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公开(公告)号：CN103173429A
公开(公告)日：2013-06-26
申请号：CN201310076338.0
申请日：2013-03-11
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种热稳定性提高的重组胰蛋白酶，属于酶工程领域。本发明通过融合PCR技术，在胰蛋白酶上融合有前导肽序列，其中优选YVEF。获得了在40℃、50℃和60℃下，热稳定性分别比野生胰蛋白酶提高了1.77,2.6和31倍的重组胰蛋白酶。解决了胰蛋白酶热稳定性差的问题。该重组胰蛋白酶生产工艺简单、便于工业化应用。
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公开(公告)号：CN112972601B
公开(公告)日：2024-03-26
申请号：CN201911283682.0
申请日：2019-12-13
Applicant: 上海家化联合股份有限公司 , 江南大学
IPC: A61K36/8984 , A61K8/9794 , A61K8/9789 , A61P17/18 , A61Q19/08
Abstract: 本发明公开了一种由人参、熟地黄、灵芝、铁皮石斛、桂花和黄精提取得到的中药提取物。本发明还涉及采用姬松茸与植物乳杆菌作为混合菌进行发酵后得到的中药发酵产物。本发明还涉及包含所述中药提取物和/或所述中药发酵产物的皮肤外用剂。
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公开(公告)号：CN114634920B
公开(公告)日：2024-02-27
申请号：CN202210300484.6
申请日：2022-03-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产人源透明质酸酶PH20的重组毕赤酵母及其构建方法，属于基因工程技术领域。本发明通过对hPH20的C端结构域优化，结合N端蛋白标签融合策略，构建了一个hPH20突变体AP2‑△491C；利用整合型质粒pPIC9K和强启动子PAOX1实现了hPH20突变体在P.pastoris GS115中的诱导表达，经3‑L发酵罐培养，发酵液中酶活达到258.1U/L，是目前微生物表达系统发酵制备hPH20的最高水平。该突变体能够水解机
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公开(公告)号：CN117467632A
公开(公告)日：2024-01-30
申请号：CN202210889750.3
申请日：2022-07-27
Applicant: 江南大学 , 南京汉欣医药科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种肝素N‑磺基转移酶突变体构建方法，属于生物工程技术领域。本发明对人源的双功能酶(NCBI Reference Sequence:NP_001534.1)中的硫酸乙酰肝素N‑磺基转移酶1进行了改造，通过截短、单点突变、多点组合突变等生物技术手段，获得了能够使得稳定性和催化效率显著提升的肝素N‑磺基转移酶突变体。本发明提供的人源肝素N‑磺基转移酶突变体催化效率比人源肝素N‑磺基转移酶原始菌株提高了1.3倍，且在37℃下的稳定性也较野生型有显著提升，更有利于长时间催化获得高转化率的N‑磺酸化肝素前体。
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公开(公告)号：CN113862248B
公开(公告)日：2023-10-03
申请号：CN202111203936.0
申请日：2021-10-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了肝素裂解酶在枯草芽孢杆菌中的融合表达及其应用，属于生物工程技术领域。本发明以枯草芽孢杆菌为宿主异源表达Bacteroides thetaiotaomicron来源的肝素裂解酶I，通过N端融合寡肽序列，优化启动子及5'UTR序列，并于BhepI基因C端用GGGGS短肽连接肝素裂解酶III的基因FhepIII，构建融合酶BhepI‑FhepIII，通过两者对肝素钠裂解能力的比较，发现融合酶得到的肝素分子量可低至1300Da以下，且其抗凝血活性更强，为肝素裂解酶在枯草芽孢杆菌中的工业化生产及低分子量肝素制备奠定了基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116790649A
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202310852392.3
申请日：2023-07-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及UDP‑葡萄糖醛酸和UDP‑N‑乙酰氨基葡萄糖的体外酶法制备，属于生物工程及生物合成技术领域。本发明将不同来源的葡萄糖醛酸激酶GlcAK、UDP‑葡萄糖醛酸焦磷酸化酶USP、N‑乙酰己胺1‑激酶NahK、N‑乙酰葡糖胺激酶AmgK、UDP‑N‑乙酰氨基葡萄糖焦磷酸化酶GlmU、聚磷酸激酶PPK的基因在大肠杆菌BL21(DE3)异源表达，得到的重组酶组合成功催化合成UDP‑葡萄糖醛酸和UDP‑N‑乙酰氨基葡萄糖。偶联ATP循环体系后，将反应体系扩大并提高底物浓度，50mL体系中UDP‑葡萄糖醛酸产量可达12.9g·L‑1，UDP‑N‑乙酰氨基葡萄糖产量可达18.2g·L‑1。本发明实现了UDP‑葡萄糖醛酸和UDP‑N‑乙酰氨基葡萄糖的高效催化合成，具有步骤简短，收率高，反应温和等优点，具有重要的应用前景。
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公开(公告)号：CN116676357A
公开(公告)日：2023-09-01
申请号：CN202310567625.5
申请日：2023-05-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种N‑磺酸化肝素前体寡糖的制备方法，属于生物工程技术领域。本发明利用肝素裂解酶III和不饱和葡萄糖醛酸酶对高分子量肝素前体的依次降解，成功制备获得不同聚合度的不饱和偶数寡糖和饱和奇数寡糖，并利用人源硫酸乙酰肝素双功能N‑脱乙酰/N‑磺基转移酶对特定聚合度的肝素前体寡糖进行了催化，获得了具有特定聚合度的N‑磺酸化肝素前体寡糖，为后续酶法催化获得肝素寡糖提供了底物来源。
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公开(公告)号：CN116536382A
公开(公告)日：2023-08-04
申请号：CN202310479710.6
申请日：2023-04-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种基于APS为活性磺酸供体的合成和再生系统的构建方法，属于生物技术领域。本发明提供了APS作为活性磺酸供体的新用途，并通过筛选不同的ATP的硫酸化酶，以及向反应体系中添加焦磷酸酶消除副产物焦磷酸，大大提高了APS的合成效率。进一步通过构建APS循环再生系统，实现了磺酸化修饰体系的构建，APS循环再生系统相比较PAPS再生系统有着路径更短、效率更高的优势，显著提高了磺酸化修饰效率并成功降低了合成成本。
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公开(公告)号：CN113881612A
公开(公告)日：2022-01-04
申请号：CN202110392140.8
申请日：2021-04-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产肝素前体的重组大肠杆菌及其应用，属于生物工程技术领域。本发明首先在大肠杆菌EcN(Escherichia coli Nissle 1917)中筛选异源表达UDP‑N‑乙酰葡萄糖胺和UDP‑葡萄糖醛酸途径基因glmS、glmM和glmU以及galU和ugd，通过途径基因组合，过表达EcN来源肝素前体合酶基因，摇瓶水平达到1.29g/L，发酵罐优化肝素前体产量达到15g/L。
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公开(公告)号：CN113862248A
公开(公告)日：2021-12-31
申请号：CN202111203936.0
申请日：2021-10-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了肝素裂解酶在枯草芽孢杆菌中的融合表达及其应用，属于生物工程技术领域。本发明以枯草芽孢杆菌为宿主异源表达Bacteroides thetaiotaomicron来源的肝素裂解酶I，通过N端融合寡肽序列，优化启动子及5'UTR序列，并于BhepI基因C端用GGGGS短肽连接肝素裂解酶III的基因FhepIII，构建融合酶BhepI‑FhepIII，通过两者对肝素钠裂解能力的比较，发现融合酶得到的肝素分子量可低至1300Da以下，且其抗凝血活性更强，为肝素裂解酶在枯草芽孢杆菌中的工业化生产及低分子量肝素制备奠定了基础。
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