，属于酶工程技术领域。本发明所提供的高通量筛选方法是基于在酸性Si(IV)–Mo(Ⅵ)显色液中，D‑果糖可将黄色钼酸盐Mo(Ⅵ)还原，生成蓝色钼酸盐Mo(V/Ⅵ)，其颜色深浅在一定范围内与D‑果糖的含量成正比，且在相同浓度水平下，D‑阿洛酮糖不会干扰D‑果糖的测定。同时，本发明还提供了D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶四点突变体，与该酶野生型相比，其在60℃下孵育1h后的残余酶活提升69.8％，最适温度提高5℃，在60℃下的半衰期值由0.64h增加到7.30h，因此其工业应用潜力得到明显提升。
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公开(公告)号：CN118834922A
公开(公告)日：2024-10-25
申请号：CN202410898690.0
申请日：2024-07-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种特异性合成低分子量菊糖的菊糖蔗糖酶及其应用，其将氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示的蛋白质作为菊糖蔗糖酶应用在合成菊粉中，其通过潜在的“非延续性”糖链延伸机制，特异性地合成了聚合度为3～40、平均分子量为2.1×103g/mol的菊糖，而不积累高分子量的菊糖。本发明实现了低分子量菊糖的高效生物合成，产率达50.6％，且生产成本低，所用设备少，具备工业规模化生产的潜力。
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公开(公告)号：CN118773169A
公开(公告)日：2024-10-15
申请号：CN202410935114.9
申请日：2024-07-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种菊糖蔗糖酶突变体及其应用，本发明将来源于微生物Neobacillus bataviensis的菊糖蔗糖酶作为亲本，利用基因突变技术，将其149位的苏氨酸Thr替换成丝氨酸Ser，获得菊糖蔗糖酶的突变体酶，其氨基酸序列如SEQ ID No:1所示；本发明获得的菊糖蔗糖酶的突变体酶在最适催化条件下催化底物蔗糖合成菊糖过程中，相对总酶活相较于未突变前提升了57％，极大的加快了菊糖酶法合成的工业化进程。
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公开(公告)号：CN118147104A
公开(公告)日：2024-06-07
申请号：CN202410355821.0
申请日：2024-03-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种α1,3/4‑岩藻糖基转移酶突变体及其生物合成二岩藻糖基乳糖的方法，属于生物工程技术领域。本发明将来源于幽门螺杆菌UA948的α1,3/4‑岩藻糖基转移酶基因HP3/4FT分为区域1，2和3，在区域内选择特定点进行突变，并分别进行区域内组合突变及区域间组合突变，最终获得了多个有益的α1,3/4‑岩藻糖基转移酶突变体。相较于未突变的野生型菌株，二岩藻糖基乳糖的产量出现了明显的提升，其中二岩藻糖基乳糖在摇瓶的最高滴度为7.25g/L，是野生型菌株的1.37倍。分批补料培养条件下，在5L发酵罐中的产量可达45.81g/L，具备良好的DFL产业化应用潜力。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115960812A
公开(公告)日：2023-04-14
申请号：CN202310014321.6
申请日：2023-01-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高产L‑岩藻糖的重组大肠杆菌的构建方法及应用，属于微生物基因工程领域。本发明以高产2′‑岩藻糖基乳糖工程菌为宿主，通过游离表达α‑L‑岩藻糖苷酶得到分解效率更高的α‑L‑岩藻糖苷酶AcfA。针对L‑岩藻糖被竞争途径分解代谢的问题，敲除了鼠李糖异构酶基因rhaA，岩藻糖异构酶基因fucI和L‑岩藻糖激酶基因fucK。又将α‑L‑岩藻糖苷酶编码基因afcA整合至宿主基因组arsB位点，且使用强启动子PJ23119实现基因的启动表达。又通过改变IPTG和乳糖的添加量优化培养条件，最终摇瓶最高产量达到6.31g/L。分批补料培养条件下，在5L发酵罐中L‑岩藻糖的产量可达51.05g/L，是迄今报道的最高值，OD600最高达到了144，在大规模工业应用中表现出显著的生产潜力。
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公开(公告)号：CN115417507A
公开(公告)日：2022-12-02
申请号：CN202210737434.4
申请日：2022-06-21
Applicant: 江南大学
IPC: C02F3/34 , B09C1/10 , C09K17/14 , C12N9/02 , C02F101/38
Abstract: 本发明公开了一种高效降解兽药抗生素残留的漆酶及其应用，属于环境生物技术领域。本发明筛选到一种来源于Lysinibacillus fusiformis的漆酶，相比现有的技术，本发明筛选到的漆酶能够耐受80℃的高温，具有在更高温度下长时间稳定降解抗生素，良好的耐热性和优异的降解效率等能力。能够在短时间内降解大量抗生素，并且生产成本低，所用设备少，有助于工业上对兽药抗生素残留的控制。
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公开(公告)号：CN114990037A
公开(公告)日：2022-09-02
申请号：CN202210573394.4
申请日：2022-05-24
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/70 , C12N15/61 , C12N15/56 , C12N15/54 , C12N15/55 , C12N15/53 , C12P19/26 , C12R1/19
Abstract: 本发明提供了一种高产乳酰‑N‑四糖的重组大肠杆菌的构建方法及应用，属于微生物代谢工程技术领域。本发明以前期研究中获得的高产乳酰‑N‑三糖II的重组大肠杆菌为出发菌株，并在该大肠杆菌基因组上整合有单拷贝的galE，通过质粒组合优化表达lgtA、pF和galE，并通过CRISPR‑Cas9基因编辑系统在大肠杆菌宿主基因组上敲除ugD，以缓解中间产物的代谢分流，同时加强产物合成过程中辅因子的再生与循环，进一步提高乳酰‑N‑四糖的产量，在摇瓶发酵实验过程中，重组大肠杆菌生产乳酰‑N‑四糖的能力为6.16g/L，在5L发酵罐中，乳酰‑N‑四糖的产量达到57.5g/L，为进一步工业化生产乳酰‑N‑四糖奠定了基础。
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公开(公告)号：CN114874964A
公开(公告)日：2022-08-09
申请号：CN202210666616.7
申请日：2022-06-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高产2′‑岩藻糖基乳糖的重组大肠杆菌的构建方法及应用，属于微生物基因工程领域。本发明在敲除lacZ和wcaJ基因的BL21(DE3)宿主菌中，通过引入从头途径基因(manB、manC、gmd、wcaG)和编码α‑1,2‑岩藻糖基转移酶的wbgL基因来实现2′‑岩藻糖基乳糖的合成。在引入编码正转录调控因子的基因rcsA和rcsB基因来调节wbgL基因的表达，并采用强启动子PJ23119实现基因的表达。得到的重组大肠杆菌在分批发酵条件下2′‑岩藻糖基乳糖的产量最大可达9.055g/L，在3L发酵罐中，2′‑岩藻糖基乳糖的产量达到79.23g/L，是迄今报道的最高值，在大规模工业应用中表现出显著的生产潜力。
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公开(公告)号：CN113684164A
公开(公告)日：2021-11-23
申请号：CN202110900122.6
申请日：2021-08-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高产乳酰‑N‑新四糖的微生物的构建方法及应用，属于微生物基因工程领域。本发明是在本团队之前的构建完成的敲除相关基因的菌株基础上，过表达β‑1,3‑乙酰葡萄糖胺转移酶，β‑1,4‑半乳糖基转移酶和/或UDP‑葡萄糖4差向异构酶的编码基因，使其拥有生产乳酰‑N‑四糖的合成能力。本发明通过筛选高效的β‑1,4‑半乳糖基转移酶基因，并通过组合调控乳酰‑N‑新四糖合成途径中lgtA，Aa‑β‑1,4‑GalT和galE的表达，从而精确调控代谢通路的碳通量，缓解代谢压力。在摇瓶实验中，大肠杆菌生产乳酰‑N‑新四糖的能力为0.91g/L，在3L发酵罐中，乳酰‑N‑新四糖的产量达到12.14g/L，具备工业应用的前景。
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