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公开(公告)号:CN116790649A
公开(公告)日:2023-09-22
申请号:CN202310852392.3
申请日:2023-07-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及UDP‑葡萄糖醛酸和UDP‑N‑乙酰氨基葡萄糖的体外酶法制备,属于生物工程及生物合成技术领域。本发明将不同来源的葡萄糖醛酸激酶GlcAK、UDP‑葡萄糖醛酸焦磷酸化酶USP、N‑乙酰己胺1‑激酶NahK、N‑乙酰葡糖胺激酶AmgK、UDP‑N‑乙酰氨基葡萄糖焦磷酸化酶GlmU、聚磷酸激酶PPK的基因在大肠杆菌BL21(DE3)异源表达,得到的重组酶组合成功催化合成UDP‑葡萄糖醛酸和UDP‑N‑乙酰氨基葡萄糖。偶联ATP循环体系后,将反应体系扩大并提高底物浓度,50mL体系中UDP‑葡萄糖醛酸产量可达12.9g·L‑1,UDP‑N‑乙酰氨基葡萄糖产量可达18.2g·L‑1。本发明实现了UDP‑葡萄糖醛酸和UDP‑N‑乙酰氨基葡萄糖的高效催化合成,具有步骤简短,收率高,反应温和等优点,具有重要的应用前景。
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公开(公告)号:CN119776311A
公开(公告)日:2025-04-08
申请号:CN202411833865.6
申请日:2024-12-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种透明质酸合酶突变体及其应用,涉及生物技术领域。本发明通过对氨基酸序列如SEQ ID NO.1的透明质酸合酶进行N端、C端氨基酸的缺失以及对280和540位点进行点突变等改造,得到了透明质酸合酶突变体。将本发明的透明质酸合酶突变体导入宿主菌中并进行发酵培养,相较于未改造之间的透明质酸合酶,其透明质酸产量大幅度提高。除此以外,在强化UDP‑葡萄糖脱氢酶表达的前提下,将本发明的透明质酸合酶和透明质酸降解酶通过GS linker连接并进行异源表达,其在5L发酵罐的产量为15g/L左右,且生成的透明质酸为透明质酸四糖。
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公开(公告)号:CN118562696A
公开(公告)日:2024-08-30
申请号:CN202410730365.3
申请日:2024-06-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种耐粘稠的谷氨酸棒杆菌及其应用,属于生物基因工程技术领域。本发明的谷氨酸棒杆菌由由谷氨酸棒杆菌ATCC 13032突变得到,突变位点包括:将862902位点上的胞嘧啶突变为胸腺嘧啶;将862903位点上的鸟嘌呤突变为腺嘌呤;将862953位点上的胞嘧啶突变为胸腺嘧啶;将862961位点上的腺嘌呤突变为鸟嘌呤;在862958位点上插入胞嘧啶和胸腺嘧啶;将862963位点上的鸟嘌呤缺失突变。本发明的谷氨酸棒杆菌在高粘稠环境中的耐受性和在低溶解氧环境下的生长代谢能力显著提高,从而提高了粘多糖的产量,避免因产生的粘多糖使得发酵液粘稠,溶氧不足进而限制谷氨酸棒杆菌代谢,最终影响粘多糖合成的问题。
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公开(公告)号:CN113684166B
公开(公告)日:2023-07-04
申请号:CN202110926226.4
申请日:2021-08-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高效合成软骨素及其寡聚糖的重组谷氨酸棒杆菌,属于生物工程技术领域。本发明构建的重组谷氨酸棒杆菌生产的软骨素寡聚糖的产量达到20g L‑1。通过构建软骨素合成途径并异源表达软骨素裂解酶,可以直接一步法发酵获得软骨素寡聚糖。本发明为微生物高效合成高纯度软骨素奠定了坚实的基础,构建的重组谷氨酸棒杆菌适合于工业化生产应用。
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公开(公告)号:CN111518736B
公开(公告)日:2022-04-15
申请号:CN201911018182.4
申请日:2019-10-24
Applicant: 华熙生物科技股份有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高效合成高纯度透明质酸及其寡聚糖的重组谷氨酸棒状杆菌,属于生物工程技术领域。本发明构建的重组谷氨酸棒状杆菌生产的透明质酸的产量达到40g/L,粗产品纯度达到95%。通过外源添加透明质酸水解酶并优化发酵条件,可以获得特定分子量的透明质酸寡糖,并实现透明质酸产量的进一步提升,使产量达到72g/L。本发明为微生物高效合成高纯度透明质酸奠定了坚实的基础,构建的重组谷氨酸棒状杆菌适合于工业化生产应用。
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公开(公告)号:CN118421586A
公开(公告)日:2024-08-02
申请号:CN202410614080.3
申请日:2024-05-17
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种合成不同分子量透明质酸的透明质酸合酶突变体,属于生物酶工程技术领域。本发明的透明质酸合酶突变体是对氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的透明质酸合酶进行点突变或者复合突变,在此基础上筛选出的透明质酸合酶突变体能够合成不同分子量的透明质酸。本发明突变后的透明质酸合酶与突变前的透明质酸合酶相比,能够合成不同分子量的透明质酸,且所获得的透明质酸分子量范围在300KDa‑40000KDa,同时透明质酸的产量增加,具有很高的工业应用价值。
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公开(公告)号:CN108841771B
公开(公告)日:2020-12-01
申请号:CN201810756333.5
申请日:2018-07-11
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产软骨素的重组谷氨酸棒杆菌及其应用,属于生物工程技术领域。本发明首先在谷氨酸棒杆菌异源表达UDP‑N‑乙酰葡萄糖胺C4异构酶编码基因kfoA和软骨素合成酶编码基因kfoC,以及过表达glmU、galU和ugd以及glmS和glmM,初步构建了软骨素的合成途径;随后通过对软骨素合成酶(KfoC)进行随机突变,发现KfoC(H357G N363S)突变体可以将软骨素产量提高200%。利用蛋白质融合技术将kfoA,kfoC(突变体)和ugd基因(编码UDP‑葡萄糖脱氢酶)融合,使表达的UDP‑N‑乙酰葡萄糖胺C4异构酶,软骨素合成酶和UDP‑葡萄糖脱氢酶形成人工复合体,将软骨素的产量进一步提高。
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公开(公告)号:CN119498484A
公开(公告)日:2025-02-25
申请号:CN202411640496.9
申请日:2024-11-18
Applicant: 江苏集萃未来食品技术研究所有限公司 , 江南大学
IPC: A23L11/65 , A23L11/50 , A23L33/00 , A61K8/9789 , A61K8/9794 , A61K8/60 , A61Q19/00 , A61Q19/08 , A61Q19/02
Abstract: 本发明公开了一种动态pH调控的多功能豆浆产品及其制备方法与应用,将豆浆、糙米粉、蔗糖和石榴皮粉混合得到豆浆混合液,将益生菌接种至所述豆浆混合液中进行发酵,通过动态监控发酵过程中的pH值,调整发酵状态,优化发酵工艺,优化菌株生长环境,保证发酵过程的稳定性和产品质量的一致性,不仅适用于食品领域,还可以拓展到化妆品行业,利用发酵豆浆中的活性成分开发护肤品或化妆品,增加产品的附加值。
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公开(公告)号:CN113684166A
公开(公告)日:2021-11-23
申请号:CN202110926226.4
申请日:2021-08-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高效合成软骨素及其寡聚糖的重组谷氨酸棒杆菌,属于生物工程技术领域。本发明构建的重组谷氨酸棒杆菌生产的软骨素寡聚糖的产量达到20g L‑1。通过构建软骨素合成途径并异源表达软骨素裂解酶,可以直接一步法发酵获得软骨素寡聚糖。本发明为微生物高效合成高纯度软骨素奠定了坚实的基础,构建的重组谷氨酸棒杆菌适合于工业化生产应用。
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公开(公告)号:CN118421586B
公开(公告)日:2025-05-16
申请号:CN202410614080.3
申请日:2024-05-17
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种合成不同分子量透明质酸的透明质酸合酶突变体,属于生物酶工程技术领域。本发明的透明质酸合酶突变体是对氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的透明质酸合酶进行点突变或者复合突变,在此基础上筛选出的透明质酸合酶突变体能够合成不同分子量的透明质酸。本发明突变后的透明质酸合酶与突变前的透明质酸合酶相比,能够合成不同分子量的透明质酸,且所获得的透明质酸分子量范围在300KDa‑40000KDa,同时透明质酸的产量增加,具有很高的工业应用价值。
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